四并环化合物及其药物组合物和应用的制作方法

1.本发明属于药物化学领域，具体涉及一类四并环化合物、包含该类化合物的药物组合物及其在医药领域中的应用。


背景技术：

2.从1982年末发现ras家族gtp酶的(其包含的成员kras，nras，和hras)与癌症相关开始，在人类癌症中的发生率高达20％～30％。ras蛋白充当分子开关，其在活性的gtp结合状态和无活性的gdp结合状态之间循环。由鸟嘌呤核苷酸交换因子(gef)激活，其gtp结合状态的ras与许多效应子相互作用。返回无活性状态由gtp酶激活蛋白(gaps)驱动，其通过将弱的内在gtp酶活性加速至多5个数量级来下调活性ras。
3.突变ras蛋白是否需要gef活性才能完全激活仍有待充分研究，并且可能因特定突变而异。研究最多的ras sevenless son(sos)的蛋白质，已知两种人类同种型sos1和sos2。试图通过抑制肽模拟与纳摩尔亲和力正位sos螺旋识别烃装订肽的ras-sos相互作用，但仅具有低的细胞活性。基于片段的筛选，设计合理，和高通量筛选方法导致小分子寻址kras-sos1相互作用的鉴定，得到的具有中等微摩尔亲和力。
4.sos1蛋白由1333个氨基酸(150kda)组成。sos1是一种多结构域蛋白，所述多结构域蛋白具有两个串联的n-末端组蛋白结构域(hd)，接着是dbl同源结构域(dh)、普列克底物蛋白(pleckstrin)同源结构域(ph)、螺旋接头(hl)、ras交换基序(rem)、cdc25同源结构域和c末端富脯氨酸的结构域(pr)。sos1具有两个针对ras家族蛋白的结合位点；催化位点，所述催化位点结合gdp结合的ras家族蛋白以促进鸟嘌呤核苷酸交换；变构位点，所述变构位点结合gtp结合的ras家族蛋白，这导致sos1的催化gef功能进一步增加。公开数据表明sos1关键参与在癌症中的突变kras活化和致癌信号传导中(jeng等人,nat.commun.,2012,3:1168)。消耗sos1水平会降低携带kras突变的肿瘤细胞的增殖率和存活，而在kras野生型细胞系中没有观察到作用。sos1丧失的影响无法通过引入催化位点突变的sos1弥补，证明了sos1gef活性在kras突变癌细胞中的重要作用。
5.sos1通过除ras家族蛋白突变之外的机制关键地参与在癌症中的ras家族蛋白信号传导的激活中。sos1与衔接蛋白grb2相互作用，并且所得sos1/grb2复合物结合于激活的/磷酸化的受体酪氨酸激酶(例如，egfr、erbb2、erbb3、erbb4、pdgfr-a/b、fgfr1/2/3、igf1r、insr、alk、ros、trka、trkb、trkc、ret、c-met、vegfr1/2/3、axl)(pierre等人,biochem.pharmacol.,2011,82(9):1049-56)。sos1还被募集到其他磷酸化的细胞表面受体，诸如t细胞受体(tcr)、b细胞受体(bcr)和单核细胞集落刺激因子受体(salojin等人,j.biol.chem.2000,275(8):5966-75)。sos1到ras家族蛋白近端的质膜上的这种定位使sos1能够促进ras家族蛋白激活。ras家族蛋白的sos1激活也可以通过sos1/grb2与慢性粒细胞白血病中常见的bcr-abl癌蛋白的相互作用来介导。
6.sos1也是用于激活gtp酶rac1(ras相关的c3肉毒杆菌毒素底物1)的gef(innocenti等人,j.cell biol.,2002,156(1):125-36)。与ras家族蛋白一样，rac1牵涉在
多种人类癌症和其他疾病的发病机理(bid等人,mol.cancer ther.2013,12(10):1925-34)中。
7.在本文中，我们描述了新型sos1抑制剂化合物，其与sos1催化位点结合并且同时防止与ras家族蛋白的相互作用及其激活。这导致对sos1与ras家族蛋白、特别是kras(具有低单位数纳摩尔ic50活性)的相互作用的显著抑制作用，并且因此显著降低kras突变体癌细胞系中的erk磷酸化。
8.预期本文所述的选择性sos1抑制剂化合物为患有与对ras家族蛋白信号传导依赖性相关的癌症的患者提供药理学益处。预期被sos1抑制剂化合物靶向的此类癌症包括展现出在ras家族蛋白途径中的组分(蛋白质、基因)的改变(突变、基因扩增、过表达)的那些，所述组分诸如kras、nras、hras、受体酪氨酸激酶(例如，egfr、erbb2、erbb3、erbb4、pdgfr-a/b、fgfr1/2/3、igf1r、insr、alk、ros、trka、trkb、trkc、ret、c-met、vegfr1/2/3、axl)、gap(例如，nf1)和sos1。另外，鉴于sos1在rac1激活中的作用，表现出对rac1依赖性的癌症预期被sos1抑制剂化合物靶向。此外，在与ras家族蛋白途径失调相关的其他疾病诸如神经纤维瘤病、努南综合征(ns)、心面皮肤综合征(cfc)和1型遗传性牙龈纤维瘤病中，预期sos1抑制剂化合物也将提供药理学益处。
9.除了抑制作用和效力之外，本文公开的化合物显示出良好的溶解性、优秀的dmpk特性和对人激酶组的激酶的良好选择性。


技术实现要素：

10.发明要解决的问题
11.本发明旨在提供一类结构新颖的用作sos1抑制剂的四并环化合物，其表现出对肿瘤细胞很好的抑制活性，且成药性好，具有广阔的药物开发前景。
12.用于解决问题的方案
13.第一方面，本发明提供了一种如式i所示的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、互变异构体、代谢产物或前药，其中
[0014][0015]
其中，
[0016]
a选自c
6-c
10
芳基、5至6元单环杂芳基或9至10元二环杂芳基，且其中所述芳基、单环杂芳基和二环杂芳基各自任选地被m个独立的r4取代,其中m独立地为0至5中的任一整数；
[0017]
x和y各自独立地选自cr7或n；
[0018]
z1和z2各自独立地选自-o-、-cr
7-或-nr
7-；
[0019]
l1、l2和l3各自独立地独立选自-(ch2)
n-或-(ch2)
n-o-(ch2)
p-o-(ch2)
o-或-o-(ch2)
q-，其中每一个n、o、p和q各自独立地为0至3中的任一整数；
[0020]
r1和r2各自独立地选自氢和c
1-c8烷基；或者r1和r2与其所连接的碳原子共同形成c
3-c6环烷基，所述烷基和环烷基各自任选地被至少1个r8取代，r1或r2与a环形成4-8元饱和碳环或杂环；
[0021]
r3选自氢、卤素、氰基、羟基、氨基、-nh(r7)、-c(＝o)-nh(r7)、c
1-c6烷基、c
2-c4烯基、c
2-c4炔基、c
3-c6环烷基、3至8元杂环烷基、c
1-c3烷氧基和c
1-c6卤代烷基，且其中所述烷基、烯基、炔基、环烷基、杂环烷基、烷氧基和卤代烷基各自任选地被至少1个r8取代；
[0022]
r4选自氢、卤素、氰基、羟基、氨基、-nh(r7)、-c(＝o)-nh(r7)、c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基、3至8元杂环烷基、c
1-c3烷氧基和c
1-c6卤代烷基，所述烷基、环烷基、杂环烷基、烷氧基和卤代烷基各自任选地被至少1个r8取代；
[0023]
r5和r6各自独立地选自氢、卤素、氰基、羟基、氨基、-n(r7)(r8)、c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基、3至8元杂环烷基、c
1-c3烷氧基和c
1-c6卤代烷基，或者r7和r8与其所连接的氮原子共同形成5至6元杂环烷基，且其中所述烷基、环烷基、杂环烷基、烷氧基和卤代烷基各自任选地被至少1个r
10
取代；
[0024]
r7各自独立地选自氢、卤素、氰基、羟基、氨基、-n(r8)(r9)、-c(＝o)-n(r8)(r9)、-c(＝o)-r8、-c(＝o)-or8、-s(＝o)
2-r8、c
1-c6烷基、c
3-c6环烷基、3至8元杂环烷基、5-10元芳基或杂芳基、c
1-c3烷氧基或c
1-c6卤代烷基，或者r8和r9与其所连接的氮原子共同形成5至6元杂环烷基，且其中所述烷基、环烷基、杂环烷基、烷氧基和卤代烷基各自任选地被至少1个r8取代；
[0025]
每一个r8和r9各自独立地选自氢、卤素、氰基、羟基、氨基、氨基甲酰基、c
1-c6烷基、c
1-c6杂烷基、c
3-c8环烷基、3至14元杂环烷基、c
1-c3烷氧基、c
1-c3卤代烷氧基、c
6-c
10
芳基、5至6元单环杂芳基或9至10元二环杂芳基，且其中所述烷基、杂烷基、环烷基、杂环烷基、烷氧基、卤代烷氧基、芳基、单环杂芳基和二环杂芳基各自任选地被至少1个r
10
取代；
[0026]
r1至r9中所述杂烷基、杂环烷基、杂环烷氧基、杂芳基中所含的杂原子或杂原子团分别独立地选自-c(＝o)n(r
10
)-、-n(r
10
)-、-nh-、-n＝、-o-、-s-、-c(＝o)o-、-c(＝o)-、-c(＝s)-、-s(＝o)-、-s(＝o)
2-和-n(r
10
)c(＝o)n(r
10
)-，所述杂原子或杂原子团的数目分别独立地选自1、2和3；
[0027]
每一个r
10
各自独立地选自氢、氯、氟、氰基、羟基、氨基、异丙基、环丙基、甲基、二氟甲基、三氟甲基、甲氧基、三氟甲氧基、乙氧基、2,2-二氟乙氧基、2,2,2-三氟乙氧基和苯基。
[0028]
优选地，其为如式i-1、i-2、i-3、i-4、i-5或i-6任一所示的化合物，
[0029]
[0030][0031]
更优选地，其为如式i-1-1、i-2-1、i-3-1、i-4-1、i-5-1或i-6-1任一所示的化合物，
[0032][0033]
更优选地，本发明提供了如式i、式i-1、i-2、i-3、i-4、i-5、i-6、i-1-1、i-2-1、i-3-1、i-4-1、i-5-1或i-6-1所示的具体化合物，其为：
[0034]
[0035]
[0036]
[0037]
[0038]
[0039]
[0040]
[0041][0042]
第二方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含如式i、式i-1、i-2、i-3、i-4、i-5、i-6、i-1-1、i-2-1、i-3-1、i-4-1、i-5-1或i-6-1所示的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、互变异构体、代谢产物或前药的一种或多种。
[0043]
优选地，所述药物组合物中还包含至少一种药学上可接受的辅料。
[0044]
第三方面，本发明提供了如式i、式i-1、i-2、i-3、i-4、i-5、i-6、i-1-1、i-2-1、i-3-1、i-4-1、i-5-1或i-6-1所示的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、互变异构体、代谢产物或前药或者包含其的药物组合物在制备预防和/或治疗由sos1过度表达引起的疾病的药物中的用途。
[0045]
第四方面，本发明提供了如式i、式i-1、i-2、i-3、i-4、i-5、i-6、i-1-1、i-2-1、i-3-1、i-4-1、i-5-1或i-6-1所示的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、互变异构体、代谢产物或前药或者包含其的药物组合物在制备sos1抑制剂药物中的用途。
[0046]
第五方面，本发明提供了如式i、式i-1、i-2、i-3、i-4、i-5、i-6、i-1-1、i-2-1、i-3-1、i-4-1、i-5-1或i-6-1所示的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、互变异构体、代谢产物或前药或者包含其的药物组合物在制备用于治疗和/或预防癌症药物中的应用。
[0047]
优选地，所述癌症为胰腺癌、结直肠癌和肺癌中的任一种或多种。
[0048]
第六方面，本发明提供了一种用于预防和/或治疗由sos1过度表达引起的疾病或病症的方法，其包括将预防和/或治疗有效量的如式i、式i-1、i-2、i-3、i-4、i-5、i-6、i-1-1、i-2-1、i-3-1、i-4-1、i-5-1或i-6-1所示的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、互变异构体、代谢产物或前药或者包含其的药物组合物施用于对其有需要的个体。
[0049]
第七方面，本发明提供了一种用于预防和/或治疗由sos1过度表达引起的疾病或
病症的方法，其包括将预防和/或治疗有效量的如化合物1-化合物94共94个化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、互变异构体、代谢产物或前药或者包含其的药物组合物施用于对其有需要的个体。
[0050]
发明的效果
[0051]
本发明提供了一系列结构新颖的四并环化合物，经相关的酶和细胞活性试验证明，本发明的化合物具有优良的细胞增殖抑制活性，在体外实验中，对细胞增殖的ic
50
值达到nm级别，可在多种肿瘤中获得良好的应用。同时，本发明的化合物对kras:sos1激活具有非常好的抑制作用，可以达到nm级别，适于制备成sos1抑制剂，用于预防和/或治疗与sos1激活相关的疾病或病症，例如癌症(包括但不限于胰腺癌、结直肠癌和肺癌)。
具体实施方式
[0052]
一般术语和定义
[0053]
除非有相反陈述，否则在本发明中所使用的术语具有下述含义。
[0054]“烷基”是指饱和的脂族烃基团，包括1至20个碳原子的直链和支链基团，例如可以是1至18个碳原子、1至12个碳原子、1至8个碳原子、1至6个碳原子或1至4个碳原子的直链和支链基团。在本发明中，“烷基”可以是一价、二价或三价基团。非限制性实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基、1-乙基-2-甲基丙基、1,1,2-三甲基丙基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2-乙基丁基及其各种支链异构体等。非限制性实例还包括但不限于亚甲基、次甲基、亚乙基、次乙基、亚丙基、次丙基、亚丁基、次丁基及其各种支链异构体。另外，在本发明中，“烷基”可以是任选取代的或未取代的。
[0055]“烷氧基”是指
“‑
o-烷基”基团，其中“烷基”的定义如上所述。
[0056]“烯基”是指不饱和的脂族烃基团，包括1至20个碳原子以及至少1个碳碳双键的直链和支链基团，例如可以是1至18个碳原子、1至12个碳原子、1至8个碳原子、1至6个碳原子或1至4个碳原子的直链和支链基团。在本发明中，“烯基”可以是一价、二价或三价基团。非限制性实例包括但不限于乙烯基(-ch＝ch2)、丙烯-1-基(-ch＝ch-ch3)、丙烯-2-基(-c(ch3)＝ch2)、丁烯-1-基(-ch＝ch-ch
2-ch3)、丁烯-2-基(-c(c2h5)＝ch2)、1-甲基丙烯-1-基(-c(ch3)＝ch-ch3)及其各种支链异构体等。非限制性实例还包括但不限于1,1-亚乙烯基(＝c＝ch2)、1,2-亚乙烯基(-ch＝ch-)、1,1-亚丙烯基(＝c＝ch-ch3)、1,2-亚丙烯基(-ch＝c(ch3)-)、1,3-亚丙烯基(-ch＝ch-ch
2-)及其各种支链异构体。另外，在本发明中，“烯基”可以是任选取代的或未取代的。
[0057]“炔基”是指不饱和的脂族烃基团，包括1至20个碳原子以及至少1个碳碳叁键的直链和支链基团，例如可以是1至18个碳原子、1至12个碳原子、1至8个碳原子、1至6个碳原子或1至4个碳原子的直链和支链基团。在本发明中，“炔基”可以是一价、二价或三价基团。非限制性实例包括但不限于乙炔基(-c≡ch)、丙炔基(-c≡c-ch3)、丁炔基戊炔基及其各种支链异构体等。非限制性实例还包括但不限于亚乙炔基亚丙炔基亚丁炔基及其各种支链异构体。另外，
在本发明中，“炔基”可以是任选取代的或未取代的。
[0058]“杂烷基”是指饱和的脂族烃基团，包括2至20个原子的直链和支链基团，例如可以是2至18个原子、2至12个原子、2至8个原子、2至6个原子或2至4个原子的直链和支链基团，其中一个或多个原子为选自氮、氧或s(o)m(其中m为0、1或2)的杂原子，其余为碳。在本发明中，“杂烷基”可以是一价、二价或三价基团。非限制性实例包括但不限于甲氧甲基(2-氧杂丙基)、甲硫甲基(2-硫杂丙基)、甲氨甲基(2-氮杂丙基)及其各种支链异构体等。另外，在本发明中，“杂烷基”可以是任选取代的或未取代的。
[0059]“环烷基”是指饱和或部分不饱和的、单环或多环的脂族烃基团，包括3至12个环原子，例如可以是3至12个、3至10个或3至6个环原子(即3至6元环)。单环环烷基的非限制性实例包括但不限于环丙基、环丁基、环戊基、环戊烯基、环己基、环己烯基、环己二烯基、环庚基、环庚三烯基、环辛基等。在本发明中，“环烷基”可以是任选取代的或未取代的。
[0060]“杂环烷基”是指饱和或部分不饱和的、单环或多环的脂族烃基团，包括3至20个环原子，例如可以是3至16个、3至12个、3至10个或3至6个环原子，其中一个或多个环原子为选自氮、氧或s(o)m(其中m为0、1或2)的杂原子，其余环原子为碳。优选杂环烷基包括3至12个环原子，其中1至4个环原子是杂原子，更优选包括3至10个环原子，最优选包括5或6个环原子，其中1至4个，优选1至3个，更优选1至2个是杂原子。单环杂环烷基的非限制性实例包括但不限于吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、吗啉基、硫代吗啉基、高哌嗪基等。多环杂环烷基的非限制性实例包括但不限于螺环或桥环的杂环烷基。
[0061]“卤素”是指氟、氯、溴和碘，优选氟、氯和溴。
[0062]“卤代烷基”或“卤代烷氧基”是指烷基或烷氧基基团被一个或多个相同或不同的卤素原子所取代，优选的烷基或烷氧基的实例包括但不限于：三氟甲基、三氟乙基、三氟甲氧基。
[0063]“氰基”是指
“‑
cn”基团。
[0064]“羟基”是指
“‑
oh”基团。
[0065]“氨基”是指
“‑
nh
2”基团。
[0066]“氨基甲酰基”是指
“‑
(c＝o)-nh
2”基团。
[0067]“芳基”是指含有6-14个环原子的单环、双环和三环的碳环体系、其中，至少一个环体系是芳香族的，其中每一个环体系包含3-7个原子组成的环，且有一个或多个连接点与分子的其余部分相连。实例包括但不限于：苯基、萘基、蒽等。优选地，所述芳基为6-10个或6-7个环原子的碳环体系。
[0068]“杂芳基”是指含有5-14个环原子的单环、双环和三环体系，其中，至少一个环体系是芳香族的，且至少一个环体系包含一个或多个选自氮、氧、硫的杂原子，其中每一个环体系包含5-7个原子组成的环，且有一个或多个连接点与分子的其余部分相连。术语“杂芳基”可以与术语“杂芳环”或“杂芳族化合物”交换使用。实例包括但不限于：呋喃基、咪唑基、2-吡啶基、3吡啶基、噻唑基、嘌呤基、喹啉基。优选地，所述杂芳基为5-10个环原子的环体系。
[0069]“任选”或“任选地”意味着随后所描述地事件或环境可以但不必发生，该说明包括该事件或环境发生或不发生的情形。例如，“任选被烷基取代的杂环基团”意味着烷基可以但并非必须存在，该说明包括杂环基团被烷基取代的情形和杂环基团不被烷基取代的情形。
[0070]“取代的”是指基团中的一个或多个氢原子，优选最多5个，更优选1至3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。
[0071]“药学上可接受的盐”是指由本发明中的化合物与相对无毒的酸或碱制备得到的盐。当本发明中的化合物含有相对偏酸性的官能团(例如羧基或磺酸基)时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的碱与其游离形式接触的方式获得碱加成盐。药学上可接受的碱加成盐的非限制性实例包括但不限于钠盐、钾盐、铵盐、钙盐、镁盐、有机胺盐或类似的盐。当本发明中的化合物含有相对偏碱性的官能团(例如氨基或胍基)时，可以通过在纯的溶液或合适的惰性溶剂中用足够量的酸与其游离形式接触的方式获得酸加成盐。药学上可接受的酸加成盐的非限制性实例包括但不限于无机酸盐(例如盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、硝酸盐、碳酸盐、碳酸氢盐、磷酸盐、磷酸一氢盐、磷酸二氢盐、亚磷酸盐、硫酸盐、硫酸氢盐等)、有机酸盐(例如乙酸盐、丙酸盐、异丁酸盐、丙二酸盐、琥珀酸盐、辛二酸盐、马来酸盐、富马酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、乳酸盐、扁桃酸盐、苯甲酸盐、邻苯二甲酸盐、甲磺酸盐、苯磺酸盐、对甲苯磺酸盐、葡糖醛酸等)以及氨基酸盐(例如精氨酸盐等)。药学上可接受的盐的具体形式还可参见berge et al.,“pharmaceutical salts”,journal of pharmaceutical science,1977,66:1-19)。本发明的某些特定化合物含有碱性和酸性的官能团，从而可以被转换成任一碱加成盐或酸加成盐。优选地，以常规方式使盐与碱或酸接触，再分离母体化合物，由此再生化合物的中性形式。化合物的母体形式与其各种盐形式的不同之处在于某些物理性质，例如在极性溶剂中的溶解度不同。根据本发明的实施例，优选如式i所示的化合物的药学上可接受的盐为酸加成盐，优选盐酸盐、氢溴酸盐、磷酸盐或硫酸盐，更优选盐酸盐。
[0072]“药物组合物”是指可供药用的组合物，其包含一种或多种如式i所示的化合物或其药学上可接受的形式(例如盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、互变异构体、代谢产物、前药等)，以及其他组分(例如药学上可接受的辅料)。
[0073]
在本发明中，“药学上可接受的辅料”是指在药物生产领域中广泛采用的辅助物料。使用辅料的主要目的在于提供一种使用安全、性质稳定和/或具有特定功能性的药物组合物，还在于提供一种方法，以便在为受试者施用药物之后，活性成分能够以所期望的速率溶出，或者促进活性成分在接受给药的受试者体内得到有效吸收。药学上可接受的辅料可以是具有惰性的填充剂，也可以是为药用组合物提供某种功能(例如稳定组合物的整体ph值或防止组合物中活性成分的降解)的功效成分。药学上可接受的辅料的非限制性实例包括但不限于粘合剂、助悬剂、乳化剂、稀释剂(或填充剂)、成粒剂、胶粘剂、崩解剂、润滑剂、抗粘着剂、助流剂、润湿剂、胶凝剂、吸收延迟剂、溶解抑制剂、增强剂、吸附剂、缓冲剂、螯合剂、防腐剂、着色剂、矫味剂、甜味剂等。
[0074]
本发明中的药物组合物可以使用本领域技术人员已知的任何方法来制备。例如，常规混合、溶解、造粒、乳化、磨细、包封、包埋和/或冻干工艺。
[0075]
在本发明中，使用药物组合物的目的在于促进针对生物体的给药，有利于活性成分的吸收，进而发挥生物活性。本发明的药物组合物可以通过任何形式给药，包括注射(动脉内、静脉内、肌肉内、腹膜内、皮下)、粘膜、口服(口服固体制剂、口服液体制剂)、直肠、吸入、植入、局部(例如眼部)给药等。口服固体制剂的非限制性实例包括但不限于散剂、胶囊剂、锭剂、颗粒剂、片剂等。口服或粘膜给药的液体制剂的非限制性实例包括但不限于混悬
剂、酊剂、酏剂、溶液剂等。局部给药制剂的非限制性实例包括但不限于乳剂、凝胶剂、软膏剂、乳膏剂、贴剂、糊剂、泡沫剂、洗剂、滴剂或血清制剂。胃肠外给药制剂的非限制性实例包括但不限于注射用溶液剂、注射用干粉剂、注射用悬浮液、注射用乳剂等。本发明的药物组合物还可以制成控制释放或延迟释放剂型(例如脂质体或微球)。
[0076]
优选地，本发明中的化合物或包含其的药物组合物以口服或静脉内给药的方式施用于对其有需要的个体。取决于给药对象的具体情况，也可以应用甚至优选其它施用途经。例如，对于健忘或对口服药物易发怒的患者，经皮施用将是非常重要的给药方式。在本发明中，施用途经能够以任何适用的方式进行变化或调整，以满足药物的性质、患者和医务人员的便利以及其它相关因素的需求。
[0077]
本发明的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、互变异构体、代谢产物或前药或者包含其的药物组合物具有优良的sos1酶活性及细胞增殖抑制活性，能够作为sos1抑制剂，用于预防和/或治疗由sos1过度表达引起的疾病或病症，具有良好的临床应用和医药用途。优选地，由sos1过度表达引起的疾病或病症的非限制性实例为癌症，包括但不限于胰腺癌、结直肠癌和肺癌。
[0078]
以下将结合具体实施例来阐述本发明的技术方案，下列实施例的提供旨在进一步说明本发明，而非用于限制本发明的范围。对本领域技术人员而言，在不脱离本发明的精神和范围的情况下，针对本发明的具体实施方式进行各种变化和改进将是显而易见的。
[0079]
本发明的化合物的制备可以通过本领域技术人员所熟知的合成方法来实现，包括但不限于下面列举的具体实施方式、其与其他化学合成方法相结合而形成的实施方式以及本领域技术人员所熟知的等同替换方式，优选的实施方式包括但不限于本发明的实施例。本发明中所使用的已知的起始原料可以提供本领域已知的方法来合成，或者通过常规的商业手段来购买(例如购自韶远化学科技、北京偶合科技等公司)。如无特殊说明，反应均在氩气氛或氮气氛下进行。氢化反应通常抽真空，充入氢气，反复操作3次。反应的温度为室温，温度范围是20℃-30℃。反应进程的监测可以通过本领域技术人员所熟知的合成方法来实现，包括但不限于薄层色谱法(tlc)。薄层层析硅胶板使用青岛海洋gf254硅胶板，展开剂体系包括但不限于a：二氯甲烷和甲醇体系；b：石油醚和乙酸乙酯体系，溶剂的体积比可以根据化合物的极性进行调节。
[0080]
本发明的化合物的分离纯化可以通过本领域技术人员所熟知的合成方法来实现，包括但不限于柱色谱法(cc)、高效液相色谱法(hplc)、超高效液相色谱法(uplc)等。柱色谱法一般使用青岛海洋200-300目硅胶作为载体，洗脱剂体系包括但不限于a：二氯甲烷和甲醇体系；b：石油醚和乙酸乙酯体系，溶剂的体积比可以根据化合物的极性进行调节，也可以加入少量的酸性或碱性防拖尾试剂进行调节。hplc图谱采用agilent1200dad hplc色谱仪(色谱柱：sunfire c18,150
×
4.6mm,5μm)或waters 2695-2996hplc色谱仪(色谱柱：gimini c18,150
×
4.6mm,5μm)测定。
[0081]
本发明的化合物的结构鉴定可以通过本领域技术人员所熟知的方法来实现，包括但不限于核磁共振(nmr)、质谱(ms)等。nmr图谱采用bruker avance-400或varian oxford-300核磁仪测定，测定溶剂为氘代二甲基亚砜(dmso-d6)、氘代氯仿(cdc13)或氘代甲醇(cd3od)，内标为四甲基硅烷(tms)，化学位移以10-6
(ppm)计。ms图谱采用agilent sqd(esi)质谱仪(型号：6110)或shimadzu sqd(esi)质谱仪(型号：2020)测定。
[0082]
中间体的制备
[0083]
中间体int-1的制备
[0084][0085]
第一步：合成化合物int-1b
[0086]
将化合物int-1a(25g,107mmol)溶于thf(250ml)中，室温下加入叔丁基亚磺酰胺(19.5g,161mmol)，然后加入钛酸四乙酯(61g,267.5mmol)。加完后，将反应液升温到70℃，反应4h。tlc显示反应结束后，将反应液冷却至室温，将反应液缓慢加入到冰水中，水相用乙酸乙酯萃取(3
×
150ml)。有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，过滤除去干燥剂，减压脱溶，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5/1(体积比))，得到化合物int-1b(27.7g，淡黄色固体，产率77％)。
[0087]
ms(esi):m/z 337[m+1]
+
。
[0088]
第二步：合成化合物int-1c
[0089]
将化合物int-1b(27g,80mmol)溶于甲醇(200ml)和水(100ml)的混合溶剂中，冷却到-20℃，然后分批加入硼氢化钠(6g,160mmol)，保持-20℃反应1h后，自然升温到室温，室温下继续反应3h。tlc显示反应结束后，减压蒸除甲醇，水相用乙酸乙酯萃取(3
×
150ml)。有机相合并后，用无水硫酸钠干燥，过滤除去干燥剂，减压脱溶，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1/1(体积比))，得到化合物int-1c(22g，淡黄色固体，产率82％)。
[0090]
ms(esi):m/z 339[m+1]
+
。
[0091]
第三步：合成化合物int-1
[0092]
将化合物int-1c(20g,59mmol)加入到4n hcl-乙酸乙酯溶液(200ml)中，室温反应2h。tlc显示反应结束后，析出固体，过滤，固体再用乙酸乙酯洗涤，干燥，得到化合物int-1的盐酸盐(12.3g，淡黄色固体，产率89％)。产品无需纯化，直接用于后续反应。
[0093]
ms(esi):m/z 235[m+1]
+
。
[0094]
中间体int-2的制备
[0095][0096]
中间体int-2的合成参考中间体int-1的制备的合成步骤，其中第一步用s-叔丁基亚磺酰胺代替叔丁基亚磺酰胺，合成得到化合物中间体int-2。
[0097]
ms(esi):m/z 235[m+1]
+
。
[0098]
目标化合物的制备和功能验证
[0099]
实施例1：化合物1的制备
[0100][0101]
化合物1的合成路线为：
[0102][0103]
化合物1的具体制备方法包括：
[0104]
第一步：合成化合物1c
[0105]
将化合物1a(4g,18.4mmol)和dipea(4.8g，36.8mmol)溶于dmf(40ml)中，冰浴下加入化合物1b 1-boc-3-羟甲基哌嗪(4g,18.4mmol)，然后将反应液80度反应1小时。tlc显示反应结束后，将反应液过滤，滤液旋干后，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝3:1(体积比))，得到化合物1c(5.4g，黄色油状物，产率71％)。
[0106]
ms(esi):m/z 414[m+1]
+
。
[0107]
第二步：合成化合物1d
[0108]
将化合物1c(4.4g,10.6mmol)溶于dmf(40ml)中，冰浴下加入nah(0.43g,12.7mmol)，升温到30℃反应1h。tlc显示反应结束后，倒入冰水淬灭，用乙酸乙酯萃取，盐水洗，用无水硫酸钠干燥有机相，旋干得到化合物1d(4g，黄色油状物，产率95％)。
[0109]
ms(esi):m/z 394[m+1]
+
。
[0110]
第三步：合成化合物1e
[0111]
将化合物1d(1g,2.5mmol)加入到ea(10ml)中，冰浴下滴加8％hcl-ea(10ml)，室温反应12h。tlc显示反应结束后，旋干反应液得到化合物1e(0.7g，黄色固体，产率94％)。
[0112]
ms(esi):m/z 294[m+1]
+
。
[0113]
第四步：合成化合物1f
[0114]
将化合物1e(700mg,2.4mmol)加入到dcm(8ml)中，然后加入tea(735mg,7.2mmol)和ac2o(290mg,2.9mmol)，反应液室温反应20mins。tlc显示反应结束后，将反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1:1(体积比))，得到化合物1f(750mg，淡黄色固体，产率93％)。
[0115]
ms(esi):m/z 336[m+1]
+
。
[0116]
第五步：合成化合物1g
[0117]
室温下，将化合物1f(750mg,2.2mmol)加入到甲醇(8ml)中，然后加入质量分数为10％的钯碳(100mg)。加完后，瓶口套上氢气球，置换三次气体后，保持氢气氛围室温反应12h。tlc显示反应结束后，过滤，固体用甲醇洗涤，收集滤液，减压蒸除溶剂，得到化合物1g(600mg，灰色固体，产率88％)。
[0118]
ms(esi):m/z 306[m+1]
+
。
[0119]
第六步：合成化合物1h
[0120]
室温下将化合物1g(500mg,1.6mmol)加入到含有乙腈(5ml)的闷罐中，然后加入质量分数为8％的hcl-ea(5ml)。然后加热到100度反应16h。tlc显示反应结束后，过滤，固体用ea洗涤，收集固体得到化合物1h(500mg，灰色固体，产率98％)。
[0121]
ms(esi):m/z 273[m+1]
+
。
[0122]
第七步：合成化合物1i
[0123]
室温下将化合物1h(550mg,2.2mmol)加入到dcm(6ml)中，然后加入tea(400mg,6.6mmol)和ac2o(150mg,2.6mmol)，反应液室温反应12h。tlc显示反应结束后，将反应液减压浓缩，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1:2(体积比))得到化合物1i(400mg，淡黄色固体，产率63％)。
[0124]
ms(esi):m/z 315[m+1]
+
。
[0125]
第八步：合成化合物1j
[0126]
室温下将化合物1i(100mg,0.3mmol)加入到dmf(2ml)中，然后加入int-1(120mg,0.34mmol)和dbu(150mg，0.9mmol)。然后加热到60度反应16h。tlc显示反应结束后，乙酸乙酯稀释反应液，水萃取，盐水洗，用无水硫酸钠干燥有机相，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝0:1(体积比))得到化合物1j(40mg，淡黄色固体，产率34％)。
[0127]
ms(esi):m/z 531[m+1]
+
。
[0128]
第九步：合成化合物1
[0129]
室温下将化合物1j(40mg,0.07mmol)加入到etoh(6ml)和水(1ml)中，然后加入铁粉(25mg,2.8mmol)和氯化铵(30mg，5.6mmol)。然后加热到80度反应2h。tlc显示反应结束后，乙酸乙酯稀释反应液，水萃取，盐水洗，用无水硫酸钠干燥有机相，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝0:1(体积比))，反相hplc制备(waters sunfire obd 100x30 mm,5μm，流动相a∶0.1％tfa in water，流动相b∶乙腈，梯度∶10％乙腈运行1min，52％-52％乙腈运行至10min，95％乙腈运行至14min，10％乙腈运行至16min结束)，得到化合物1(7mg，淡黄色固体，产率19％)。
[0130]
ms(esi):m/z 501[m+1]
+
。
[0131]1h-nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)7.96(d,j＝8hz,1h),6.85-6.84(m,1h),6.69(s,1h),5.55(d,j＝8hz,2h),4.46-4.42(m,2h)4.06-3.97(m,3h),3.19-3.03(m,2h),2.94-2.74(m,2h),2.68-2.61(m,1h),2.33(s,3h),2.09(d,j＝8hz,3h),1.54(d,j＝8hz,3h)。
[0132]
实施例2：化合物2的制备
[0133][0134]
化合物2的合成参考实施例1中化合物1的合成步骤，其中用(r)-1-boc-3-羟甲基哌嗪代替化合物1b，用(1r)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙胺代替化合物int-1，合成得到化合物2。
[0135]
ms(esi):m/z 501[m+1]
+
。
[0136]1h-nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)7.96(d,j＝8hz,1h),6.85-6.84(m,1h),6.69(s,1h),5.55(d,j＝8hz,2h),4.46-4.42(m,2h)4.06-3.97(m,3h),3.19-3.03(m,2h),2.94-2.74(m,2h),2.68-2.61(m,1h),2.33(s,3h),2.09(d,j＝8hz,3h),1.54(d,j＝8hz,3h)。
[0137]
实施例3：化合物3的制备
[0138][0139]
化合物3的合成参考实施例1中化合物1的合成步骤，其中用(s)-1-boc-3-羟甲基哌嗪代替化合物1b，用(1r)-1-[3-硝基-5-(三氟甲基)苯基]乙胺代替化合物int-1，合成得到化合物3。
[0140]
ms(esi):m/z 501[m+1]
+
。
[0141]1h-nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)7.96(d,j＝8hz,1h),6.85-6.84(m,1h),6.69(s,1h),5.55(d,j＝8hz,2h),4.46-4.42(m,2h)4.06-3.97(m,3h),3.19-3.03(m,2h),2.94-2.74(m,2h),2.68-2.61(m,1h),2.33(s,3h),2.09(d,j＝8hz,3h),1.54(d,j＝8hz,3h)。
[0142]
实施例4：化合物4的制备
[0143][0144]
化合物4的合成参考实施例1中化合物1的合成步骤，其中第一步用(r)-1-boc-3-羟甲基哌嗪代替化合物1b，第八步用(r)-2-(3-(1-氨基乙基)-2-氟苯基)-2,2-二氟乙烷-1-醇代替化合物int-1，合成得到化合物4。
[0145]
ms(esi):m/z 515[m+1]
+
。
[0146]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.15(s,1h),8.03(d,j＝6.7hz,1h),7.62(dd,j＝13.7,5.8hz,2h),7.40(t,j＝7.2hz,1h),7.23(dd,j＝20.2,12.5hz,1h),6.84(d,j＝3.1hz,1h),5.83-5.82(m,1h),5.78(brs,1h),4.50
–
4.46(m,2h),4.08
–
3.95(m,3h),3.36(s,1h),3.20(s,1h),3.12
–
3.00(m,1h),2.89
–
2.85(m,2h),2.75
–
2.62(m,1h),2.27(d,j＝1.8hz,3h),2.09(d,j＝11.4hz,3h),1.59(d,j＝6.9hz,3h).
[0147]
实施例5：化合物5的制备
[0148][0149]
化合物5的合成参考实施例1中化合物1的合成步骤，其中第一步用(r)-1-boc-3-羟甲基哌嗪代替化合物1b，八步用(r)-1-(3-(1-氨基乙基)-2-氟苯基)-1,1-二氟-2-甲基丙烷-2-醇代替化合物int-1，合成得到化合物5。
[0150]
ms(esi):m/z 544[m+1]
+
。
[0151]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.10(d,j＝34.7hz,1h),7.77
–
7.73(m,1h),7.37-7.33(m,1h),7.26-7.04(m,1h),7.05(d,j＝8.0hz,1h),5.97-5.91(m,1h),5.35(s,1h),4.56
–
4.52(m,2h),4.22(dd,j＝28.7,12.1hz,1h),4.14
–
3.95(m,2h),3.62
–
3.58(m,1h),3.20
–
3.04(m,2h),3.01
–
2.64(m,2h),2.45(d,j＝7.5hz,3h),2.08(s,3h),1.68(dd,j＝6.7,4.0hz,3h),1.23
–
1.19(m,6h)
[0152]
实施例6：化合物6的制备
[0153][0154]
化合物6的合成参考实施例1中化合物1的合成步骤，其中第一步用(r)-1-boc-3-羟甲基哌嗪代替化合物1b，第八步用(r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺代替化合物int-1，合成得到化合物6。
[0155]
ms(esi):m/z 486[m+1]
+
。
[0156]
1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.03(d,j＝4.0hz,1h),7.70
–
7.59(m,2h),7.49(t,j＝6.9hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝56.0hz,1h),6.84(d,j＝3.2hz,1h),5.83-5.78(m,1h),4.62
–
4.37(m,2h),4.06
–
3.98(m,3h),3.23
–
3.02(m,1h),2.95
–
2.85(m,1h),2.68(dd,j＝10.0,2.3hz,1h),2.50
–
2.35(m,1h),2.26(d,j＝1.4hz,3h),2.10(d,j＝11.3hz,3h),1.60(d,j＝6.8hz,3h).
[0157]
实施例7：化合物7的制备
[0158][0159]
化合物7的合成参考实施例1中化合物1的合成步骤，其中第一步用(s)-1-boc-3-羟甲基哌嗪代替化合物1b，第八步用(r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺代替化合物int-1，合成得到化合物7。
[0160]
ms(esi):m/z 486[m+1]
+
。
[0161]1h nmr(300mhz,dmso)δ(ppm)8.00(d,j＝7.4hz,1h),7.65
–
7.61(m,2h),7.48(t,j＝6.9hz,1h),7.27(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.0hz,1h),6.84(d,j＝2.0hz,1h),5.83-5.79(m,1h),4.59
–
4.43(m,2h),4.09
–
3.96(m,3h),3.31-3.20(m,1h),2.90
–
2.86(m,1h),2.71-2.67(m 1h),2.48
–
2.35(m,1h),2.26(s,3h),2.10(d,j＝8.5hz,3h),1.60(d,j＝7.1hz,3h).
[0162]
实施例8：化合物8的制备
[0163][0164]
化合物8的合成参考实施例1中化合物1的合成步骤，其中第一步用(r)-1-boc-3-羟甲基哌嗪代替化合物1b，第四步用环丙基甲酰氯代替乙酰氯，第八步用((r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺代替化合物int-1，合成得到化合物8。
[0165]
ms(esi):m/z 512[m+1]
+
。
[0166]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.03(d,j＝8.0hz,1h),7.66-7.63(m,2h),7.49(t,j＝6.8hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝56.0hz,1h),6.84(s,1h),5.84
–
5.76(m,1h),4.58
–
4.40(m,3h),4.05(s,2h),3.06
–
2.72(m,4h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝7.0hz,3h),1.54
–
1.42(m,1h),0.78
–
0.76(m,4h).
[0167]
实施例9：化合物9的制备
[0168][0169]
化合物9的合成参考实施例1中化合物1的合成步骤，其中第一步用(r)-1-boc-3-羟甲基哌嗪代替化合物1b，第四步用对甲苯磺酰氯代替乙酰氯，第八步用(r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺代替化合物int-1，合成得到化合物9。
[0170]
ms(esi):m/z 598[m+1]
+
。
[0171]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.38(s,1h),7.70
–
7.66(m,4h),7.52
–
7.47(m,3h),7.30(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝52.0hz,1h),6.84(s,1h),5.83
–
5.75(m,1h),4.42(dd,j＝10.9,2.7hz,1h),4.15(d,j＝12.4hz,1h),4.01
–
3.98(m,1h),3.88
–
3.72(m,2h),2.98-2.92(m,2h),2.44(d,j＝2.6hz,1h),2.41(s,3h),2.35
–
2.31(m,1h),2.28(s,3h),1.60(d,j＝7.0hz,3h).
[0172]
实施例10：化合物10的制备
[0173][0174]
合成路线：
[0175][0176]
制备方法：
[0177]
第一步：合成化合物10a
[0178]
将化合物10a(1.0g，3.2mmol,合成参考实施例1中中间体1i的合成，用(r)-1-boc-3-羟甲基哌嗪代替1b(1-boc-3-羟甲基哌嗪)合成得到10a)溶于dce(10ml)中，向反应液中加入三苯基膦(1.68g，6.4mmol)和四氯化碳(1.48g，9.6mmol)，然后氮气保护下，把反应加热到70℃搅拌反应2h。tlc显示反应结束后，把反应液冷却到室温后，加入到饱和碳酸氢钠溶液中(100ml),然后用二氯甲烷萃取(25ml
×
3)，合并有机相，并用无水硫酸钠干燥，然后旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/异丙醇＝10:1)，得到化合物10a(0.5g，黄色油状物，产率47.2％)。
[0179]
ms(esi):m/z 333[m+1]
+
。
[0180]
第二步：合成化合物10c
[0181]
将化合物10a(0.5g，1.5mmol)溶于dmf(125ml)中，再加入int-2(401mg，1.71mmol)，然后加diea(580mg，5.155mmol)，然后将反应液加热到80℃下回流过夜，tlc显示反应结束后，把反应液中加到饱和nacl溶液(50ml)中,然后用乙酸乙酯萃取(25ml
×
3)，合并有机相，并用无水硫酸钠干燥，旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/甲醇＝10/1)，得到化合物10c(0.5g，类白色固体，62.5％)。
[0182]
ms(esi):m/z 531[m+1]
+
。
[0183]
第三步：合成化合物10d
[0184]
将化合物10c(0.5g，0.94mmol)溶于乙醇(5ml)中，再加浓盐酸(1ml)，加完后，将反应液加热至80℃搅拌反应16h。tlc显示反应结束后，将反应液旋干后，得到化合物10d(0.5g类白色固体，产率100.0％)。
[0185]
ms(esi):m/z 489[m+1]
+
。
[0186]
第四步：合成化合物10f
[0187]
将化合物10d(200mg，0.41mmol)溶于dce(2ml)中，再加10e(118mg，1.64mmol)，再滴3滴acoh，然后将反应液放到室温搅拌1h，然后再加nabh3cn(38.7mg，0.614mmol)然后再将反应液放到室温下搅拌1h。tlc显示反应结束后，加氨水调ph值到8-9，然后旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/甲醇＝10：1)，得到化合物10f(130mg，产率58.41％)。
[0188]
ms(esi):m/z 545[m+1]
+
。
[0189]
第五步：合成化合物10
[0190]
将化合物10f(130mg，0.24mmol)溶于乙醇/水(2ml/0.5ml)中，再加氯化铵(103.2mg，1.91mmol)，然后加铁粉(53.5mg，0.995mmol)，然后将反应液加热到80℃下回流1h，tlc显示反应结束后，将反应液过滤，滤液旋干，反相hplc制备(waters sunfire obd100x30 mm,5μm，流动相a∶0.1％tfa in water，流动相b∶乙腈，梯度∶10％乙腈运行1min，52％-52％乙腈运行至10min，95％乙腈运行至14min，10％乙腈运行至16min结束)，得到化合物10(80mg，淡黄色固体，产率65.0％)。
[0191]
ms(esi):m/z 515[m+1]
+
。
[0192]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)7.90(d,j＝7.9hz,1h),7.55(s,1h),6.86(d,j＝9.5hz,2h),6.82(s,1h),6.70(s,1h),5.61
–
5.55(m,1h),5.54(s,2h),4.64
–
4.44(m,4h),4.34(dd,j＝10.7,2.7hz,1h),4.01-3.96(m,2h),3.54
–
3.42(m,1h),3.18(t,j＝9.8hz,1h),3.01
–
2.71(m,3h),2.31(s,3h),2.17
–
2.01(m,1h),1.67(t,j＝10.6hz,1h),1.53(d,j＝7.0hz,3h).
[0193]
实施例11：化合物11的制备
[0194][0195]
化合物11的合成参考实施例10中化合物10的合成步骤，其中第四步用多聚甲醛代替10e，合成得到化合物11。
[0196]
ms(esi):m/z 473[m+1]
+
。
[0197]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)7.90(d,j＝7.8hz,1h),7.54(s,1h),6.89
–
6.79(m,3h),6.69(s,1h),5.59-5.54(m,3h),4.33(dd,j＝10.7,2.8hz,1h),4.01-3.93(m,2h),3.16(dd,j＝13.3,6.4hz,1h),2.98(d,j＝11.2hz,1h),2.84
–
2.77(m,2h),2.35
–
2.28(m,3h),2.24(d,j＝8.8hz,3h),2.16
–
2.14(m,1h),1.71(t,j＝10.7hz,1h),1.52(d,j＝12.0hz,3h).
[0198]
实施例12：化合物12的制备
[0199][0200]
化合物12的合成参考实施例10中化合物10的合成步骤，其中第四步用四氢吡喃酮代替10e，合成得到化合物12。
[0201]
ms(esi):m/z 543[m+1]
+
。
[0202]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)7.92(d,j＝7.3hz,1h),7.54(s,1h),6.92
–
6.77(m,3h),6.69(s,1h),5.59-5.54(m,3h),4.35(dd,j＝10.6,2.7hz,1h),4.04
–
3.95(m,2h),3.91(dd,j＝11.0,2.9hz,2h),3.33-3.25(m,2h),3.15
–
3.04(m,2h),3.01(d,j＝10.4hz,1h),2.78
–
2.66(m,1h),2.46(d,j＝11.3hz,1h),2.37-2.34(m,1h),2.31(s,3h),1.91(t,j＝10.6hz,1h),1.76-1.72(m 2h),1.51(dd,j＝18.0,5.4hz,3h),1.49
–
1.37(m,2h).
[0203]
实施例13：化合物13的制备
[0204][0205]
合成路线：
[0206][0207]
制备方法：
[0208]
将化合物13a(181mg，0.41mmol,合成参考实施例10中中间体10d的合成，用(r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺代替int-2合成得到13a)溶于dce(2ml)中，再加入质量分数为30％到35％甲醛水溶液(150mg，1.64mmol)，再滴3滴acoh，然后将反应液放到室温搅拌1h，然后再加nabh3cn(38.7mg，0.614mmol)然后再将反应液放到室温下搅拌1h。tlc显示反应结束后，加氨水调ph＝8-9，然后浓缩旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸
乙酯/甲醇＝10：1)，得到化合物13(130mg，产率58.41％)。
[0209]
ms(esi):m/z 458[m+1]
+
。
[0210]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)7.97(d,j＝7.2hz,1h),7.65(t,j＝7.2hz,1h),7.58(s,1h),7.48(t,j＝6.8hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝56.0hz,1h),6.81(s,1h),5.79(m,1h),4.33(dd,j＝10.7,2.7hz,1h),4.01-3.96(m,2h),3.17(t,j＝9.9hz,1h),2.99(d,j＝10.8hz,1h),2.90
–
2.71(m,2h),2.26(d,j＝3.9hz,6h),2.22
–
2.13(m,1h),1.72(t,j＝10.7hz,1h),1.59(d,j＝7.1hz,3h).
[0211]
实施例14：化合物14的制备
[0212][0213]
化合物14的合成参考实施例13中化合物13的合成步骤，其中用3-氧杂环丁酮代替甲醛，合成得到化合物14。
[0214]
ms(esi):m/z 500[m+1]
+
。
[0215]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)7.98(d,j＝7.2hz,1h),7.65(t,j＝7.7hz,1h),7.59(s,1h),7.49(t,j＝7.0hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝56.0hz,1h),6.82(s,1h),5.86
–
5.73(m,1h),4.60(dd,j＝15.8,6.5hz,2h),4.55
–
4.47(m,2h),4.34(d,j＝8.1hz,1h),4.00(dd,j＝18.7,9.1hz,2h),3.55
–
3.44(m,1h),3.25
–
3.13(m,1h),2.96(d,j＝10.1hz,1h),2.87-2.83(m,2h),2.25(s,3h),2.17
–
2.08(m,1h),1.69(t,j＝10.8hz,1h),1.59(d,j＝7.0hz,3h).
[0216]
实施例15：化合物15的制备
[0217][0218]
化合物15的合成参考实施例13中化合物13的合成步骤，其中用四氢吡喃酮代替甲醛，合成得到化合物15。
[0219]
ms(esi):m/z 528[m+1]
+
。
[0220]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)7.97(d,j＝7.3hz,1h),7.65(t,j＝7.3hz,1h),7.57(s,1h),7.48(t,j＝6.5hz,1h),7.28(t,j＝7.6hz,1h),7.23(t,j＝56.0hz,1h),6.81
(s,1h),5.87
–
5.73(m,1h),4.35(dd,j＝10.6,2.5hz,1h),4.12
–
3.86(m,5h),3.14(dd,j＝20.8,7.8hz,4h),3.01(d,j＝10.8hz,1h),2.75(t,j＝10.3hz,1h),2.39(t,j＝9.9hz,1h),2.25(s,3h),1.92(t,j＝10.7hz,1h),1.75(d,j＝11.5hz,2h),1.59(d,j＝7.0hz,3h),1.45(s,2h).
[0221]
实施例16：化合物16的制备
[0222][0223]
化合物16的合成参考实施例13中化合物13的合成步骤，其中(s)-1-boc-3-羟甲基哌嗪代替中间体13a合成中要用到的(r)-1-boc-3-羟甲基哌嗪，合成得到化合物16。
[0224]
ms(esi):m/z 458[m+1]
+
。
[0225]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)7.98(d,j＝7.4hz,1h),7.63(t,j＝7.4hz,1h),7.58(s,1h),7.48(t,j＝7.0hz,1h),7.27(t,j＝7.6hz,1h),7.23(t,j＝54.0hz,1h),6.81(s,1h),5.87
–
5.71(m,1h),4.34(dd,j＝10.7,2.5hz,1h),3.99-3.94(m,2h),3.17(t,j＝9.7hz,1h),3.00(d,j＝11.0hz,1h),2.86(d,j＝10.3hz,1h),2.78(t,j＝10.3hz,1h),2.26(s,3h),2.25(s,3h),2.18(t,j＝10.2hz,1h),1.71(t,j＝10.8hz,1h),1.60(d,j＝7.0hz,3h).
[0226]
实施例17：化合物17的制备
[0227][0228]
化合物17的合成参考实施例13中化合物13的合成步骤，其中用丙酮代替甲醛，合成得到化合物17。
[0229]
ms(esi):m/z 486[m+1]
+
。
[0230]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)7.99(d,j＝7.3hz,1h),7.65(t,j＝7.5hz,1h),7.57(s,1h),7.49(t,j＝6.8hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝52.0hz,1h),6.81(s,1h),5.87-5.71(m,1h),4.35(dd,j＝10.6,2.7hz,1h),4.04-3.91(m,2h),3.090(t,j＝9.8hz,1h),3.00(d,j＝10.7hz,1h),2.90(d,j＝10.5hz,1h),2.80-2.69(m,2h),2.41-2.40(m,1h),2.25(s,3h),1.92(t,j＝10.6hz,1h),1.59(d,j＝7.1hz,3h),1.03(t,j＝6.5hz,
6h).
[0231]
实施例18：化合物18的制备
[0232][0233]
合成路线：
[0234][0235]
制备方法：
[0236]
将化合物13a(181mg，0.41mmol)溶于乙腈(2ml)中，室温下再加入碳酸钾(113mg，0.82mmol)，再加入化合物18a(108mg，0.82mmol)，然后将反应液升温到60℃搅拌2h。tlc显示反应结束后，将反应液冷却到室温，然后旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/甲醇＝10：1)，得到化合物18(116mg，产率52.4％)。
[0237]
ms(esi):m/z 540[m+1]
+
。
[0238]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)8.54(s,2h),8.04(d,j＝7.2hz,1h),7.69-7.63(m,2h),7.49(t,j＝6.9hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝52.0hz,1h),6.85(s,1h),5.83-5.76(m,1h),4.70(dd,j＝36.1,12.3hz,2h),4.51(dd,j＝10.8,2.7hz,1h),4.21-4.01(m,2h),3.26-3.18(m,2h),2.90-2.85(m,1h),2.80-2.70(m,1h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝7.1hz,3h).
[0239]
实施例19：化合物19的制备
[0240][0241]
化合物19的合成参考实施例18中化合物18的合成步骤，其中2-溴乙基甲基醚代替
18a，合成得到化合物19。
[0242]
ms(esi):m/z 502[m+1]
+
。
[0243]1h-nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)7.99(d,j＝4.0hz,1h),7.65(dd,j＝14.4,7.1hz,1h),7.58(s,1h),7.49(t,j＝6.9hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝52.0hz,1h),6.82(s,1h),5.81-5.78(m,1h),4.35(dd,j＝10.7,2.7hz,1h),4.01-3.96(m,2h),3.51-3.49(m,2h),3.3(s,3h),3.13
–
3.09(m,2h),2.97(d,j＝6.0hz,1h),2.80-2.76(m,1h),2.59-2.49(m,2h),2.29-2.25(m,1h),2.24(s,3h),1.82(t,j＝6.0hz,1h),1.59(d,j＝7.1hz,3h).
[0244]
实施例20：化合物20的制备
[0245][0246]
制备方法：
[0247]
第一步：合成化合物20b
[0248]
将化合物20a(500mg,4.23mmol)溶于dcm(5ml)溶液中，然后加入吡啶(762mg,8.46mmol)和dmap(52mg,0.423mmol)，再加入对甲苯磺酰氯(1.2g,6.34mmol)，加完后，室温搅拌2小时，tlc显示反应结束后，将反应液加入到饱和碳酸氢钠水溶液中(50ml)，分出有机层，水相再用dcm萃取(25ml
×
3)，合并有机相，无水硫酸钠干燥,旋干溶剂，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝5:1(体积比))，得到化合物20b(1.1g，淡黄色固体，产率93.2％)。
[0249]
第二步：合成化合物20
[0250]
将化合物13a(181mg，0.41mmol)溶于乙腈(2ml)中，室温下再加入碳酸钾(113mg，0.82mmol)，再加入化合物20b(155mg，0.82mmol)，然后将反应液升温到60℃搅拌2h。tlc显示反应结束后，将反应液冷却到室温，然后旋干，残余物pre-tlc纯化(展开剂：乙酸乙酯/甲醇＝10：1)，得到化合物20(106mg)。
[0251]
ms(esi):m/z 544[m+1]
+
。
[0252]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)8.26(d,j＝19.0hz,1h),7.68(t,j＝7.4hz,1h),
7.64(s,1h),7.50(t,j＝6.9hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.0hz,1h),6.84(s,1h),5.86-5.78(m,1h),5.75(s,1h),4.37-4.32(m,1h),3.99-3.96(m,2h),3.81-3.69(m,4h),3.67-3.55(m,4h),3.27-2.91(m,4h),2.44-2.32(m,2h),2.29(s,3h),1.61(d,j＝7.0hz,3h).
[0253]
实施例21：化合物21的制备
[0254][0255]
化合物21的合成参考实施例20中化合物20的合成步骤，其中第一步用三氟甲基乙醇代替20a，合成得到化合物21。
[0256]
ms(esi):m/z 526[m+1]
+
。
[0257]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)8.00(d,j＝7.2hz,1h),7.65-7.49(m,1h),7.60(s,1h),7.49(t,j＝6.9hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝52.0hz,1h),6.82(s,1h),5.83-5.76(m,j＝7.0hz,1h),4.35(dd,j＝10.7,2.7hz,1h),3.98(dd,j＝12.5,7.0hz,2h),3.31-3.10(m,5h),3.02(d,j＝10.6hz,1h),2.84(dd,j＝12.0,9.2hz,1h),2.67(t,j＝10.5hz,1h),2.26-2.20(m,3h),1.59(d,j＝7.1hz,3h).
[0258]
实施例22：化合物22的制备
[0259][0260]
化合物22的合成参考实施例20中化合物20的合成步骤，其中第一步用氧杂环丁烷-3-甲醇代替20a，合成得到化合物22。
[0261]
ms(esi):m/z 514[m+1]
+
。
[0262]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)8.03(d,j＝7.3hz,1h),7.66(t,j＝7.2hz,1h),7.60(s,1h),7.48(t,j＝6.8hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝52.0hz,1h),6.81(s,1h),5.84-5.76(m,1h),4.69-4.65(m,2h),4.37-4.26(m,3h),4.05-3.96(m,2h),3.26-3.25(m,1h),3.18-3.06(m,1h),2.97(d,j＝10.9hz,1h),2.84(d,j＝10.2hz,1h),2.79-2.64(m,3h),2.25(s,3h),2.21(d,j＝11.6hz,1h),1.75(t,j＝10.6hz,1h),1.59(d,j＝7.1hz,3h).
[0263]
实施例23：化合物23的制备
[0264][0265]
化合物23的合成参考实施例20中化合物20的合成步骤，其中第一步3-四氢呋喃甲醇代替20a，合成得到化合物23。
[0266]
ms(esi):m/z 528[m+1]
+
。
[0267]1h-nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)8.10(d,j＝5.3hz,1h),7.66(t,j＝7.2hz,1h),7.60(s,1h),7.49(t,j＝6.9hz,1h),7.28(dd,j＝16.5,8.9hz,1h),7.23(t,j＝52.0hz,1h),6.82(s,1h),5.85-5.77(m,1h),4.35(dd,j＝10.6,2.7hz,1h),4.05-3.95(m,2h),3.81-3.69(m,2h),3.63(dd,j＝15.4,7.5hz,1h),3.43-3.40(m,2h),3.13(d,j＝10.3hz,1h),3.09-2.92(m,2h),2.83-2.74(m,1h),2.37-2.32(m,2h),2.26(s,3h),2.23-2.18(m,1h),2.03-1.90(m,1h),1.77
–
1.70(m,1h),1.60(d,j＝7.1hz,3h),1.56-1.52(m,1h).
[0268]
实施例24：化合物24的制备
[0269][0270]
化合物24的合成参考实施例20中化合物20的合成步骤，其中第二步溴乙腈代替20b，合成得到化合物24。
[0271]
ms(esi):m/z 483[m+1]
+
。
[0272]1h nmr(400mhz,cdcl3):δ(ppm)7.51-7.46(m,2h),7.26(s,1h),7.18(t,j＝7.7hz,1h),7.10(s,1h),6.92(t,j＝56.0hz,1h),6.85(s,1h),5.85-5.66(m,1h),4.29(dd,j＝10.7,2.7hz,1h),4.12(t,j＝9.9hz,1h),3.89(d,j＝10.0hz,1h),3.63(s,2h),3.32(dd,j＝13.3,6.4hz,1h),3.00-2.97(m,2h),2.83-2.65(m,2h),2.49(s,3h),2.28(t,j＝10.6hz,1h),1.71(d,j＝6.7hz,3h).
[0273]
实施例25：化合物25的制备
[0274][0275]
合成路线：
[0276][0277]
制备方法：
[0278]
第一步：合成化合物25c
[0279]
将化合物25a(12.5g，57.57mmol)溶于dmf(125ml)中，再加入25b(7.42g，63.33mmol)，然后滴加diea(23.4g，181.4mmol)，加完后将反应液加热到80℃搅拌16h。tlc显示反应结束后，把反应液倒入乙酸乙酯(200ml)和饱和nacl溶液(500ml)中，分出有机层,水相再用乙酸乙酯萃取(150ml
×
3)，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，然后旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到化合物25c(15.6g，黄色液体，产率86.22％)。
[0280]
ms(esi):m/z 315.09[m+1]
+
。
[0281]
第二步：合成化合物25d
[0282]
将化合物25c(15.6g，49.64mmol)溶于dmf(125ml)中，在0℃下分批加入nah(2g，49.64mmol)，然后升温到30℃搅拌2h。tlc显示反应结束后，把反应液中加到饱和nacl溶液(500ml)中，用乙酸乙酯萃取(150ml
×
3)，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，然后旋干，得到化合物25d(14.1g,黄色油状，产率96.53％)。无需继续纯化，直接用于下一步。
[0283]
ms(esi):m/z 295[m+1]
+
。
[0284]
第三步：合成化合物25e
[0285]
将化合物25d(14.1g，47.92mmol)溶于甲醇(140ml)中，再加质量分数为10％的pb/
c(1.4g，0.1eq)，加完后，瓶口套上氢气球，置换三次气体后，保持氢气氛围室温反应5h。tlc显示反应结束后，将反应液过滤，滤液旋干后，得到化合物25e(12g，灰色固体，产率94.76％)。无需继续纯化，直接用于下一步。
[0286]
ms(esi):m/z 265[m+1]
+
。
[0287]
第四步：合成化合物25f
[0288]
将化合物25e(5g，18.92mmol)溶于乙腈(5ml)中，再加4％hcl-mecn(50ml)，然后把反应液放到110℃下反应过夜。tlc显示反应结束后，将反应液冷却到室温，析出大量固体，过滤固体，并用冰的乙腈洗涤多次，然后干燥，得到化合物25f(3.6g，白色固体，产率69.63％)。
[0289]
ms(esi):m/z 274[m+1]
+
。
[0290]
第五步：合成化合物25g
[0291]
将化合物25f(2g，7.32mmol)溶于pocl3(23ml)中，再加dmf(3滴)，然后将反应加热到100℃下反应。tlc显示反应结束后，将反应液旋干，然后用饱和碳酸氢钠水溶液在调成弱碱性(ph＝8-9)，再加水稀释(100ml)，所得到的水相用用乙酸乙酯萃取(150ml
×
3)，合并有机相，用无水硫酸钠干燥，然后旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/异丙醇＝10:1)，得到化合物25g(1.6g，淡黄色粉末，74.94％)。
[0292]
ms(esi):m/z 292[m+1]
+
。
[0293]
第六步：合成化合物25i
[0294]
将化合物25g(500mg，1.71mmol)溶于dmf(5ml)中，再加25h(401mg，1.71mmol)，然后加diea(665mg，5.16mmol)，然后将反应液加热到80℃下反应16h，tlc显示反应结束后，将反应液旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝3:1)，得到化合物25i(200mg，淡黄色油状，23.84％)
[0295]
ms(esi):m/z 490[m+1]
+
。
[0296]
第七步：合成化合物25
[0297]
将化合物25i(200mg，408.62mmol)溶于乙醇/水(1.6ml/0.4ml)中，再加氯化铵(176.7mg，3.11mmol)，然后加入铁粉(91.6mg，1.636mmol)，将反应液加热到80℃下回流1h，tlc显示反应结束后，将反应液过滤，滤液旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1:1)，得到化合物25(325mg，淡黄色固体)。
[0298]
ms(esi):m/z 460[m+1]
+
。
[0299]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)7.95(d,j＝7.8hz,1h),7.55(s,1h),6.87-6.84(m,3h),6.70(s,1h),5.61
–
5.55(m,1h),5.54(s,2h),4.32(dd,j＝10.7,2.0hz,1h),4.08(dd,j＝11.3,2.9hz,1h),3.96
–
3.90(m,2h),3.83(d,j＝11.6hz,1h),3.68
–
3.35(m,1h),3.24
–
3.17(m,2h),2.85
–
2.82(m,1h),2.32(s,3h),1.54(d,j＝7.1hz,3h).
[0300]
实施例26：化合物26的制备
[0301][0302]
化合物26的合成参考实施例25中化合物25的合成步骤，其中第六步用(r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺代替25h，合成得到化合物26。
[0303]
ms(esi):m/z 445[m+1]
+
。
[0304]1h-nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)7.99(d,j＝7.2hz,1h),7.65(t,j＝7.3hz,1h),7.59(s,1h),7.49(t,j＝6.9hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.24(t,j＝72hz,1h)6.84(s,1h),5.80(m,1h),4.33(dd,j＝10.8,2.0hz,1h),4.17
–
4.05(m,1h),4.02
–
3.79(m,3h),3.70(dd,j＝11.8,9.3hz,1h),3.26
–
3.18(m,2h),2.86(n,1h),2.27(s,3h),1.60(d,j＝7.1hz,3h).
[0305]
实施例27：化合物27的制备
[0306][0307]
合成路线：
[0308]
[0309]
制备方法：
[0310]
第一步：合成化合物27a
[0311]
向化合物10a(4.42g，14.1mmol)中加入1，2-二氯乙烷(50ml)中，再加四氯化碳(1.73g，11.3mmol)，然后加入三苯基膦(1.48g，5.64mmol，4.0eq)，加完后，用氮气置换三次气体，然后氮气保护下将反应液加热到80℃下搅拌2h。tlc显示反应结束后，旋干，得到粗品化合物27a(5.2g，深棕色油状)，无需进一步纯化，直接用于下一步。
[0312]
ms(esi):m/z 333.3[m+1]
+
。
[0313]
第二步：合成化合物27b
[0314]
向上一步得到的粗品化合物27a(5.2g)中加入nmp(50ml)，再加(r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺(2.84g，15.0mmol，1.0eq)和diea(3.8g，30.0mmol)，加完后，将反应液加热到100℃下搅拌3h。tlc显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(100ml)和饱和食盐水(100ml)，分出有机层，水相用乙酸乙酯(100ml
×
2)萃取两次，合并有机相，干燥，旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为二氯甲烷：甲醇＝20：1(体积比))，得到化合物27b(5.5g，淡黄色固体，两步产率80.2％)。
[0315]
ms(esi):m/z 486.2[m+1]
+
。
[0316]
第三步：合成化合物27c
[0317]
将化合物27b(5.0g,10.3mmol)加入到乙醇(50ml)中，再加入浓盐酸(10ml)，然后升温到90℃，反应12小时，tlc显示反应结束，旋干得到化合物27c的盐酸盐粗品(5.7g,白色固体)，无需进一步纯化，直接用于下一步。
[0318]
第四步：合成化合物27
[0319]
将化合物27c的粗品盐酸盐(0.57g)和化合物3-氧杂环丁烷羧酸(175mg，1.72mmol)加入到dmf(5.5ml)中，将反应液冷却到0℃，向反应液中逐滴滴加t3p(712mg，2.24mmol)，再逐滴滴加三乙胺(0.52g，5.16mmol)，滴加完毕，将反应液升温至25℃下反应1h。tlc显示反应结束后，再向反应液中加入乙酸乙酯(20ml)和饱和食盐水(20ml)，分出有机层，水相用乙酸乙酯(20ml
×
2)萃取两次，合并有机相，干燥，旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20：1(体积比))，柱层析纯化的产物再用hplc制备纯化(waters sunfire obd 100x30 mm,5μm，流动相a∶0.1％tfa in water，流动相b∶乙腈，梯度∶10％乙腈运行1min，52％-52％乙腈运行至10min，95％乙腈运行至14min，10％乙腈运行至16min结束)，得到化合物27(0.34g，灰白色固体，两步产率63.2％)。
[0320]
ms(esi):m/z 528.2[m+1]
+
。
[0321]1h nmr(300mhz,dmso):δ(ppm)8.05-7.97(m,1h),7.68-7.59(m,2h),7.49(t,j＝7.2hz,1h),7.29(t,j＝7.6hz,1h),7.24(d,j＝54.0hz,1h),6.84(s,1h),5.85-5.74(m,1h),4.80-4.69(m,3h),4.68-4.36(m,3h),4.30-4.15(m,1h),4.13-3.95(m,2h),3.64-3.50(m,1h),3.28-3.04(m,2h),2.94-2.83(m,1h),2.79-2.66(m,1h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝7.2hz,3h).
[0322]
实施例28：化合物28的制备
[0323][0324]
化合物28的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用(r)-四氢-3-呋喃甲酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物28。
[0325]
ms(esi):m/z 542.2[m+1]
+
。
[0326]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)9.62(s,1h),7.83(s,1h),7.71(t,j＝7.3hz,1h),7.57(t,j＝7.1hz,1h),7.37(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.3hz,1h),6.97(s,1h),5.98-5.87(m,1h),4.66-4.45(m,2h),4.26-4.07(m,2h),4.01(d,j＝12.1hz,1h),3.96-3.87(m,1h),3.80-3.61(m,3h),3.55-3.38(m,2h),3.25-3.12(m,1h),2.99-2.79(m,2h),2.52(s,3h),2.13-1.92(m,2h),1.69(d,j＝6.8hz,3h).
[0327]
实施例29：化合物29的制备
[0328][0329]
化合物29的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用(s)-四氢-3-呋喃甲酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物29。
[0330]
ms(esi):542.2[m+1]
+
。
[0331]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)9.69-9.57(m,1h),7.83(s,1h),7.72(t,j＝7.3hz,1h),7.57(t,j＝6.9hz,1h),7.37(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.2hz,1h),6.97(s,1h),5.97-5.89(m,1h),4.64-4.53(m,2h),4.26-4.08(m,2h),4.01(d,j＝11.9hz,1h),3.96-3.88(m,1h),3.78-3.68(m,3h),3.56-3.38(m,2h),3.27-3.18(m,1h),3.01-2.76(m,2h),2.52(s,3h),2.15-1.91(m,3h),1.69(d,j＝6.8hz,3h).
[0332]
实施例30：化合物30的制备
[0333][0334]
合成路线：
[0335][0336]
制备方法：
[0337]
第一步：合成化合物30
[0338]
将化合物27c的粗品盐酸盐(0.57g,1.03mmol)和加入到dmf(5.5ml)中，将反应液冷却到0℃，再逐滴滴加三乙胺(0.52g，5.16mmol)，再然后逐滴滴加氯甲酸甲酯(162mg,1.72mmol),将反应液升温至25℃下反应1h。tlc显示反应结束后，再向反应液中加入乙酸乙酯(20ml)和饱和食盐水(20ml)，分出有机层，水相用乙酸乙酯(20ml
×
2)萃取两次，合并有机相，干燥，旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20：1(体积比))，柱层析纯化的产物再用hplc制备纯化(waters sunfire obd 100x30 mm,5μm，流动相a∶0.1％tfa in water，流动相b∶乙腈，梯度∶10％乙腈运行1min，52％-52％乙腈运行至10min，95％乙腈运行至14min，10％乙腈运行至16min结束)，得到化合物30(142mg，灰白色固体，产率28.2％)。
[0339]
ms(esi):m/z 502.2[m+1]
+
。
[0340]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)8.05(d,j＝7.2hz,1h),7.71-7.62(m,2h),7.49(t,j＝6.8hz,1h),7.28(t,j＝7.6hz,1h),7.23(d,j＝54.0hz,1h),6.84(s,1h),5.80(q,j＝7.2hz,1h),4.44(dd,j＝10.8,2.4hz,1h),4.14(d,j＝12.8hz,1h),4.07(d,j＝12.0hz,2h),4.03-3.95(m,1h),3.66(s,3h),3.20-3.11(m,2h),2.84-2.65(m,2h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝7.2hz,3h).
[0341]
实施例31：化合物31的制备
[0342][0343]
合成路线：
[0344][0345]
制备方法：
[0346]
第一步：合成化合物31
[0347]
将化合物27c的粗品盐酸盐(0.29g，0.5mmol)加入到dcm(2ml)中，然后向反应液中加入三乙胺(100mg，1.0mmol)，将反应液冷却到0℃，分批加入三光气(296mg，1.0mmol)，加完后，0℃反应30min。tlc显示反应结束后，再加入二甲胺盐酸盐(81.5mg，1.0mmol)，并补加三乙胺(100mg，1.0mmol)，加完后，将反应液升温到室温搅拌反应1h。tlc显示反应结束后，向反应液中加入水(50ml)，分出有机层，水相用乙酸乙酯(5ml
×
2)萃取两次，合并有机相，干燥，旋干，残余物用hplc制备纯化(waters sunfire obd 100x30 mm,5μm，流动相a∶0.1％tfa in water，流动相b∶乙腈，梯度∶10％乙腈运行1min，52％-52％乙腈运行至10min，95％乙腈运行至14min，10％乙腈运行至16min结束)，得到化合物31(108mg,白色固体，产率42.0％)。
[0348]
ms(esi):m/z 515.2[m+1]
+
。
[0349]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)9.97(s,1h),8.10(s,1h),7.87(t,j＝7.3hz,1h),7.54(t,j＝6.9hz,1h),7.34(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.3hz,1h),7.07(s,1h),6.01-5.91(m,1h),4.53(dd,j＝10.9,2.8hz,1h),4.16(d,j＝11.8hz,1h),4.09(t,j＝10.0hz,1h),3.70(d,j＝12.1hz,2h),3.63(d,j＝12.3hz,1h),3.26(dd,j＝13.1,6.7hz,1h),3.04-2.95(m,2h),2.93-2.84(m,4h),2.82(s,6h),2.61-2.54(m,1h),2.49(s,3h),1.71(d,j＝7.1hz,3h).
[0350]
实施例32：化合物32的制备
[0351][0352]
化合物32的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用1-甲基-3-氮杂丁烷羧酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物32。
[0353]
ms(esi):541.2[m+1]
+
。
[0354]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)8.19(s,1h),8.02(d,j＝7.0hz,1h),7.68-7.61(m,1h),7.50(t,j＝7.1hz,1h),7.28(t,j＝7.1hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),6.84(s,1h),5.85-5.75(m,1h),4.57-4.40(m,3h),4.10-3.97(m,2h),3.79-3.61(m,4h),3.43-3.25(m,2h),3.18-3.02(m,1h),2.96-2.81(m,1h),2.78-2.65(m,1h),2.33(s,3h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝7.0hz,3h).
[0355]
实施例33：化合物33的制备
[0356][0357]
合成路线：
[0358][0359]
制备方法：
[0360]
第一步：合成化合物33
[0361]
将化合物27c的粗品盐酸盐(0.29g，0.5mmol)和2-溴-n,n-二甲基乙酰胺(166mg,1.0mmol)加入到dmf(5.0ml)中，然后加入碳酸钾(138mg，1.0mmol)，室温反应过夜，tlc显示还有部分原料没有反应完，继续补加2-溴-n,n-二甲基乙酰胺(166mg,1.0mmol)和碳酸钾(138mg，1.0mmol)，反应3小时，tlc显示反应结束，向反应液中加入水(50ml)，分出有机层，
水相用乙酸乙酯(15ml
×
2)萃取两次，合并有机相，干燥，旋干，残余物用hplc制备纯化(waters sunfire obd 100x30 mm,5μm，流动相a∶0.1％tfain water，流动相b∶乙腈，梯度∶10％乙腈运行1min，52％-52％乙腈运行至10min，95％乙腈运行至14min，10％乙腈运行至16min结束)，得到化合物33(87.3mg,白色固体，产率33.0％)。
[0362]
ms(esi):m/z 529.3[m+1]
+
。
[0363]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)7.98(d,j＝7.2hz,1h),7.65(t,j＝7.2hz,1h),7.59(s,1h),7.49(t,j＝6.8hz,1h),7.28(t,j＝7.6hz,1h),7.23(d,j＝54.0hz,1h),6.82(s,1h),5.80(q,j＝6.8hz,1h),4.34(dd,j＝10.8,2.8hz,1h),4.03-3.91(m,2h),3.30(s,1h),3.21(d,j＝14.4hz,1h),3.15(d,j＝9.6hz,1h),3.08(d,j＝10.8hz,1h),3.03(s,3h),2.95(d,j＝10.4hz,1h),2.87-2.76(m,4h),2.47-2.38(m,1h),2.26(s,3h),1.97(t,j＝10.8hz,1h),1.59(d,j＝7.2hz,3h).
[0364]
实施例34：化合物34的制备
[0365][0366]
化合物34的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用1-氰基-1-环丙烷羧酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物34。
[0367]
ms(esi):537.2[m+1]
+
。
[0368]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)8.04(d,j＝7.2hz,1h),7.72-7.59(m,2h),7.49(t,j＝6.8hz,1h),7.28(t,j＝7.6hz,1h),7.24(d,j＝54.0hz,1h),6.86(s,1h),5.79(q,j＝6.89hz,1h),4.57-4.42(m,2h),4.37(d,j＝12.4hz,1h),4.18-4.03(m,2h),3.32-3.13(m,2h),2.98-2.79(m,2h),2.26(s,3h),1.74-1.47(m,7h).
[0369]
实施例35：化合物35的制备
[0370][0371]
化合物35的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用n-甲基-d-脯氨酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物35。
[0372]
ms(esi):555.2[m+1]
+
。
[0373]1h nmr(400mhz,dmso):δ(ppm)8.02(d,j＝7.2hz,1h),7.65(d,j＝8.5hz,2h),
7.49(t,j＝6.9hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝52.0hz,1h),6.85(s,1h),5.86
–
5.75(m,1h),4.66
–
4.28(m,5h),4.10
–
4.03(m,2h),3.51-3.49(m,1h),3.13
–
3.08(m,1h),2.95-2.92(m,1h),2.75-2.67(m,1h),2.33-2.31(m,4h),2.26(s,3h),2.19-2.16(m,1h),1.86-1.73(m,3h),1.60(d,j＝7.0hz,3h).
[0374]
实施例36：化合物36的制备
[0375][0376]
化合物36的合成参考实施例30中化合物30的合成步骤，其中第一步用甲基磺酰氯代替氯甲酸甲酯，合成得到化合物36。
[0377]
ms(esi):522.2[m+1]
+
。
[0378]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.04(d,j＝7.2hz,1h),7.69(s,1h),7.65(t,j＝7.2hz,1h),7.49(t,j＝6.8hz,1h),7.29(t,j＝7.6hz,1h),7.23(d,j＝54.0hz,1h),6.86(s,1h),5.80(q,j＝6.8hz,1h),4.46(dd,j＝10.8,2.4hz,1h),4.20(d,j＝12.0hz,1h),4.03(dd,j＝10.8,8.8hz,1h),3.70(dd,j＝19.6,11.2hz,2h),3.33-3.27(m,1h),3.10-2.87(m,5h),2.63(t,j＝11.2hz,1h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝7.2hz,3h).
[0379]
实施例37：化合物37的制备
[0380][0381]
化合物37的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用3-甲氧基丙酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物37。
[0382]
ms(esi):530.2[m+1]
+
。
[0383]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.00(t,j＝6.0hz,1h),7.69-7.61(m,2h),7.49(t,j＝6.8hz,1h),7.28(t,j＝7.67hz,1h),7.23(d,j＝54.4hz,1h),6.84(s,1h),5.85-5.74(s,1h),4.54(dd,j＝35.2,12.8hz,1h),4.44(d,j＝10.4hz,1h),4.19-3.96(m,3h),3.59(dd,j＝10.4,5.6hz,2h),3.24(s,3h),3.11(dt,j＝17.6,9.6hz,1h),2.94-2.82(m,1h),2.82-2.58(m,3h),2.47-2.37(m,1h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝7.2hz,3h).
[0384]
实施例38：化合物38的制备
[0385][0386]
化合物38的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用特戊酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物38。
[0387]
ms(esi):528.2[m+1]
+
。
[0388]1h nmr(300mhz,dmso)δ(ppm)8.02(d,j＝7.3hz,1h),7.69-7.58(m,2h),7.49(t,j＝7.2hz,1h),7.28(t,j＝7.8hz,1h),7.24(t,j＝54.3hz,1h),6.84(s,1h),5.86-5.73(m,1h),4.59-4.47(m,2h),4.41(d,j＝13.4hz,1h),4.09-3.94(m,2h),3.21-3.04(m,2h),2.73(dd,j＝22.5,10.3hz,2h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝7.1hz,3h),1.26(s,9h).
[0389]
实施例39：化合物39的制备
[0390][0391]
化合物39的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用1-氟环丙烷羧酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物39。
[0392]
ms(esi):530.2[m+1]
+
。
[0393]1h nmr(300mhz,dmso)δ(ppm)8.03(d,j＝7.2hz,1h),7.64(d,j＝8.4hz,2h),7.49(t,j＝7.0hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.24(t,j＝54.3hz,1h),6.86(s,1h),5.88-5.72(m,1h),4.56-4.27(m,3h),4.08(dd,j＝17.0,8.1hz,2h),3.28-3.12(m,2h),2.94-2.79(m,2h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝7.0hz,3h),1.43-1.14(m,4h).
[0394]
实施例40：化合物40的制备
[0395]
[0396]
化合物40的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用甲氧基乙酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物40。
[0397]
ms(esi):516.2[m+1]
+
。
[0398]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.01(d,j＝7.3hz,1h),7.65(d,j＝7.7hz,2h),7.49(t,j＝6.9hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),6.84(s,1h),5.80(q,j＝6.8hz,1h),4.62-4.35(m,2h),4.31-3.85(m,5h),3.33(s,3h),3.15(d,j＝42.7hz,1h),3.00-2.69(m,2h),2.48-2.43(m,1h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝7.0hz,3h).
[0399]
实施例41：化合物41的制备
[0400][0401]
化合物41的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用1-(甲氧基甲基)环丙基甲酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物41。
[0402]
ms(esi):556.2[m+1]
+
。
[0403]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.15(s,1h),8.02(d,j＝7.3hz,1h),7.66(d,j＝9.0hz,2h),7.49(t,j＝6.9hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),6.85(s,1h),5.87-5.73(m,1h),4.53-4.45(m,2h),4.39(d,j＝12.4hz,1h),4.12-4.98(m,2h),3.38-3.28(m,3h),3.25(s,3h),3.17-3.06(m,2h),2.82-2.70(m,1h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝7.0hz,3h),0.90(t,j＝6.1hz,2h),0.76(t,j＝5.2hz,2h).
[0404]
实施例42：化合物42的制备
[0405][0406]
化合物42的合成参考实施例31中化合物31的合成步骤，其中第一步用甲胺盐酸盐代替二甲胺盐酸盐，合成得到化合物42。
[0407]
ms(esi):501.2[m+1]
+
。
[0408]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.00(d,j＝7.3hz,1h),7.70-7.59(m,2h),7.49(t,j＝6.9hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),6.83(s,1h),6.64(d,j＝4.3hz,1h),5.80(q,j＝6.9hz,1h),4.37(dd,j＝10.8,2.7hz,1h),4.12(d,j＝13.1hz,1h),4.02(dd,j＝21.9,11.5hz,3h),3.08(t,j＝9.9hz,1h),2.99(dd,j＝12.4,9.9hz,1h),
2.77-2.66(m,1h),2.62(d,j＝4.2hz,3h),2.63-2.46(m,1h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝7.1hz,3h).
[0409]
实施例43：化合物43的制备
[0410][0411]
化合物43的合成参考实施例31中化合物31的合成步骤，其中第一步用乙胺盐酸盐代替二甲胺盐酸盐，合成得到化合物43。
[0412]
ms(esi):515.2[m+1]
+
。
[0413]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.00(d,j＝7.3hz,1h),7.70-7.57(m,2h),7.49(t,j＝6.8hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),6.83(s,1h),6.69(t,j＝5.2hz,1h),5.80(q,j＝6.8hz,1h),4.37(dd,j＝10.8,2.7hz,1h),4.15(d,j＝12.7hz,1h),4.02(dd,j＝21.7,12.0hz,3h),3.09(tt,j＝11.1,5.6hz,3h),2.98(dd,j＝12.3,10.1hz,1h),2.76-2.65(m,1h),2.58-2.54(m,1h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝7.1hz,3h),1.04(t,j＝7.1hz,3h).
[0414]
实施例44：化合物44的制备
[0415][0416]
合成路线：
[0417][0418]
制备方法：
[0419]
第一步：合成化合物44b
[0420]
将化合物44a(10.0g，46.0mmol)，(3s)-3-(2-羟基乙基)-1-哌嗪羧酸叔丁酯(10.6g，46.0mmol)溶于dmf(100ml)中，再称取diea(7.13g，55.2mmol)加入反应瓶中，然后将反应液升温到80℃搅拌反应16h。tlc显示反应结束后(有15％左右的sm1原料反应不完)，向反应液中加入乙酸乙酯(100ml)和饱和食盐水(100ml)，分出有机层，水相用乙酸乙酯(20ml
×
2)萃取两次，合并有机相，干燥，旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝3/1(体积比))得到化合物44b(11.0g，25.8mmol，淡黄色油状物，产率56.1％)。
[0421]
ms(esi):m/z 428.2[m+1]
+
。
[0422]
第二步：合成化合物44c
[0423]
将化合物44b(11.0g，25.8mmol)溶于dmf(110ml)中，反应液冷却到0℃，在0℃下分批加入60％的氢化钠(1.24g，31.0mmol)，然后升温到45℃搅拌反应1h。tlc显示反应结束后，将反应液冷却到0℃，向反应液中逐滴滴加甲醇(2ml)，搅拌至不再产生气泡，再向反应液中加入乙酸乙酯(100ml)和饱和食盐水(100ml)，分出有机层，水相用乙酸乙酯(20ml
×
2)萃取两次，合并有机相，干燥，旋干，得到化合物44c(9.1g，22.4mmol，淡黄色油状，产率87.0％)。
[0424]
ms(esi):m/z 408.2[m+1]
+
。
[0425]
第三步：合成化合物44d
[0426]
将化合物44c(9.1g，22.4mmol)溶于甲醇(90ml)中，再向反应液中加入10％湿pb/c(0.91g，10％)，加完后，用氮气置换三次气体，再用氢气置换三次气体后，保持氢气压力50psi，25℃反应5h。tlc显示反应结束后，将反应液过滤，滤液旋干后，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝3/1(体积比))得到化合物44d(7.55g，淡黄色固体，产率90.0％)。
[0427]
ms(esi):m/z 378.2[m+1]
+
。
[0428]
第四步：合成化合物44e
[0429]
将化合物44d(7.55g，20.2mmol)溶于乙酸乙酯(35ml)中，将反应液冷却到0℃，再向反应液中滴加8％hcl-etoac(105ml)，然后反应液加热至40℃下搅拌2h。tlc显示反应结束后，浓缩，再加入乙酸乙酯(30ml
×
2)置换两次(除去部分的盐酸，防止吸潮)，最后加入乙酸乙酯(35ml)打浆，过滤，滤饼干燥得到化合物44e(7.2g,类白色固体，产率100.0％)。
[0430]
ms(esi):m/z 278.2[m+1]
+
。
[0431]
第五步：合成化合物44f
[0432]
将化合物44e(7.2g，20.2mmol)加入到乙腈(80ml)中，再加6n hcl-mecn(10ml，60.6mmol)，将反应液放入闷罐中，然后加热到110℃搅拌16h。tlc显示反应结束后，浓缩，再加入乙腈(30ml
×
2)置换两次(除去部分的盐酸，防止吸潮)，最后加入乙腈(35ml)打浆，过滤，滤饼用少量乙腈洗涤，得到化合物44f(5.56g，类白色固体，产率：85.0％)。
[0433]
ms(esi):m/z 287.1[m+1]
+
。
[0434]
第六步：合成化合物44g
[0435]
将化合物44f(0.56g，1.72mmol)和环丙烷甲酸(0.16g，1.89mmol)加入到dmf(55ml)中，将反应液冷却到0℃，向反应液中逐滴滴加t3p(1.42g，2.24mmol)，再逐滴滴加三乙胺(0.52g，5.16mmol)，滴加完毕，将反应液升温至25℃下反应1h。tlc显示反应结束后，再向反应液中加入乙酸乙酯(20ml)和饱和食盐水(20ml)，分出有机层，水相用乙酸乙酯(4ml
×
2)萃取两次，合并有机相，干燥，旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20：1(体积比))，得到化合物44g(0.5g，土黄色固体，产率81.9％)。
[0436]
ms(esi):m/z 355.2[m+1]
+
。
[0437]
第七步：合成化合物44h
[0438]
向化合物44g(0.5g，1.41mmol)中加入1，2-二氯乙烷(5ml)中，再加四氯化碳(1.73g，11.3mmol)，然后加入三苯基膦(1.48g，5.64mmol)，加完后，用氮气置换三次气体，然后氮气保护下将反应液加热到80℃下搅拌2h。tlc显示反应结束后，旋干，得到粗品化合物44h(0.52g，1.41mmol，深棕色油状)，无需纯化直接用于下一步。
[0439]
ms(esi):m/z 373.2[m+1]
+
[0440]
第八步：合成化合物44
[0441]
向化合物44h(0.26g，0.7mmol)中加入nmp(2.5ml)，再加(r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺(0.14g，0.7mmol，1.0eq)和diea(0.18g，1.4mmol，2.0eq)，加完后，将反应液加热到100℃下搅拌3h。tlc显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(20ml)和饱和食盐水(20ml)，分出有机层，水相用乙酸乙酯(4ml
×
2)萃取两次，合并有机相，干燥，旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20：1(体积比))，层析纯化的产物再用hplc制备纯化(waters sunfire obd100x30 mm,5μm，流动相a∶0.1％tfa in water，流动相b∶乙腈，梯度∶10％乙腈运行1min，52％-52％乙腈运行至10min，95％乙腈运行至14min，10％乙腈运行至16min结束)，得到化合物44(0.1g，白色固体，产率27.1％)。
[0442]
ms(esi):m/z 526.2[m+1]
+
。
[0443]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.14(d,j＝7.0hz,1h),7.78(s,1h),7.67(t,j＝7.2hz,1h),7.49(t,j＝6.9hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝52hz,1h),6.90(s,
1h),5.87
–
5.73(m,1h),4.61(m,1h),4.22(m,2h),4.07-3.97(m,2h),3.63-3.51(m,2h),3.15
–
2.99(m,2h),2.27(s,3h),2.16-2.05(m,2h),1.98
–
1.79(m,1h),1.60(d,j＝7.0hz,3h),0.78(d,j＝3.4hz,4h).
[0444]
实施例45：化合物45的制备
[0445][0446]
合成路线：
[0447][0448]
制备方法：
[0449]
第一步：合成化合物45b
[0450]
将化合物45a(1g,5.79mmol)溶于dmf(15ml)中，冰浴下分批加入nbs(1.03g,5.79mmol)，反应升温至室温搅拌1h。tlc显示反应结束后，将反应液倒入水中，白色固体析出，过滤，滤饼收集旋干得到化合物45b(1.5g，白色固体，产率96％)。
[0451]
ms(esi):m/z 251.0[m+h]
+
。
[0452]
第二步：合成化合物45c
[0453]
将化合物45b(1.4g,5.57mmol)加入到原乙酸三乙酯(8ml)中,加入甲酸铵(1.76g,27.8mmol)，然后升至100度搅拌18h。tlc显示反应结束后，将反应液慢慢加入水:乙酸乙酯(体积比1:1,40ml)中，有灰色固体析出，过滤，收集滤饼，旋干得到化合物45c(0.6g，灰色固体，产率39％)。
[0454]
ms(esi):m/z 274.0[m+h]
+
。
[0455]
第三步：合成化合物45d
[0456]
将化合物45c(50mg,0.18mmol)加入到二氧六环dioxane(2ml)中，加入三苯基膦(95mg,0.36mmol)和四氯化碳(84mg,0.55mmol)，氮气保护下升至70度搅拌4h。tlc显示反应结束后，旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝2:1(体积比))得到化合物45d(30mg，淡黄色油状物，产率56％)。
[0457]
ms(esi):m/z 292.9[m+h]
+
。
[0458]
第四步：合成化合物45e
[0459]
将化合物45d(30mg,0.1mmol)加入到dmf(1ml)中，加入(r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺(23mg,0.12mmol)和diea(40mg,0.31mmol)，升至50度搅拌3h。tlc显示反应结束后，缓慢加入水中，白色固体析出，过滤，滤饼收集并旋干得到化合物45e(30mg，白色固体，产率65％)。
[0460]
ms(esi):m/z 445.0[m+h]
+
。
[0461]
第五步：合成化合物45g
[0462]
将化合物45e(300mg,0.67mmol)加入到dmso(10ml)中，加入化合物45f(230mg,0.81mmol)和氟化铯(410mg,2.69mmol)，升至90度搅拌3h。tlc显示反应结束后，乙酸乙酯稀释，加入水中，萃取，用无水硫酸钠干燥有机相，旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：石油醚/乙酸乙酯＝1:1(体积比))得到化合物45g(400mg，淡黄色固体，产率85％)。
[0463]
ms(esi):m/z 693.2[m+h]
+
。
[0464]
第六步：合成化合物45h
[0465]
将化合物45g(400mg,0.57mmol)加入到乙酸乙酯(4ml)中，滴加8％hcl/乙酸乙酯(5ml)，升至室温搅拌12h。tlc显示反应结束后，旋干，加入碳酸氢钠水溶液，乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥有机相，旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：乙酸乙酯/甲醇＝15:1(体积比))得到化合物45h(300mg，淡黄色固体，产率87％)。
[0466]
ms(esi):m/z 593.2[m+h]
+
。
[0467]
第七步：合成化合物45
[0468]
将化合物45h(0.11g,0.19mmol)溶于甲苯(4ml)中,加入xphos pd g3(15mg,0.02mmol)和碳酸铯(0.12g,0.37mmol),氮气保护下，将反应液升温至100℃搅拌16h。tlc显示反应结束后，加入水，用乙酸乙酯萃取，用无水硫酸钠干燥有机相，旋干，残余物经过hplc制备纯化(waters sunfire obd 100x30 mm,5μm，流动相a∶0.1％tfa in water，流动相b∶乙腈，梯度∶10％乙腈运行1min，52％-52％乙腈运行至10min，95％乙腈运行至14min，10％乙腈运行至16min结束)，得到化合物45(30mg，白色固体，产率31％)
[0469]
ms(esi):m/z 513.2[m+h]
+
。
[0470]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)8.24-8.17(m,2h),7.64(t,j＝7.2hz,1h),7.50(t,j＝6.8hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),5.83
–
5.70(m,1h),
4.67
–
4.32(m,3h),4.25-4.15(m,1h),3.99-3.80(m,1h),3.20-2.95(m,2h),2.95-2.70(m,2h),2.29(s,3h),2.17-2.04(m,1h),1.59(d,j＝8.0hz,3h),0.90-0.60(m,4h).
[0471]
实施例46：化合物46的制备
[0472][0473]
化合物46的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用(1s,2r)-2-氟环丙烷羧酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物46。
[0474]
ms(esi):530.2[m+1]
+
。
[0475]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.02(t,j＝9.6hz,1h),7.68-7.61(m,2h),7.49(t,j＝7.2hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),6.85(d,j＝4.5hz,1h),5.80(q,j＝7.0hz,1h),5.00-4.69(m,1h),4.58-4.40(m,3h),4.17-3.97(m,2h),3.08-2.71(m,5h),2.28(s,3h),1.60(d,j＝7.0hz,3h),1.52-1.37(m,1h),1.28-1.12(m,1h).
[0476]
实施例47：化合物47的制备
[0477][0478]
化合物47的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用(1s,2s)-2-氟环丙烷羧酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物47。
[0479]
ms(esi):530.2[m+1]
+
。
[0480]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)9.65-9.50(m,1h),7.84(s,1h),7.72(t,j＝7.5hz,1h),7.57(t,j＝7.2hz,1h),7.41-7.35(m,1h),7.24(t,j＝54.4hz,1h),6.97(s,1h),5.98-5.88(m,1h),5.09-4.81(m,1h),4.64
–
4.35(m,3h),4.21-3.98(m,2h),3.54-3.43(m,1h),3.17-2.75(m,3h),2.48(s,3h),2.30-2.11(m,1h),1.69(d,j＝7.0hz,3h),1.64-1,48(m,1h),1.12-1.03(m,1h).
[0481]
实施例48：化合物48的制备
[0482][0483]
化合物48的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用2,2-二氟环丙羧酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物48。
[0484]
ms(esi):548.2[m+1]
+
。
[0485]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.20(s,1h),8.14(s,1h),7.67(d,j＝10.7hz,2h),7.49(d,j＝6.5hz,1h),7.29(t,j＝7.5hz,1h),7.16(d,j＝54.3hz,1h),6.88(d,j＝4.9hz,1h),5.87-5.74(m,1h),4.49(t,j＝16.8hz,2h),4.13(ddd,j＝31.0,24.7,7.6hz,3h),3.45(d,j＝13.9hz,1h),3.32(d,j＝8.3hz,1h),3.12(d,j＝12.9hz,1h),3.01(d,j＝11.6hz,1h),2.84-2.67(m,1h),2.29(s,3h),2.00-1.86(m,2h),1.61(d,j＝5.2hz,3h).
[0486]
实施例49：化合物49的制备
[0487][0488]
化合物49的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用1-甲基环丙烷-1-羧酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物49。
[0489]
ms(esi):526.2[m+1]
+
。
[0490]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.87(s,1h),7.81(s,1h),7.72(t,j＝7.1hz,1h),7.52(t,j＝6.7hz,1h),7.31(t,j＝7.6hz,1h),7.23(t,j＝54.3hz,1h),6.93(s,1h),5.93-5.80(m,1h),4.60-4.32(m,3h),4.20-4.00(m,2h),3.66-3.58(m,1h),3.15-3.11(m,2h),2.85-2.80(m,1h),2.37(s,3h),1.65(d,j＝6.9hz,3h),1.28(s,3h),0.86(s,2h),0.59(s,2h).
[0491]
实施例50：化合物50的制备
[0492][0493]
化合物50的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用2,2,3,3-四甲基环丙烷甲酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物50。
[0494]
ms(esi):568.2[m+1]
+
。
[0495]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.79(s,1h),7.77(s,1h),7.73-7.68(m,1h),7.51(t,j＝7.0hz,1h),7.30(t,j＝7.6hz,1h),7.16(t,j＝54.3hz,1h),6.97(s,1h),5.94-5.74(m,1h),4.69-4.38(m,2h),4.20-4.0(s,3h),3.26-3.17(m,2h),3.00-2.80(m,2h),2.73-2.67(m,1h),2.36(s,3h),1.64(d,j＝6.9hz,3h),1.21-1.12(m,12h).
[0496]
实施例51：化合物51的制备
[0497][0498]
化合物51的合成参考实施例8中化合物8的合成步骤，在三并环中间体的合成中，用(s)-1-boc-3-羟甲基哌嗪代替(r)-1-boc-3-羟甲基哌嗪合成得到化合物51。
[0499]
ms(esi):512.2[m+1]
+
。
[0500]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.15(s,1h),8.11(d,j＝7.4hz,1h),7.67-7.63(m,2h),7.49(t,j＝7.1hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),6.86(s,1h),5.85-5.76(m,1h),4.59-4.42(m,3h),4.13-3.98(m,2h),3.23-3.08(m,2h),2.99-2.91(m,1h),2.82-2.69(m,1h),2.27(s,3h),2.18-2.07(m,1h),1.61(d,j＝7.1hz,3h),0.87-0.70(m,4h).
[0501]
实施例52：化合物52的制备
[0502][0503]
化合物52的合成参考实施例30中化合物30的合成步骤，在三并环中间体的合成中，用(s)-1-boc-3-羟甲基哌嗪代替(r)-1-boc-3-羟甲基哌嗪合成得到化合物52。
[0504]
ms(esi):512.2[m+1]
+
。
[0505]1h nmr(400mhz,chloroform-d)δ(ppm)9.14(br.s,1h),8.77(s,1h),7.70-7.56(m,2h),7.46(t,j＝7.1hz,1h),7.19(t,j＝7.7hz,1h),6.92(t,j＝55.0hz,1h),6.80(s,1h),5.76-5.67(m,1h),4.35-4.12(m,3h),4.07-4.01(m,2h),3.76(s,3h),3.25-3.18(m,1h),3.12-3.03(m,1h),2.94-2.85(m,1h),2.73-2.62(m,1h),2.44(s,3h),1.72(d,j＝7.0hz,3h).
[0506]
实施例53：化合物53的制备
[0507][0508]
化合物53的合成参考实施例37中化合物37的合成步骤，在三并环中间体的合成中，用(s)-1-boc-3-羟甲基哌嗪代替(r)-1-boc-3-羟甲基哌嗪合成得到化合物53。
[0509]
ms(esi):530.2[m+1]
+
。
[0510]1h nmr(400mhz,chloroform-d)δ(ppm)8.80(s,1h),7.75-7.50(m,2h),7.50-7.41(m,1h),7.24-7.16(m,1h),6.92(t,j＝55.0hz,1h),6.89-6.80(m,1h),5.79-5.67(m,1h),4.81-4.64(m,1h),4.37-4.28(m,1h),4.14-3.88(m,3h),3.73(t,j＝6.3hz,2h),3.37(s,3h),3.35-3.28(m,1h),3.24-3.12(m,1h),3.00-2.82(m,2h),2.76-2.55(m,2h),2.45(s,3h),1.73(d,j＝7.0hz,3h).
[0511]
实施例54：化合物54的制备
[0512][0513]
化合物54的合成参考实施例40中化合物40的合成步骤，在三并环中间体的合成中，用(s)-1-boc-3-羟甲基哌嗪代替(r)-1-boc-3-羟甲基哌嗪合成得到化合物54。
[0514]
ms(esi):516.2[m+1]
+
。
[0515]1h nmr(400mhz,chloroform-d)δ(ppm)8.96(br.s,1h),8.79(s,1h),7.72-7.55(m,2h),7.47(d,j＝7.1hz,1h),7.21(t,j＝7.2hz,1h),6.92(t,j＝55.0hz,1h),6.89-6.81(m,1h),5.77-5.68(m,1h),4.74-4.56(m,1h),4.37-4.29(m,1h),4.24-4.17(m,1h),4.15-4.03(m,3h),3.45(s,3h),3.37-3.15(m,2h),2.99-2.85(m,2h),2.54-2.47(m,1h),2.46(s,3h),1.73(d,j＝7.0hz,3h).
[0516]
实施例55：化合物55的制备
[0517][0518]
化合物55的合成参考实施例42中化合物42的合成步骤，在三并环中间体的合成中，用(s)-1-boc-3-羟甲基哌嗪代替(r)-1-boc-3-羟甲基哌嗪合成得到化合物55。
[0519]
ms(esi):501.2[m+1]
+
。
[0520]1h nmr(400mhz,chloroform-d)δ(ppm)9.21(br.s,1h),8.77(s,1h),7.66(t,j＝7.5hz,1h),7.59(s,1h),7.47(t,j＝7.1hz,1h),7.19(t,j＝7.7hz,1h),6.91(t,j＝55.0hz,1h),6.77(s,1h),5.87-5.77(m,1h),5.35(br.s,1h),4.25-4.11(m,2h),3.99-3.90(m,3h),3.19-3.07(m,2h),2.85(s,3h),2.82-2.79(m,1h),2.60-2.53(m,1h),2.51(s,3h),1.74(d,j＝7.1hz,3h).
[0521]
实施例56：化合物56的制备
[0522][0523]
化合物56的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用2-氧杂环丁烷羧代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物56。
[0524]
ms(esi):528.2[m+1]
+
。
[0525]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.12-8.00(m,1h),7.66(dt,j＝12.5,5.2hz,2h),7.49(t,j＝6.8hz,1h),7.29(t,j＝7.6hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),6.89-6.77(m,1h),5.80(q,j＝6.6hz,1h),5.57-5.43(m,1h),4.64-4.26(m,4h),4.19-3.91(m,3h),3.88-3.68(m,1h),3.40-3.05(m,2h),3.01-2.65(m,3h),2.27(s,3h),1.60(d,j＝7.0hz,3h).
[0526]
实施例57：化合物57的制备
[0527][0528]
化合物57的合成参考实施例31中化合物31的合成步骤，其中第一步用环丙胺代替二甲胺盐酸盐，合成得到化合物57。
[0529]
ms(esi):527.2[m+1]
+
。
[0530]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.44(s,1h),7.74-7.63(m,2h),7.51(t,j＝6.9hz,1h),7.30(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),6.87(s,1h),6.81(s,1h),5.89-5.77(m,1h),4.39(dd,j＝10.8,2.7hz,1h),4.13(d,j＝12.5hz,1h),4.01(dd,j＝19.8,9.9hz,3h),3.14-3.05(m,1h),3.01-2.92(m,1h),2.81-2.63(m,2h),2.54(s,1h),2.32(s,3h),1.62(d,j＝7.0hz,3h),0.63-0.53(m,2h),0.45-0.36(m,2h).
[0531]
实施例58：化合物58的制备
[0532][0533]
化合物58的合成参考实施例31中化合物31的合成步骤，其中第一步用环丙醇代替二甲胺盐酸盐，合成得到化合物58。
[0534]
ms(esi):528.2[m+1]
+
。
[0535]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.40(s,1h),8.04(d,j＝7.3hz,1h),7.68-7.62(m,2h),7.48(t,j＝6.8hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.23(d,j＝54.4hz,1h),6.83(s,1h),5.87-5.73(m,1h),4.42(d,j＝9.0hz,1h),4.19-3.90(m,5h),3.18-3.04(m,2h),2.80-2.62(m,2h),2.25(s,3h),1.59(d,j＝7.1hz,3h),0.69-0.62(m,4h).
[0536]
实施例59：化合物59的制备
[0537][0538]
化合物59的合成参考实施例31中化合物31的合成步骤，其中第一步用吗啡啉代替二甲胺盐酸盐，合成得到化合物59。
[0539]
ms(esi):557.2[m+1]
+
。
[0540]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.15(s,1h),8.03(d,j＝7.2hz,1h),7.69-7.58(m,2h),7.49(t,j＝6.9hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),6.84(s,1h),5.80(q,j＝6.9hz,1h),4.44(dd,j＝10.8,2.7hz,1h),4.05-3.96(m,2h),3.76(d,j＝12.4hz,1h),3.66(d,j＝12.4hz,1h),3.60(t,j＝4.4hz,4h),3.25-3.20(m,5h),3.11-3.04(m,1h),2.87-2.77(m,1h),2.65-2.57(m,1h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝7.1hz,3h).
[0541]
实施例60：化合物60的制备
[0542][0543]
化合物60的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用四氢吡喃-4-甲酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物60。
[0544]
ms(esi):556.2[m+1]
+
。
[0545]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.07(d,j＝6.8hz,1h),7.73-7.60(m,2h),7.49(t,j＝6.4hz,1h),7.28(t,j＝7.6hz,1h),7.23(d,j＝54.4hz,1h),6.85(s,1h),5.89-5.75(m,1h),4.65-4.41(m,2h),4.29-4.15(m,1h),4.05(dd,j＝18.6,9.8hz,3h),3.87(d,j＝9.7hz,3h),3.21-3.10(m,1h),3.10-2.64(m,4h),2.27(s,3h),1.71-1.45(m,7h).
[0546]
实施例61：化合物61的制备
[0547][0548]
化合物61的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用1-甲基哌啶-4-甲酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物61。
[0549]
ms(esi):569.2[m+1]
+
。
[0550]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)8.19(s,2h),8.03(d,j＝7.3hz,1h),7.67-7.63(m,2h),7.49(t,j＝7.1hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),6.85-5.76(m,1h),5.79(d,j＝9.0hz,1h),4.59(d,j＝13.0hz,1h),4.51-4.43(m,2h),4.19-4.14(m,1h),4.10-4.00(m,3h),3.37(t,j＝12.6hz,1h),3.21-3.13(m,1h),3.06-2.88(m,3h),2.82-2.69(m,2h),2.33(s,3h),2.26(s,3h),2.24-2.20(m,1h),1.73-1.66(m,3h),1.60(d,j＝7.1hz,3h).
[0551]
实施例62：化合物62的制备
[0552][0553]
化合物62的合成参考实施例31中化合物31的合成步骤，其中第一步用n-甲基哌嗪代替二甲胺盐酸盐，合成得到化合物62。
[0554]
ms(esi):570.2[m+1]
+
。
[0555]1h nmr(400mhz,dmso)δ(ppm)8.26(s,1h),7.72
–
7.61(m,2h),7.50(t,j＝7.0hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝52.0hz,1h),6.86(s,1h),5.82(p,j＝6.9hz,1h),4.45(dd,j＝10.7,2.6hz,1h),4.05
–
4.00(m,2h),3.74(d,j＝12.6hz,1h),3.64(d,j＝12.4hz,1h),3.51
–
3.45(m,2h),3.26
–
3.13(m,3h),3.10
–
3.02(m,1h),2.86
–
2.81(m,1h),2.66
–
2.57(m,1h),2.50
–
2.46(m,4h),2.29(s,6h),1.61(d,j＝7.0hz,3h).
[0556]
实施例63：化合物63的制备
[0557][0558]
化合物63的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第四步用1-甲基吡唑-5-甲酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物63。
[0559]
ms(esi):552.2[m+1]
+
。
[0560]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.15(s,1h),8.03(s,1h),7.80(s,1h),7.67-6.62(m,2h),7.49(t,j＝6.6hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.17(t,j＝54.4hz,1h),6.85(s,1h),6.64(s,1h),5.85-5.74(m,1h),5.26-5.24(m,1h),4.68-4.62(m,1h),4.49-4.41(m,1h),4.12-4.06(m,2h),3.92(s,3h),3.25-3.16(m,2h),2.89-2.85(m,2h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝6.9hz,3h).
[0561]
实施例64：化合物64的制备
[0562][0563]
化合物64的合成参考实施例27中化合物27的合成步骤，其中第二步用(1r)-1-(3-(二氟(四氢呋喃-2-基)甲基)苯基)乙-1-胺代替(r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺，第四步用环丙烷甲酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物64。
[0564]
ms(esi):552.2[m+1]+。
[0565]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.15(s,1h),8.03(s,1h),7.80(s,1h),7.67-6.62(m,2h),7.49(t,j＝6.6hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.17(t,j＝54.4hz,1h),6.85(s,1h),6.64(s,1h),5.85-5.74(m,1h),5.26-5.24(m,1h),4.68-4.62(m,1h),4.49-4.41(m,1h),4.12-4.06(m,2h),3.92(s,3h),3.25-3.16(m,2h),2.89-2.85(m,2h),2.26(s,3h),1.60(d,j＝6.9hz,3h).
[0566]
实施例65：化合物65的制备
[0567][0568]
化合物65的合成参考实施例44中化合物44的合成步骤，其中第八步用(1r)-1-(3-(二氟(四氢呋喃-2-基)甲基)苯基)乙-1-胺代替(r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺，合成得到化合物65。
[0569]
ms(esi):578.2[m+1]
+
。
[0570]1h nmr(300mhz,dmso)δ8.21-8.06(m,2h),7.78-7.70(m,1h),7.64-7.51(m,2h),7.41-7.31(m,2h),6.87(s,1h),5.70-5.50(m,1h),4.60(t,j＝11.5hz,1h),4.45-4.30(m,1h),4.28-4.10(m,2h),4.10-3.91(m,1h),3.73-3.55(m,3h),3.53-3.47(m,2h),3.08-2.95(m,2h),2.33-2.25(m,3h),2.15-2.01(m,2h),1.97-1.66(m,4h),1.64-1.46(m,4h),0.87-0.63(m,4h).
[0571]
实施例66：化合物66的制备
[0572][0573]
合成路线：
[0574][0575]
制备方法：
[0576]
第一步：合成化合物66a
[0577]
将化合物44f(5.6g，17.2mmol)和乙酸(1.14g，18.9mmol)加入到dmf(55ml)中，将反应液冷却到0℃，向反应液中逐滴滴加t3p(14.2g，22.4mmol)，再逐滴滴加三乙胺(5.2g，51.6mmol)，滴加完毕，将反应液升温至25℃下反应1h。tlc显示反应结束后，再向反应液中加入乙酸乙酯(200ml)和饱和食盐水(200ml)，分出有机层，水相用乙酸乙酯(40ml
×
2)萃取两次，合并有机相，干燥，旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20：1(体积比))，得到化合物66a(5.1g，土黄色固体，产率82.2％)。
[0578]
ms(esi):m/z 329.2[m+1]
+
。
[0579]
第二步：合成化合物66b
[0580]
向化合物66a(4.64g，14.1mmol)中加入1，2-二氯乙烷(50ml)中，再加四氯化碳(1.73g，11.3mmol)，然后加入三苯基膦(1.48g，5.64mmol，4.0eq)，加完后，用氮气置换三次气体，然后氮气保护下将反应液加热到80℃下搅拌2h。tlc显示反应结束后，旋干，得到粗品化合物66b(5.0g，深棕色油状)，无需进一步纯化，直接用于下一步。
[0581]
ms(esi):m/z 347.1[m+1]
+
。
[0582]
第三步：合成化合物66c
[0583]
向上一步得到的粗品化合物66b(5.0g)中加入nmp(50ml)，再加(r)-1-(3-(二氟甲
基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺(2.84g，15.0mmol，1.0eq)和diea(3.8g，30.0mmol)，加完后，将反应液加热到100℃下搅拌3h。tlc显示反应结束后，向反应液中加入乙酸乙酯(100ml)和饱和食盐水(100ml)，分出有机层，水相用乙酸乙酯(100ml
×
2)萃取两次，合并有机相，干燥，旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂为二氯甲烷：甲醇＝20：1(体积比))，得到化合物66c(6.0g，淡黄色固体，两步产率85.2％)。
[0584]
ms(esi):m/z 500.2[m+1]
+
。
[0585]
第四步：合成化合物66d
[0586]
将化合物66c(6.0g,12mmol)加入到乙醇(60ml)中，再加入浓盐酸(12ml)，然后升温到90℃，反应12小时，tlc显示反应结束，旋干得到化合物66d的盐酸盐粗品(5.8g,白色固体)，无需进一步纯化，直接用于下一步。
[0587]
第五步：合成化合物66
[0588]
将化合物66d的粗品盐酸盐(0.24g，0.5mmol)加入到dcm(2ml)中，然后向反应液中加入三乙胺(100mg，1.0mmol)，将反应液冷却到0℃，分批加入三光气(296mg，1.0mmol)，加完后，0℃反应30min。tlc显示反应结束后，再加入二甲胺盐酸盐(81.5mg，1.0mmol)，并补加三乙胺(100mg，1.0mmol)，加完后，将反应液升温到室温搅拌反应1h。tlc显示反应结束后，向反应液中加入水(50ml)，分出有机层，水相用乙酸乙酯(5ml
×
2)萃取两次，合并有机相，干燥，旋干，残余物用hplc制备纯化(waters sunfire obd 100x30 mm,5μm，流动相a∶0.1％tfain water，流动相b∶乙腈，梯度∶10％乙腈运行1min，52％-52％乙腈运行至10min，95％乙腈运行至14min，10％乙腈运行至16min结束)，得到化合物66(87mg,白色固体，产率33.0％)。
[0589]
ms(esi):529.2[m+1]
+
。
[0590]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.18(s,2h),7.80(s,1h),7.67(t,j＝7.2hz,1h),7.49(t,j＝6.8hz,1h),7.29(t,j＝7.6hz,1h),7.23(t,j＝56hz,1h),6.88(s,1h),5.87
–
5.68(m,1h),4.67(t,j＝10.8hz,1h),4.19(d,j＝10.8hz,1h),3.62(d,j＝11.6hz,1h),3.36(t,j＝11.2hz,2h),3.15-3.08(m,2h),3.05
–
2.92(m,2h),2.80(s,6h),2.27(s,3h),2.15-2.05(m,1h),1.87(d,j＝15.2hz,1h),1.60(d,j＝7.2hz,3h).
[0591]
实施例67：化合物67的制备
[0592][0593]
合成路线：
[0594][0595]
制备方法：
[0596]
第一步：合成化合物67
[0597]
将化合物66d的粗品盐酸盐(0.24g，0.5mmol)和化合物3-氧杂环丁烷羧酸(175mg，1.72mmol)加入到dmf(5.5ml)中，将反应液冷却到0℃，向反应液中逐滴滴加t3p(712mg，2.24mmol)，再逐滴滴加三乙胺(0.52g，5.16mmol)，滴加完毕，将反应液升温至25℃下反应1h。tlc显示反应结束后，再向反应液中加入乙酸乙酯(20ml)和饱和食盐水(20ml)，分出有机层，水相用乙酸乙酯(20ml
×
2)萃取两次，合并有机相，干燥，旋干，残余物用硅胶柱层析纯化(洗脱剂：二氯甲烷/甲醇＝20：1(体积比))，柱层析纯化的产物再用hplc制备纯化(waters sunfire obd 100x30 mm,5μm，流动相a∶0.1％tfain water，流动相b∶乙腈，梯度∶10％乙腈运行1min，52％-52％乙腈运行至10min，95％乙腈运行至14min，10％乙腈运行至16min结束)，得到化合物67(60mg，灰白色固体，两步产率22.1％)。
[0598]
ms(esi):m/z 542.2[m+1]
+
。
[0599]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.17(d,j＝7.3hz,1h),7.77(d,j＝5.3hz,1h),7.66(t,j＝7.3hz,1h),7.49(t,j＝7.0hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝52.0hz,1h),6.90(d,j＝4.5hz,1h),5.82-5.77(m,1h),4.84-4.64(m,4h),4.61-4.49(m,1h),4.30-4.10(m,3h),3.25-3.17(m,3h),3.06-3.02(m,2h),2.28(s,3h),2.11
–
2.07(m,1h),1.92
–
1.85(m,1h),1.60(d,j＝7.1hz,3h).
[0600]
实施例68：化合物68的制备
[0601][0602]
化合物68的合成参考实施例67中化合物67的合成步骤，其中第一步用(r)-四氢-3-呋喃甲酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物68。
[0603]
ms(esi):556.2[m+1]
+
。
[0604]1h nmr(400mhz,dmso)δ9.83-9.69(m,1h),7.98(s,1h),7.79-7.70(m,1h),7.59(t,j＝6.7hz,1h),7.39(t,j＝7.7hz,1h),7.24(t,j＝54.2hz,1h),7.01(d,j＝2.9hz,1h),6.02-5.78(m,1h),4.80-4.59(m,1h),4.38(dd,j＝6.7,4.0hz,1h),4.21(d,j＝12.0hz,
1h),4.06-3.85(m,3h),3.81-3.64(m,3h),3.60-3.44(m,2h),3.28-3.19(m,3h),2.51(s,3h),2.27-2.16(s,1h),2.12-1.96(m,3h),1.10(d,j＝7.0hz,3h).
[0605]
实施例69：化合物69的制备
[0606][0607]
化合物69的合成参考实施例67中化合物67的合成步骤，其中第一步用(s)-四氢-3-呋喃甲酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物69。
[0608]
ms(esi):556.2[m+1]
+
。
[0609]1h nmr(400mhz,dmso)δ9.88-9.70(m,1h),7.95(s,1h),7.78-7.69(m,1h),7.58(t,j＝6.7hz,1h),7.38(t,j＝7.7hz,1h),7.25(t,j＝54.2hz,1h),7.00(d,j＝2.9hz,1h),6.01-5.78(m,1h),4.79-4.59(m,1h),4.36(dd,j＝6.7,4.0hz,1h),4.20(d,j＝12.0hz,1h),4.05-3.83(m,3h),3.80-3.64(m,3h),3.59-3.44(m,2h),3.28-3.18(m,3h),2.52(s,3h),2.25-2.14(s,1h),2.12-1.96(m,3h),1.69(d,j＝7.0hz,3h).
[0610]
实施例70：化合物70的制备
[0611][0612]
化合物70的合成参考实施例67中化合物67的合成步骤，其中第一步用1-氰基-1-环丙烷羧酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物70。
[0613]
ms(esi):551.2[m+1]
+
。
[0614]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.25-8.14(m,1h),7.80(s,1h),7.67(t,j＝7.1hz,1h),7.49(t,j＝7.1hz,1h),7.29(t,j＝7.2hz,1h),7.23(d,j＝54.4hz,1h),6.91(s,1h),5.87-5.74(m,1h),4.62(t,j＝11.2hz,1h),4.30-4.14(m,2h),4.10-3.95(m,1h),3.72-3.53(m,2h),3.20-3.08(m,3h),2.28(s,3h),2.20-2.06(m,1h),2.00-1.85(m,1h),1.75-1.40(m,7h).
[0615]
实施例71：化合物71的制备
[0616][0617]
化合物71的合成参考实施例67中化合物67的合成步骤，其中第一步用1-甲氧基环丙烷羧酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物71。
[0618]
ms(esi):556.2[m+1]
+
。
[0619]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.20(d,j＝6.8hz,1h),7.79(s,1h),7.67(t,j＝7.2hz,1h),7.49(t,j＝6.9hz,1h),7.29(t,j＝7.2hz,1h),7.23(t,j＝56hz,1h),6.91(s,1h),5.86
–
5.74(m,1h),4.64(t,j＝10.8hz,1h),4.21(d,j＝11.2hz,1h),4.08(br.s,1h),3.32-3.25(m,7h),3.12-3.01(m,2h),2.28(s,3h),2.18-2.02(m,1h),1.90(d,j＝14.0hz,1h),1.60(d,j＝7.2hz,3h),1.02-0.87(m,4h).
[0620]
实施例72：化合物72的制备
[0621][0622]
化合物72的合成参考实施例66中化合物66的合成步骤，其中第五步用氯甲酸甲酯代替二甲胺盐酸盐，合成得到化合物72。
[0623]
ms(esi):516.2[m+1]
+
。
[0624]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.15(s,1h),7.79(s,1h),7.67(t,j＝7.2hz,1h),7.49(t,j＝6.8hz,1h),7.29(t,j＝7.2hz,1h),7.23(t,j＝56hz,1h),6.89(s,1h),5.86
–
5.73(m,1h),4.58(t,j＝10.6hz,1h),4.20(d,j＝11.2hz,1h),3.93(d,j＝7.2hz,1h),3.74(d,j＝12.0hz,1h),3.65(s,3h),3.25-3.17(m,4h),3.05(s,1h),2.27(s,3h),2.15-2.05(m,1h),1.88(d,j＝14hz,1h),1.60(d,j＝7.2hz,3h).
[0625]
实施例73：化合物73的制备
[0626][0627]
化合物73的合成参考实施例67中化合物67的合成步骤，其中第一步用氮杂环丁烷-1-乙酸盐酸盐代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物73。
[0628]
ms(esi):555.2[m+1]
+
。
[0629]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.20(s,1h),7.78(s,1h),7.71-7.61(m,1h),7.50(t,j＝4.0hz,1h),7.29(t,j＝4.0hz,1h),7.24(t,j＝56hz,1h),6.90(s,1h),5.85-5.73(m,1h),4.66-4.49(m,1h),4.25-4.10(m,2h),3.97-3.85(m,1h),3.75-3.70(m,1h),3.47-3.40(m,2h),3.34-3.29(m,4h),3.27-3.22(m,1h),3.19-3.08(m,3h),2.62-2.53(m,1h),2.28(s,3h),2.15-2.0(m,2h),1.93-1.78(s,1h),1.60(d,j＝6.4hz,3h).
[0630]
实施例74：化合物74的制备
[0631][0632]
化合物74的合成参考实施例67中化合物67的合成步骤，其中第一步用甲氧基乙酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物74。
[0633]
ms(esi):530.2[m+1]
+
。
[0634]1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ8.18(s,1h),7.78(s,1h),7.67(t,j＝7.5hz,1h),7.49(t,j＝7.1hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),6.90(s,1h),5.85-5.75(m,1h),4.66-4.55(m,1h),4.25-4.10(m,3h),3.97-3.85(m,1h),3.69-3.65(m,1h),3.34(s,2h),3.31(s,3h),3.26-3.14(m,3h),3.09-3.04(m,1h),2.27(s,3h),2.15-2.06(m,1h),1.93-1.84(m,1h),1.60(d,j＝7.0hz,3h).
[0635]
实施例75：化合物75的制备
[0636][0637]
合成路线：
[0638][0639]
制备方法：
[0640]
第一步：合成化合物75
[0641]
将化合物66d的粗品盐酸盐(0.24g，0.5mmol)加入到无水乙腈(5ml)中，然后依次加入碳酸钾(138mg,1.0mmol)和甲磺酸四氢呋喃-3-基酯(166mg,1.0mmol),然后将反应液升温回流条件下反应12小时。tlc显示反应结束后，旋干后，加入水(20ml)和乙酸乙酯(20ml)，分出有机层，水相用乙酸乙酯(5ml
×
2)萃取两次，合并有机相，干燥，旋干，残余物用hplc制备纯化(waters sunfire obd 100x30 mm,5μm，流动相a∶0.1％tfain water，流动相b∶乙腈，梯度∶10％乙腈运行1min，52％-52％乙腈运行至10min，95％乙腈运行至14min，10％乙腈运行至16min结束)，得到化合物75(61mg,白色固体，产率23.0％)。
[0642]
ms(esi):528[m+1]
+
。
[0643]1h nmr(300mhz,dmso)δ8.14(d,j＝7.3hz,1h),7.79(s,1h),7.65(t,j＝7.4hz,1h),7.47(d,j＝7.2hz,1h),7.28(t,j＝7.5hz,1h),7.23(t,j＝53.8hz,1h),6.84(s,1h),5.85-5.71(m,1h),4.65(t,j＝11.1hz,1h),4.16(d,j＝8.4hz,1h),3.85-3.74(m,2h),3.72-3.60(m,1h),3.53(t,j＝7.6hz,1h),3.15-2.87(m,4h),2.80-2.66(m,1h),2.60-2.52(m,1h),2.37-2.17(m,5h),2.15-1.93(m,2h),1.86-1.69(m,2h),1.58(d,j＝6.7hz,3h).
[0644]
实施例76：化合物76的制备
[0645][0646]
合成路线：
[0647][0648]
制备方法：
[0649]
第一步：合成化合物76
[0650]
将化合物66d的粗品盐酸盐(0.24g，0.5mmol)加入到无水thf(5ml)中，然后加入多聚甲醛(225mg,2.5mmol),室温下搅拌4小时，然后加入氰基硼氢化钠(157mg,2.5mmol)。在搅拌下将混合物加热至50℃过夜。冷却后加入25ml水，水相用二氯甲烷(10ml
×
2)萃取两次，合并有机相，干燥，旋干，残余物用hplc制备纯化(waters sunfire obd 100x30 mm,5μm，流动相a∶0.1％tfa in water，流动相b∶乙腈，梯度∶10％乙腈运行1min，52％-52％乙腈运行至10min，95％乙腈运行至14min，10％乙腈运行至16min结束)，得到化合物76(61mg,白色固体，产率26.0％)。
[0651]
ms(esi):472.2[m+1]
+
。
[0652]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.23-8.12(m,2h),7.80(s,1h),7.67(t,j＝7.2hz,1h),7.49(t,j＝6.9hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),6.87(s,1h),5.79(q,j＝6.9hz,1h),4.62(t,j＝10.8hz,1h),4.18(dd,j＝7.6,3.4hz,1h),3.37(t,j＝10.8hz,2h),3.11(d,j＝11.6hz,1h),3.04-2.96(m,1h),2.84(d,j＝10.8hz,1h),2.63(d,j＝9.8hz,1h),2.28(s,3h),2.27(s,3h),2.23-2.01(m,2h),1.83(d,j＝15.5hz,1h),1.60(d,j＝7.0hz,3h).
[0653]
实施例77：化合物77的制备
[0654][0655]
化合物77的合成参考实施例75中化合物75的合成步骤，其中第一步用1-溴-2-甲氧基乙烷代替甲磺酸四氢呋喃-3-基酯，合成得到化合物77。
[0656]
ms(esi):516.2[m+1]
+
。
[0657]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.12(t,j＝7.1hz,1h),7.80(d,j＝8.1hz,1h),7.67(d,j＝7.1hz,1h),7.49(d,j＝6.7hz,1h),7.29(dd,j＝15.5,7.8hz,1h),7.25(td,j＝54.4,15.5hz,1h),6.87(d,j＝8.8hz,,1h),5.85-5.71(m,1h),4.70-4.57(m,1h),4.17(s,1h),3.52-3.45(m,2h),3.40-3.35(m,1h),3.28(d,j＝8.8hz,3h),3.13-3.04(m,1h),3.02-2.88(s,2h),2.75-2.65(m,1h),2.60-2.53(m,2h),2.36-2.28(m,1h),2.28(d,j＝7.1hz,3h),2.25-2.18(m,1h),2.15-2.02(m,1h),1.86-1.77(m,1h),1.60(t,j＝7.1hz,3h).
[0658]
实施例78：化合物78的制备
[0659][0660]
化合物78的合成参考实施例66中化合物66的合成步骤，其中第五步用氮杂环丁烷代替二甲胺盐酸盐，合成得到化合物78。
[0661]
ms(esi):541.2[m+1]
+
。
[0662]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.18(d,j＝7.1hz,2h),7.77(s,1h),7.67(t,j＝7.3hz,1h),7.49(t,j＝6.7hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),6.88(s,1h),5.86-5.72(m,1h),4.62(t,j＝10.7hz,1h),4.23-4.17(m,1h),4.01-3.89(m,4h),3.75(d,j＝12.6hz,1h),3.29-3.23(m,2h),3.22-3.05(m,4h),3.03-2.94(m,1h),2.27(s,3h),2.22-2.04(m,3h),1.89(d,j＝15.0hz,1h),1.60(d,j＝7.0hz,3h).
[0663]
实施例79：化合物79的制备
[0664][0665]
化合物79的合成参考实施例67中化合物67的合成步骤，其中第一步用烟酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物79。
[0666]
ms(esi):563.2[m+1]
+
。
[0667]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.76-8.60(m,2h),8.20(br.s,1h),8.01-7.74(m,2h),7.68(t,j＝4.0,1h),7.58-7.46(m,2h),7.30(t,j＝8.0hz,1h),7.24(t,j＝56hz,1h),6.90(s,1h),5.87-5.74(m,1h),4.73-4.52(m,1h),4.42-4.09(m,2h),3.72-3.58(m,1h),3.47-3.36(m,2h),3.25-3.18(m,1h),3.15-3.09(m,2h),2.28(s,3h),2.21-1.75(m,2h),1.60(d,j＝7.2hz,3h).
[0668]
实施例80：化合物80的制备
[0669][0670]
化合物80的合成参考实施例67中化合物67的合成步骤，其中第一步用乙酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物80。
[0671]
ms(esi):500.2[m+1]
+
。
[0672]1h nmr(300mhz,dmso)δ8.14(d,j＝3.7hz,1h),7.77(d,j＝2.3hz,1h),7.65(t,j＝7.5hz,1h),7.48(t,j＝7.2hz,1h),7.27(t,j＝7.7hz,1h),7.22(t,j＝57.0hz,1h),6.88(s,1h),5.86-5.70(m,1h),4.63-4.52(m,1h),4.21-4.17(m,2h),3.95-3.84(m,2h),3.47-3.37(m,2h),3.14-2.98(m,2h),2.26(s,3h),2.08-2.02(m,4h),1.89-1.80(m,1h),1.57(d,j＝7.1hz,3h).
[0673]
实施例81：化合物81的制备
[0674][0675]
化合物81的合成参考实施例66中化合物66的合成步骤，其中第五步用3-氮杂环丁醇代替二甲胺盐酸盐，合成得到化合物81。
[0676]
ms(esi):558.2[m+1]
+
。
[0677]1h nmr(300mhz,dmso)δ8.15(d,j＝7.5hz,1h),7.79(s,1h),7.65(t,j＝7.4hz,1h),7.48(t,j＝7.2hz,1h),7.28(t,j＝7.5hz,1h),7.23(t,j＝54.3hz,1h),6.88(s,1h),5.86-5.71(m,1h),5.39-5.27(m,1h),4.78(t,j＝6.7hz,2h),4.64-4.45(m,3h),4.25-4.14(m,1h),4.07-3.67(m,1h),3.26-3.14(m,4h),3.10-3.04(m,2h),2.26(s,3h),2.18-2.01(m,1h),1.94-1.82(m,1h),1.58(d,j＝7.0hz,3h).
[0678]
实施例82：化合物82的制备
[0679][0680]
化合物82的合成参考实施例75中化合物75的合成步骤，其中第一步用3-碘氧杂环丁烷代替甲磺酸四氢呋喃-3-基酯，合成得到化合物82。
[0681]
ms(esi):514.2[m+1]
+
。
[0682]1h nmr(300mhz,dmso)δ8.15(d,j＝7.2hz,1h),7.81(s,1h),7.66(t,j＝7.3hz,1h),7.48(t,j＝6.9hz,1h),7.29(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.4hz,1h),6.85(s,1h),5.87-5.70(m,1h),4.72-4.53(m,3h),4.47(t,j＝5.3hz,2h),4.21-4.09(m,1h),3.56-3.45(m,1h),3.29-3.22(m,1h),3.17-3.08(m,1h),3.05-2.95(m,1h),2.82-2.69(m,1h),2.62-2.51(m,1h),2.25(s,3h),2.25-2.20(m,3h),1.83(d,j＝15.8hz,1h),1.58(d,j＝6.9hz,3h).
[0683]
实施例83：化合物83的制备
[0684][0685]
合成路线：
[0686][0687]
制备方法：
[0688]
第一步：合成化合物83
[0689]
将化合物66d的粗品盐酸盐(0.24g，0.5mmol)加入到异丙醇(5ml)中，然后分别加入5-碘-1-甲基-吡唑(208mg，1.0mmol)，乙二醇(0.33g,1.0mmol)，cul(50mg,0.25mmol mmol)和无水磷酸钾(633mg,3.0mmol)。将反应混合物在氮气保护下，于密封管中加热到100℃反应16小时。tlc显示完成后，将反应混合物通过硅藻土过滤，用etoac(100ml)洗涤并将滤液真空浓缩。得到的残余物用hplc制备纯化(waters sunfire obd 100x30mm,5μm，流动相a∶0.1％tfa in water，流动相b∶乙腈，梯度∶10％乙腈运行1min，52％-52％乙腈运行至10min，95％乙腈运行至14min，10％乙腈运行至16min结束)，得到化合物83(56mg,白色固体，产率21.0％)。
[0690]
ms(esi):538.2[m+1]
+
。
[0691]1h nmr(300mhz,dmso)δ8.18(d,j＝7.2hz,1h),7.87(s,1h),7.67(t,j＝7.2hz,1h),7.47(d,j＝6.6hz,1h),7.34
–
7.25(m,2h),7.23(t,j＝54hz,1h),6.88(s,1h),5.94(d,j＝1.8hz,1h),5.83
–
5.73(m,1h),4.68(t,j＝11.1hz,1h),4.24
–
4.16(m,1h),3.68(s,3h),3.59
–
3.48(m,1h),3.27
–
3.13(m,3h),3.04
–
2.78(m,3h),2.26(s,3h),2.22
–
2.06(m,1h),1.99
–
1.88(m,1h),1.59(d,j＝7.2hz,3h).
[0692]
实施例84：化合物84的制备
[0693][0694]
化合物84的合成参考实施例66中化合物66的合成步骤，其中第五步用氨气代替二甲胺盐酸盐，合成得到化合物84。
[0695]
ms(esi):501.2[m+1]
+
。
[0696]1h nmr(300mhz,dmso)δ8.16(d,j＝7.2hz,1h),7.77(s,1h),7.65(t,j＝7.2hz,1h),7.48(t,j＝6.9hz,1h),7.28(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝52.0hz,1h),6.86(s,1h),6.09(s,2h),5.80-5.75(m,1h),4.60(t,j＝10.5hz,1h),4.19(d,j＝10.9hz,1h),3.90(d,j＝12.9hz,1h),3.66(s,1h),3.28-3.05(m,4h),3.02-2.91(m,1h),2.25(s,3h),2.09(s,1h),1.80(d,j＝15.5hz,1h),1.58(d,j＝7.0hz,3h).
[0697]
实施例85：化合物85的制备
[0698][0699]
化合物85的合成参考实施例67中化合物67的合成步骤，其中第一步用1-甲基吡唑-5-甲酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物85。
[0700]
ms(esi):566.2[m+1]
+
。
[0701]1h nmr(300mhz,dmso)δ8.17(s,1h),7.79(s,1h),7.65(t,j＝7.2hz,1h),7.55-7.44(m,2h),7.28(t,j＝8.0hz,1h),7.22(t,j＝52hz,2h),6.88(s,1h),6.59-6.44(m,1h),5.85-5.71(m,1h),4.60(t,j＝10.8hz,1h),4.41-4.05(m,2h),3.87(s,3h),3.83-3.68(m,1h),3.50-3.40(m,1h),3.31-3.23(m,2h),3.18-3.09(m,2h),2.26(s,3h),2.10-1.93(m,1h),1.88-1.72(m,1h),1.58(d,j＝7.2hz,3h).
[0702]
实施例86：化合物86的制备
[0703][0704]
化合物86的合成参考实施例75中化合物75的合成步骤，其中第一步用1-溴丙烷代替甲磺酸四氢呋喃-3-基酯，合成得到化合物86。
[0705]
ms(esi):500.2[m+1]
+
。
[0706]1h nmr(300mhz,dmso)δ8.12(d,j＝6.8hz,1h),7.80(s,1h),7.66(t,j＝7.6hz,1h),7.55-7.43(m,1h),7.34-7.25(m,1h),7.23(t,j＝54.5hz,1h),6.84(s,1h),5.89-5.68(m,1h),4.65(t,j＝10.3hz,1h),4.16(d,j＝10.0hz,1h),3.31-3.24(m,1h),3.14-3.01(m,1h),2.96-2.80(m,2h),2.78-2.56(m,2h),2.44-2.30(m,2h),2.25(s,3h),2.16-1.97(m,1h),1.83(d,j＝15.1hz,1h),1.58(d,j＝6.8hz,3h),1.02(s,6h).
[0707]
实施例87：化合物87的制备
[0708][0709]
化合物87的合成参考实施例75中化合物75的合成步骤，其中第一步用3-(溴甲基)氧杂环丁烷代替甲磺酸四氢呋喃-3-基酯，合成得到化合物87。
[0710]
ms(esi):528.2[m+1]
+
。
[0711]1h nmr(300mhz,dmso)δ8.11(d,j＝7.5hz,1h),7.80(s,1h),7.65(t,j＝7.5hz,1h),7.48(t,j＝6.8hz,1h),7.27(t,j＝7.7hz,1h),7.23(t,j＝54.0hz,1h),6.83(s,1h),5.81-5.72(m,1h),4.67-4.59(m,3h),4.31-4.26(m,2h),4.18-4.11(m,1h),3.31-3.17(m,2h),3.03(d,j＝11.4hz,1h),2.96-2.89(m,1h),2.81(d,j＝11.1hz,1h),2.69(d,j＝7.5hz,2h),2.59(d,j＝9.6hz,1h),2.28-2.23(m,4h),2.22-2.01(m,2h),1.79(d,j＝16.0hz,1h),1.57(d,j＝7.0hz,3h).
[0712]
实施例88：化合物88的制备
[0713][0714]
化合物88的合成参考实施例67中化合物67的合成步骤，其中第一步用特戊酸代替3-氧杂环丁烷羧酸，合成得到化合物88。
[0715]
ms(esi):542.2[m+1]
+
。
[0716]1h nmr(300mhz,dmso)δ8.17(d,j＝7.6hz,1h),7.76(s,1h),7.64(t,j＝7.6hz,1h),7.48(t,j＝6.8hz,1h),7.27(t,j＝8.8hz,1h),7.22(t,j＝56hz,2h),6.87(s,1h),5.82-5.70(m,1h),4.63(t,j＝10.4hz,1h),4.28-4.14(m,2h),4.00(d,j＝12.4hz,1h),3.34-3.25(m,3h),3.03-2.95(m,2h),2.25(s,3h),2.18-2.05(m,1h),1.92(d,j＝14.8hz,1h),1.58(d,j＝7.2hz,3h),1.23(s,9h).
[0717]
实施例89：化合物89的制备
[0718][0719]
化合物89的合成参考实施例75中化合物75的合成步骤，其中第一步用2-溴-1,1,1-三氟乙烷代替甲磺酸四氢呋喃-3-基酯，合成得到化合物89。
[0720]
ms(esi):540.2[m+1]
+
。
[0721]1h nmr(300mhz,dmso)δ8.12(d,j＝7.2hz,1h),7.83(s,1h),7.65(t,j＝7.2hz,1h),7.48(t,j＝6.6hz,1h),7.28(t,j＝7.5hz,1h),7.23(t,j＝54hz,1h),6.85(s,1h),5.84
–
5.72(m,1h),4.62(t,j＝10.8hz,1h),4.17(d,j＝10.5hz,1h),3.48-3.35(m,1h),3.30
–
3.20(m,2h),3.13
–
2.92(m,3h),2.78(d,j＝11.1hz,1h),2.65(t,j＝10.2hz,1h),2.57(d,j＝10.5hz,1h),2.25(s,3h),2.16
–
1.99(m,1h),1.81(d,j＝15.6hz,1h),1.58(d,j＝6.9hz,3h).
[0722]
实施例90：化合物90的制备
[0723][0724]
化合物90的合成参考实施例75中化合物75的合成步骤，其中第一步用溴乙腈代替甲磺酸四氢呋喃-3-基酯，合成得到化合物90。
[0725]
ms(esi):497.2[m+1]
+
。
[0726]1h nmr(300mhz,dmso)δ8.15(d,j＝7.5hz,1h),7.81(s,1h),7.66(t,j＝7.2hz,1h),7.48(t,j＝6.9hz,1h),7.28(t,j＝7.8hz,1h),7.23(t,j＝54hz,1h),6.87(s,1h),5.83-5.71(m,1h),4.57(t,j＝11.1hz,1h),4.19(d,j＝11.1hz,1h),3.92
–
3.76(m,2h),3.38(d,j＝9.6hz,1h),3.19(d,j＝11.1hz,1h),3.09-3.01(m,1h),2.90(d,j＝10.8hz,1h),2.68(d,j＝9.9hz,1h),2.56-2.50(m,1h),2.40(t,j＝9.9hz,1h),2.25(s,3h),2.15-[0727]
2.02(m,1h),1.87(d,j＝14.7hz,1h),1.58(d,j＝7.2hz,3h).
[0728]
实施例91：化合物91的制备
[0729][0730]
化合物91的合成参考实施例44中化合物44的合成步骤，其中第六步用乙酸代替环丙烷甲酸，第八步用(1r)-1-(3-(二氟(四氢呋喃-2-基)甲基)苯基)乙-1-胺代替(r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺，合成得到化合物91。
[0731]
ms(esi):552.2[m+1]
+
。
[0732]1h nmr(300mhz,dmso)δ8.14-8.06(m,1h),7.76-7.70(m,1h),7.63-7.52(m,2h),7.42(t,j＝7.6hz,1h),7.34(d,j＝7.9hz,1h),6.87(s,1h),5.67-5.52(m,1h),4.64-4.49(m,1h),4.44-4.27(m,1h),4.25-4.11(m,2h),3.98-3.79(m,1h),3.75-3.55(m,4h),3.21-3.11(m,3h),3.07-2.94(m,2h),2.29(d,j＝4.6hz,3h),2.14-2.00(m,4h),1.95-1.67(m,4h),1.63-1.44(m,4h).
[0733]
实施例92：化合物92的制备
[0734][0735]
化合物92的合成参考实施例44中化合物44的合成步骤，其中第八步用(r)-1-(3-(1-氨基乙基)-2-氟苯基)-1，1-二氟-2-甲基丙-2-醇代替(r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺，合成得到化合物92。
[0736]
ms(esi):584.2[m+1]
+
。
[0737]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.12(d,j＝7.3hz,1h),7.78(s,1h),7.57(t,j＝6.6hz,1h),7.28(t,j＝6.6hz,1h),7.19(t,j＝7.7hz,1h),6.87(s,1h),5.82
–
5.71(m,1h),5.30(s,1h),4.60(t,j＝10.2hz,1h),4.26
–
4.14(m,2h),4.06
–
3.96(m,1h),3.66
–
3.47(m,1h),3.27
–
2.99(m,4h),2.24(s,3h),2.16
–
1.99(m,2h),1.97
–
1.82(m,1h),1.55(d,j＝7.0hz,3h),1.20(d,j＝12.3hz,6h),0.81
–
0.68(m,4h).
[0738]
实施例93：化合物93的制备
[0739][0740]
化合物93的合成参考实施例70中化合物70的合成步骤，用(r)-1-(3-(1-氨基乙基)-2-氟苯基)-1，1-二氟-2-甲基丙-2-醇代替(r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺，合成得到化合物93。
[0741]
ms(esi):609.2[m+1]
+
。
[0742]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.15(d,j＝5.5hz,1h),7.79(s,1h),7.57(t,j＝6.6hz,1h),7.28(t,j＝6.6hz,1h),7.19(t,j＝7.7hz,1h),6.89(s,1h),5.82
–
5.74(m,1h),5.30(s,1h),4.60(t,j＝10.6hz,1h),4.26
–
4.14(m,2h),4.06
–
3.96(m,1h),3.73
–
3.33(m,4h),3.19
–
3.06(m,1h),2.24(s,3h),2.17
–
2.06(m,1h),1.99
–
1.89(m,1h),1.67
–
1.49(m,7h),1.20(d,j＝12.1hz,6h).
[0743]
实施例94：化合物94的制备
[0744][0745]
化合物94的合成参考实施例89中化合物89的合成步骤，用(r)-1-(3-(1-氨基乙基)-2-氟苯基)-1，1-二氟-2-甲基丙-2-醇代替(r)-1-(3-(二氟甲基)-2-氟苯基)乙烷-1-胺，合成得到化合物94。
[0746]
ms(esi):598.2[m+1]
+
。
[0747]1h nmr(400mhz,dmso)δ8.09(d,j＝7.0hz,1h),7.82(s,1h),7.57(t,j＝6.5hz,1h),7.29(t,j＝6.6hz,1h),7.20(t,j＝7.7hz,1h),6.84(s,1h),5.80
–
5.73(m,1h),5.30(s,1h),4.61(t,j＝10.6hz,1h),4.18
–
4.15(m,1h),3.42
–
3.37(m,1h),3.29
–
3.22(m,2h),3.10
–
3.07(m,1h),3.02
–
2.99(m,2h),2.79
–
2.77(m,1h),2.68
–
2.64(m,1h),2.55(t,j＝10.3hz,1h),2.24(s,3h),2.12
–
2.03(m,1h),1.84
–
1.80(m,1h),1.55(d,j＝7.1hz,3h),1.21(d,j＝12.6hz,6h).
[0748]
实验例1：kras(g12c)和sos1结合实验
[0749]
此测定法可用于检查化合物抑制sos1与kras g12c之间的蛋白-蛋白相互作用的效力。较低的ic
50
值表示作为sos1抑制剂的化合物在以下测定设置中的高效力。
[0750]
1.实验材料：
[0751]
kras(g12c)蛋白由普健生物科技有限公司合成；
[0752]
sos1蛋白交换人源重组域蛋白(564-1049)购自cytoskeleton；
[0753]
抗带6组氨酸标签标记的xl665单抗(mab anti 6his-xl665)、抗带谷胱甘肽巯基转移酶标签标记铕穴状化合物单抗(mab anti gst-eu cryptate)购自cisbio。
[0754]
2.实验方法：
[0755]
1x缓冲液配制(现配现用)：hepes:5mm；nacl:150mm；edta:10mm；igepal:0.0025％；kf:100mm；dtt:1mm；bsa:005％。
[0756]
将待测化合物用排枪进行3倍稀释至第8个浓度，即从100μm稀释至45.7nm。
[0757]
用1x缓冲液将待测化合物各梯度稀释成dmso为2％的工作液，5μl/孔加到对应孔中，设置双复孔实验。1000rpm条件下，离心1min。
[0758]
用1x缓冲液配制kras(g12c)(200nm)和mab anti gst-eu cryptate(1ng/μl)的混合工作液，将该混合工作液放置25℃中孵育5min，2.5μl/孔加入到对应孔。
[0759]
用1x缓冲液配制sos1(80nm)和mab anti 6his-xl665(8g/μl)的混合工作液，2.5μl/孔加入到对应孔中，blank孔中加入2.5μl mab anti 6his-xl665(8g/μl)稀释液，此时化合物终浓度梯度为1μm稀释至0.457nm，kras(g12c)(500nm)，mab anti gst-eu cryptate(0.25ng/μl)，sos1(20nm)，mab anti 6his-xl665(2g/μl)，反应体系置于25℃反应60min。反应结束后，采用多标记分析仪读取htrf。
[0760]
max孔:1％dmso，kras(g12c)(500nm)，mab anti gst-eu cryptate(0.25ng/μl)，sos1(20nm)，mab anti 6his-xl665(2g/μl)
[0761]
min孔：1％dmso，kras(g12c)(500nm)，mab anti gst-eu cryptate(0.25ng/μl)，mab anti 6his-xl665(2g/μl)
[0762]
3.数据分析：
[0763]
利用方程式(样品-min)/(max-min)
×
100％，将原始数据换算成抑制率，ic
50
值即可通过四参数进行曲线拟合得出(graphpad prism中log(inhibitor)vs.response
‑‑
variable slope模式得出)。
[0764]
其中本发明制备得到的化合物1以及本领域常用的kras-sos1抑制剂bi-3406对于kras(g12c)与sos1结合的抑制活性如表1所示，其中+代表》1um,++代表100nm-1um,+++代表10nm-100nm,++++代表《10nm,nd代表未测试。
[0765]
表1.本发明的化合物对kras(g12c)和sos1结合抑制的ic
50
数据
[0766][0767]
[0768]
由表1可知，本发明的化合物，对sos1具有较好的抑制作用，针对kras(g12c)和sos1的结合具有明显抑制效果，部分化合物的抑制作用小于10nm,具有很好的临床应用前景。
[0769]
实验例2：p-erk实验
[0770]
实验材料：
[0771]
dld-1细胞购自武汉普诺赛生命科技有限公司；1640培养基购自biological industries；胎牛血清购自biosera；advanced phospho-erk1/2(thr202/tyr204)kit购自cisbio。
[0772]
实验方法：
[0773]
dld-1细胞种于透明96孔细胞培养板中，80μl细胞悬液每孔，每孔包含8000个dld-1细胞，细胞板放入二氧化碳培养箱，37度过夜孵育；
[0774]
将待测化合物用100％dmso稀释到2mm作为第一个浓度，然后再用移液器进行5倍稀释至第8个浓度，即从2mm稀释至0.026μm。取2μl化合物加入78μl细胞饥饿培养基，混匀后，取20μl化合物溶液加入到对应细胞板孔中，细胞板放回二氧化碳培养箱继续孵育1小时，此时化合物浓度为10μm至0.128nm，dmso浓度为0.5％；
[0775]
结束孵育后，弃掉细胞上清加入50μl细胞裂解液每孔，室温摇晃孵育30分钟；
[0776]
使用detection buffer将phospho-erk1/2eu cryptate antibody和phospho-erk1/2d2antibody稀释20倍；
[0777]
取16μl细胞裂解物上清每孔到新的384白色微孔板中，再加入2μl phospho-erk1/2eu cryptate antibody稀释液和2μl phospho-erk1/2d2 antibody稀释液，常温孵育4小时；
[0778]
孵育结束后使用多标记分析仪读取htrf excitation:320nm,emission:615nm，665nm。
[0779]
数据分析：
[0780]
利用方程式(sample-min)/(max-min)*100％将原始数据换算成抑制率，ic50的值即可通过四参数进行曲线拟合得出(graphpad prism中log(inhibitor)vs.response
‑‑
variable slope模式得出)。其中本发明制备得到的化合物1以及本领域常用的kras-sos1抑制剂bi-3406对dld-1细胞磷酸化的抑制活性如表2所示。
[0781]
表2.本发明的化合物对dld-1细胞磷酸化抑制活性测试结果ic
50
数据
[0782]
[0783][0784]
由表2可知，本发明的化合物，多个化合物大幅度优于阳性对照bi-3406，对dld-1细胞的磷酸化具有极其优秀的抑制作用，具有很好的临床应用前景。
[0785]
实验例3：体内药效学实验二
[0786]
1.实验目的
[0787]
评价受试化合物在人胰腺癌mia-paca2细胞皮下异体移植肿瘤模型上的体内药效。
[0788]
2.实验动物
[0789]
balb/裸小鼠，雌性，6-8周龄，体重18-22克，由北京维通利华科技股份有限公司提供。
[0790]
3.实验方法
[0791]
将mia-paca2肿瘤细胞重悬于pbs中，制备成密度为1
×
107个/ml的细胞悬液，皮下接种0.2ml细胞悬液于每只小鼠的右后背(加入基质胶，体积比为1：1)，等待肿瘤生长。在肿瘤平均体积达到约150mm3时，开始进行随机分组给药。给药后，每周两次用游标卡尺测量肿瘤直径，肿瘤体积的计算公式如下：
[0792]
v＝0.5a
×
b2，其中a和b分别表示肿瘤的长径和短径。
[0793]
化合物的抑瘤疗效用tgi(％)评价，tgi(％)反映了肿瘤生长抑制率，其计算如下：
[0794]
tgi(％)＝[(1-(某处理组给药结束时平均瘤体积-该处理组开始给药时平均瘤体积)/(溶剂对照组治疗结束时平均瘤体积-溶剂对照组开始治疗时平均瘤体积)]
×
100％。
[0795]
4.实验结果
[0796]
相关结果如表9所示。
[0797]
表9.体内药效实验结果
[0798][0799]
5.实验结论
[0800]
开始给药22天后，在同等剂量下，本发明中的化合物与阳性对照物bi-3406相比，具有更加显著的肿瘤抑制效果，tgi最高能达到80％，表明本发明中的化合物在人胰腺癌mia-paca2皮下异体移植肿瘤模型上展示出良好的体内药效。
[0801]
尽管上面已经示出和描述了本发明的实施例，可以理解的是，上述实施例是示例性的，不能理解为对本发明的限制。在不脱离本发明的原理和宗旨的情况下，本领域的普通技术人员在本发明的范围内可以对上述实施例进行变化、修改、替换和变型，这些变化、修改、替换和变型均涵盖在本发明的范围之中。