本发明属于天牛防治技术领域，具体涉及一种树木天牛生物防治方法。
背景技术：
多斑白条天牛(batocerahorsfieldihope)主要危害泡桐、苹果、梨、白腊、榆、核桃等多种树木，但在城市绿化树中是危害白腊树的重要蛀干害虫。由于白腊树对二氧化硫、氯气、氯化氢及烟尘等污染物有较强吸附能力及抗性，是我国重要的园林绿化树种之一。近年来多斑白条天牛的危害与发生越来越严重，在不少地方泛滥成灾，造成大量死亡或生长不良频临死亡，给生态坏境与城市绿化造成巨大损失，已成为城市林业、园林绿化、生态城市建设发展的重大害虫。
目前对于天牛类蛀干害虫的防治研究较多的是化学防治，化学防治是目前生产上应用较为广泛和直接的防治方法。主要包括：在幼虫期排粪孔处插挥发性较强的磷化锌、磷化铝毒签、敌敌畏乳油等以减少幼虫对树干的蛀食，在成虫羽化出孔期树冠喷药毒杀成虫；卵期药剂涂干等。但天牛由于生活史较长，其卵、幼虫和蛹都生活在树干内，个体分散，营独居生活，很少受到外界不良条件影响，所以防治效果不很理想。同时，白腊树一般用作园林或城市绿化树种，大量化学农药的使用无疑会给生态及人居环境造成污染而且缺乏可持续性，与人们栽培白腊树改善环境的目的是相悖的。因此，在实际应用中应该尽量避免化学制剂尤其是具有挥发性药剂的施用。为寻求有效的防治方法，以生物措施为主的综合防治多斑白条天牛是今后重点发展的方向。
技术实现要素：
为了解决上述问题，本发明提供了一种树木天牛生物防治方法，主要采用生物源的白僵菌孢子液，避免使用磷化锌、磷化铝等毒性化学杀虫剂的应用，减少环境污染，保护生态环境。
本发明的目的是提供一种树木天牛生物防治方法，包括以下步骤：
s1，确定天牛在树木上的生长状态：所述生长状态包括幼虫期、蛹期和成虫羽化出孔期；
s2，在幼虫期施用天牛幼虫防治剂，在蛹期施用天牛蛹期防治剂，在成虫羽化出孔期施用天牛成虫防治剂，完成对树木天牛的防治；
所述天牛幼虫防治剂由以下重量份的组分制成：白僵菌孢子液60-80份、川楝皮浸汁10-20份、无水乙醇1-2份、乳化剂0.5-1份；
所述天牛蛹期防治剂由以下重量份的组分制成：白僵菌孢子液40-60份、福寿草浸汁10-20份、无水乙醇1-2份；
所述天牛成虫防治剂由以下重量份的组分制成：白僵菌孢子液100-150份、体积分数5％的双氧水3-5份、无水乙醇5-10份、福寿草浸汁10-20份；
其中，所述川楝皮浸汁是取川楝树皮和根皮，加入水、氯化钠、体积分数60-70％的硫酸溶液，煮沸30min，过滤，取其滤液，加水定容后得到的；
所述福寿草浸汁是取新鲜福寿草茎和叶，捣碎，加入氯化钠，研磨成浆，然后加入水浸泡，过滤，取其汁液，加水定容后得到的；
所述白僵菌孢子液是将白僵菌菌种活化后，经包含鱼粉、豆粕和淀粉的发酵基质发酵后，再用乙酸乙酯溶液洗脱、静置，收集上层液体得到的。
优选的，上述树木天牛生物防治方法中，所述乳化剂为吐温20、甘油或者司盘80中的一种。
优选的，上述树木天牛生物防治方法中，1l川楝皮浸汁是取川楝树皮和根皮200g，加入500ml水、5g氯化钠、1ml体积分数60-70％的硫酸溶液，煮沸30min，过滤，取其滤液，加水补足1l得到的。
优选的，上述树木天牛生物防治方法中，1l福寿草浸汁是取新鲜福寿草茎和叶200g，捣碎，加入1g氯化钠，研磨成浆，然后加入500ml水，浸泡1-1.5h，过滤，取其汁液，加入补足1l得到的。
优选的，上述树木天牛生物防治方法中，所述白僵菌孢子液按以下方法制备：
(1)活化白僵菌菌种，并制备白僵菌种子液；
(2)将鱼粉、豆粕和淀粉按照1:2:0.1的质量比例混合均匀得到混合物料，然后加水至混合物料的水分含量为40-60％，得到发酵基质；
(3)向发酵基质中接种白僵菌种子液，其中每千克发酵基质接种白僵菌种子液100-200ml，然后于25-28℃条件下，发酵培养12-15d，用体积分数1％的乙酸乙酯溶液洗脱，静置10-15min，收集上层液体，得到白僵菌孢子液。
与现有技术相比，本发明的树木天牛生物防治方法具有以下有益效果：
(1)选用的白僵菌的分生孢子落在昆虫体上，在合适温度、湿度条件下，可发芽进入昆虫体内，起到杀虫作用，并且其选择性较强，对人畜并无伤害，属于安全性很高的生物杀虫源，在天牛生长不同阶段使用不同配方的防治剂，针对性强。天牛幼虫期将白僵菌孢子液与川楝皮浸汁、无水乙醇配合使用，天牛幼虫的杀死率可达97％以上；蛹期将白僵菌孢子液、福寿草浸汁与无水乙醇配合使用，天牛蛹的杀死率可达100％以上；成虫羽化出孔期将白僵菌孢子液、双氧水、无水乙醇与福寿草浸汁配合使用，天牛成虫的杀死率可达98％以上，有效防治天牛数量，避免使用磷化锌、磷化铝等毒性化学杀虫剂的应用，减少环境污染，保护生态环境。
并且，首次将天牛幼虫防治剂、天牛蛹期防治剂和天牛成虫防治剂用于天牛的防治，尤其适用于多斑白条天牛。
(2)以吐温20、甘油或者司盘80为乳化剂，在保证各物质充分分散、不妨碍防治剂良好流动性的同时，增加各时期防治剂与树木黏附作用；制备方法中，白僵菌发酵时选用的培养基原料鱼粉、豆粕和淀粉成本低，且做到了农业副产物的二次利用。
具体实施方式
下面对发明的具体实施方式进行详细描述，但应当理解本发明的保护范围并不受具体实施方式的限制。下列实施例中未注明具体条件的试验方法，通常按照常规条件，或者按照各制造商所建议的条件。
当实施例给出数值范围时，应理解，除非本发明另有说明，每个数值范围的两个端点以及两个端点之间任何一个数值均可选用。除非另外定义，本发明中使用的所有技术和科学术语与本技术领域技术人员通常理解的意义相同。
下述实施例中使用的白僵菌是白僵菌(beauveriafelina)as-70(保藏号cgmccno.6643)，购自中国普通微生物菌种保藏管理中心，其中，白僵菌as-70与授权公告号为103045488b、名称为《一种白僵菌as-70菌株及其应用》记载的白僵菌as-70为相同菌株；鱼粉、豆粕、淀粉等材料为市售。
实施例1
一种树木天牛生物防治方法，包括以下步骤：
s1，确定天牛在树木上的生长状态：所述生长状态包括幼虫期、蛹期和成虫羽化出孔期；
通过排粪孔记录幼虫数量，很多天牛幼虫在蛀食过程中不断将粪便通过排粪孔排出树干外，通过排粪孔的数量在一定程度上能够反映受害木的虫口数量。
蛹期的判断采用现有技术中割树皮等方法均可以。
成虫羽化出孔期可以通过观察羽化孔数量判断。
s2，在幼虫期施用天牛幼虫防治剂，在蛹期施用天牛蛹期防治剂，在成虫羽化出孔期施用天牛成虫防治剂，完成对树木天牛的防治；
所述天牛幼虫防治剂由以下重量份的组分制成：白僵菌孢子液70份、川楝皮浸汁15份、无水乙醇1份、乳化剂0.7份；所述乳化剂为吐温20；所述天牛幼虫防治剂制备时，按配方称取各组分，并将川楝皮浸汁、无水乙醇、乳化剂充分混匀，加入相当于川楝皮浸汁、无水乙醇、乳化剂总重量1％的防腐剂山梨酸0-4℃保藏，向白僵菌孢子液中加入相当于白僵菌孢子液1％的防腐剂山梨酸0-4℃保藏，使用时川楝皮浸汁、无水乙醇、乳化剂的混合液与白僵菌孢子液按配方的重量份数(不计算两种溶液中山梨酸的重量)混匀即可。
所述天牛蛹期防治剂由以下重量份的组分制成：白僵菌孢子液50份、福寿草浸汁15份、无水乙醇1.5份；
其中1l福寿草浸汁是取新鲜福寿草茎和叶200g，捣碎，加入1g氯化钠，研磨成浆，然后加入500ml水，浸泡1h，过滤，取其汁液，加入补足1l得到的；所述天牛蛹期防治剂制备时，按配方称取各组分，并将福寿草浸汁、无水乙醇充分混匀，加入相当于福寿草浸汁、无水乙醇总重量1％的防腐剂山梨酸0-4℃保藏，向白僵菌孢子液中加入相当于白僵菌孢子液1％的防腐剂山梨酸0-4℃保藏，使用时福寿草浸汁、无水乙醇的混合液与白僵菌孢子液按配方的重量份数(不计算两种溶液中山梨酸的重量)混匀即可。
所述天牛成虫防治剂由以下重量份的组分制成：白僵菌孢子液120份、体积分数5％的双氧水4份、无水乙醇6份、福寿草浸汁15份；所述天牛成虫防治剂制备时，按配方称取各组分，并将体积分数5％的双氧水、无水乙醇、福寿草浸汁充分混匀，加入相当于体积分数5％的双氧水、无水乙醇、福寿草浸汁总重量1％的防腐剂山梨酸0-4℃保藏，向白僵菌孢子液中加入相当于白僵菌孢子液1％的防腐剂山梨酸0-4℃保藏，使用时体积分数5％的双氧水、无水乙醇、福寿草浸汁的混合液与白僵菌孢子液按配方的重量份数(不计算两种溶液中山梨酸的重量)混匀即可。
其中，1l川楝皮浸汁是取川楝树皮和根皮200g，加入500ml水、5g氯化钠、1ml体积分数65％的硫酸溶液，煮沸30min，过滤，取其滤液，加水补足1l得到的。
其中，所述白僵菌孢子液按以下方法制备：
(1)活化白僵菌菌种，并用sdy+无机盐培养基摇瓶培养，得到白僵菌种子液；其中sdy+无机盐培养基的配方为：葡萄糖8g、蛋白胨2g、酵母浸膏2g、磷酸二氢钠0.2g、硫酸镁0.1g、氯化钾0.1g、蒸馏水200ml，灭菌冷却后加入0.1％硫酸庆大霉素，以防止培养基污染。
(2)将鱼粉、豆粕和淀粉按照1:2:0.1的质量比例混合均匀得到混合物料，然后加水至混合物料的水分含量为40-50％，得到发酵基质；
(3)向发酵基质中接种白僵菌种子液，其中每千克发酵基质接种白僵菌种子液200ml，然后于25-28℃条件下，发酵培养12-15d，用体积分数1％的乙酸乙酯溶液洗脱，静置15min，收集上层液体，得到白僵菌孢子液。
实施例2
一种树木天牛生物防治方法，包括以下步骤：
s1，确定天牛在树木上的生长状态：所述生长状态包括幼虫期、蛹期和成虫羽化出孔期；各时期的判断同实施例1。
s2，在幼虫期施用天牛幼虫防治剂，在蛹期施用天牛蛹期防治剂，在成虫羽化出孔期施用天牛成虫防治剂，完成对树木天牛的防治；
所述天牛幼虫防治剂由以下重量份的组分制成：白僵菌孢子液80份、川楝皮浸汁10份、无水乙醇2份、乳化剂1份；所述乳化剂为甘油；所述天牛幼虫防治剂按实施例1的方法制备和保藏。
所述天牛蛹期防治剂由以下重量份的组分制成：白僵菌孢子液60份、福寿草浸汁10份、无水乙醇1份；
其中1l福寿草浸汁是取新鲜福寿草茎和叶200g，捣碎，加入1g氯化钠，研磨成浆，然后加入500ml水，浸泡1.2-1.5h，过滤，取其汁液，加入补足1l得到的；所述天牛蛹期防治剂按实施例1的方法制备和保藏。
所述天牛成虫防治剂由以下重量份的组分制成：白僵菌孢子液150份、体积分数5％的双氧水3份、无水乙醇10份、福寿草浸汁10份；所述天牛成虫防治剂按实施例1的方法制备和保藏。
其中，1l川楝皮浸汁是取川楝树皮和根皮200g，加入500ml水、5g氯化钠、1ml体积分数70％的硫酸溶液，煮沸30min，过滤，取其滤液，加水补足1l得到的。
其中，所述白僵菌孢子液按以下方法制备：
(1)活化白僵菌菌种，得到白僵菌种子液；白僵菌种子液制备方法同实施例1；
(2)将鱼粉、豆粕和淀粉按照1:2:0.1的质量比例混合均匀得到混合物料，然后加水至混合物料的水分含量为50-60％，得到发酵基质；
(3)向发酵基质中接种白僵菌种子液，其中每千克发酵基质接种白僵菌种子液150ml，然后于25-28℃条件下，发酵培养12-15d，用体积分数1％的乙酸乙酯溶液洗脱，静置10min，收集上层液体，得到白僵菌孢子液。
实施例3
一种树木天牛生物防治方法，包括以下步骤：
s1，确定天牛在树木上的生长状态：所述生长状态包括幼虫期、蛹期和成虫羽化出孔期；各时期的判断同实施例1。
s2，在幼虫期施用天牛幼虫防治剂，在蛹期施用天牛蛹期防治剂，在成虫羽化出孔期施用天牛成虫防治剂，完成对树木天牛的防治；
所述天牛幼虫防治剂由以下重量份的组分制成：白僵菌孢子液60份、川楝皮浸汁20份、无水乙醇1份、乳化剂0.5份；所述乳化剂为司盘80；所述天牛幼虫防治剂按实施例1的方法制备和保藏。
所述天牛蛹期防治剂由以下重量份的组分制成：白僵菌孢子液40份、福寿草浸汁20份、无水乙醇2份；所述天牛蛹期防治剂按实施例1的方法制备和保藏。
所述天牛成虫防治剂由以下重量份的组分制成：白僵菌孢子液100份、体积分数5％的双氧水5份、无水乙醇5份、福寿草浸汁20份；所述天牛成虫防治剂按实施例1的方法制备和保藏。
其中，福寿草浸汁、川楝皮浸汁、白僵菌孢子液的制备方法均同实施例1。
实施例4
一种树木天牛生物防治方法，包括以下步骤：
s1，确定天牛在树木上的生长状态：所述生长状态包括幼虫期、蛹期和成虫羽化出孔期；各时期的判断同实施例1。
s2，在幼虫期施用天牛幼虫防治剂，在蛹期施用天牛蛹期防治剂，在成虫羽化出孔期施用天牛成虫防治剂，完成对树木天牛的防治；
所述天牛幼虫防治剂由以下重量份的组分制成：白僵菌孢子液65份、川楝皮浸汁14份、无水乙醇1.5份、乳化剂0.5份；所述乳化剂为司盘80；所述天牛幼虫防治剂按实施例1的方法制备和保藏。
所述天牛蛹期防治剂由以下重量份的组分制成：白僵菌孢子液55份、福寿草浸汁18份、无水乙醇1.3份；所述天牛蛹期防治剂按实施例1的方法制备和保藏。
所述天牛成虫防治剂由以下重量份的组分制成：白僵菌孢子液135份、体积分数5％的双氧水4.5份、无水乙醇6份、福寿草浸汁16份；所述天牛成虫防治剂按实施例1的方法制备和保藏。
其中，福寿草浸汁、川楝皮浸汁、白僵菌孢子液的制备方法均同实施例2。
需要说明的是，实施例1-4方法中用1％乙酸乙酯溶液洗脱制备白僵菌孢子液时，注意乙酸乙酯溶液用量，以保证白僵菌孢子液中的有效活菌数为107-108孢子/ml。天牛幼虫防治剂、天牛蛹期防治剂、天牛成虫防治剂均稀释200-500倍后使用。幼虫期将天牛幼虫防治剂注射入排粪孔，或者将天牛幼虫防治剂涂抹在棉球上插进排粪孔中或者在树木上涂刷；蛹期将天牛蛹期防治剂在数目上涂刷即可，天牛成虫防治剂采用喷施或者树木注射法，或者在树木上涂刷，成虫侵食树木时，起到良好的防杀效果。
下面我们提供一些数据，以说明本发明天牛防治效果。
一、天牛幼虫防治剂的幼虫杀死率
收集多斑白条天牛幼虫，分别利用实施例1-4的天牛幼虫防治剂稀释200倍，然后对多斑白条天牛幼虫进行防杀，同时，我们以等同质量的磷化锌作为对照组，每组50只，观察记录幼虫存活率，结果表明，经实施例1-4组的天牛幼虫的杀死率可达97％以上，而对照组天牛幼虫的杀死率仅为95％左右，另外，实施例1-4的天牛幼虫防治剂与磷化锌的杀幼虫时间相同，说明本发明的天牛幼虫防治剂可以替代具有较强化学毒性的磷化锌，甚至比磷化锌的防治效果更好，减少环境污染。
二、天牛蛹期防治剂的杀卵效率
收集天牛蛹，分别利用实施例1-4的天牛蛹期防治剂稀释300倍，然后对天牛蛹进行防杀，同时，我们以等同体积的80％敌敌畏乳油作为对照组，观察是否有成虫羽化，结果表明，经实施例1-4组以及对照组均无成虫羽化，天牛蛹杀死率为100％，说明本发明的天牛蛹期防治剂可以替代具有较强化学毒性的敌敌畏乳油，减少环境污染。
三、天牛成虫防治剂的羽化前成虫杀死率
收集多斑白条天牛羽化出孔前成虫，分别利用实施例1-4的天牛成虫防治剂稀释300倍，然后对多斑白条天牛成虫进行防杀，同时，我们以等同质量的56％磷化铝片作为对照组，每组50只，观察记录成虫存活率，结果表明，经实施例1-4组的天牛成虫的杀死率可达98％以上，而对照组天牛幼虫的杀死率仅为96％左右，另外，实施例1-4的天牛成虫防治剂仅比磷化铝的杀成虫时间长了5-8％，杀虫时间相差不大，说明本发明的天牛幼虫防治剂可以替代具有加强化学毒性的磷化铝，甚至比磷化铝的防治效果更好，减少环境污染。
需要说明的是，上述防治结果针对的是无树木阻碍药物作用的实验条件下进行的。
尽管已描述了本发明的优选实施例，但本领域内的技术人员一旦得知了基本创造性概念，则可对这些实施例作出另外的变更和修改。所以，所附权利要求意欲解释为包括优选实施例以及落入本发明范围的所有变更和修改。
显然，本领域的技术人员可以对本发明进行各种改动和变型而不脱离本发明的精神和范围。这样，倘若本发明的这些修改和变型属于本发明权利要求及其等同技术的范围之内，则本发明也意图包含这些改动和变型在内。