生产二十碳五烯酸的微生物、脂肪酸组成物及其制作方法与用图_4

文档序号:9603710阅读:来源:国知局
相 组分、控制释出型组分、溶剂、表面活性剂、保湿剂、缓冲剂、填料、软化剂或其组合物。除了 在此所论及的所述赋形剂之外,还可包括列于但不受限于"雷明顿:药剂学的科学与应用 (Remington:TheScienceandPracticeofPharmacy)" 乙书第 21 版(2005 年)的赋形 剂。在此将一赋形剂纳入一特定类别(如"溶剂")中,意欲说明而非限制赋形剂的角色。 一特定的赋形剂可归属于多个类别。
[0147] 本发明的组成物包括但不限于食用产品、药学组成物、化妆品及工业用组成物。
[0148] 在一些实施例中,该组成物是一种食用产品。一种食用产品是供非人类动物或人 类食用的任一食品,及包括固态与液态组成物。一种食用产品可为动物或人类食品中的一 种添加剂。食品包括但不限于一般食品;液体产品包括乳类、饮料、治疗用饮品及营养饮品; 机能性食品;增补剂;保健食品;婴儿奶粉,包括早产婴儿用奶粉;供怀孕或哺乳妇女用的 食品;成人食品;老人食品;及动物食品。
[0149] 在一些实施例中,本发明的一种微生物、生物质或微生物油可直接使用作为下列 一或多者或包括在其中作为一种添加剂:一种油、酥油、涂酱、其它脂肪成分、饮料、酱料、乳 制或黄豆制食品(诸如乳、酸奶、奶酪与冰淇淋)、一种烘焙物、一种营养品如作为一种营养 增补剂(胶囊或锭剂形式)、一种维生素增补剂、一种膳食增补剂、一种粉状饮品及一种粉 状食用产品的制品或半制品。在一些实施例中,该营养增补剂是一种素食用胶囊形式,及并 非自动物来源的任一组分形成及亦不含有所述组分。
[0150]可包括本发明的一种微生物油的食品组成物的部份清单,包括但不限于黄豆制 产物(乳、冰淇淋、酸奶、饮品、鲜乳油、涂酱、奶精);汤与汤粉;面团、面糊及烘培食品包 括例如精致糕点制品、早餐谷片、蛋糕、奶酪蛋糕、派、杯子蛋糕、饼干、棒、面包、卷、比司克 面包(biscuit)、松糕、糕饼、司康(scone)、脆面包丁、脆饼干、甜点、点心蛋糕、派、果诺力 (granola)/点心棒及烘烤糕饼;糖果;硬质糖果甜点;巧克力与其它糖果甜点;口香糖;液 态食用产品例如乳类、能量饮品、婴儿奶粉、碳酸饮品、茶、液体膳食、果汁、水果制饮品、蔬 菜制饮品;多种维生素糖浆、代用餐、药用食品及糖浆;粉状饮料配料;面食;加工鱼产品; 加工肉产品;加工家禽产品;肉汁酱与酱料;调味料(西红柿酱、美乃滋等);植物油式涂 酱;乳制品;酸奶;奶油;冷冻乳制品;冰淇淋;冷冻甜点;霜冻酸奶;半固态食用产品诸如 婴儿食品;布丁与明胶甜点;加工或未加工的奶酪;松饼配料;食物棒包括能量补给棒;华 夫脆饼(waffle)配料;色拉酱;代用蛋配料;坚果与坚果式涂酱;加盐零食诸如洋芋片与 其它脆片或脆物、玉米片、墨西哥玉米片、挤制零食、爆米花、卷条脆饼、炸马铃薯片及坚果; 及特种零食诸如沾酱、干果零食、肉类零食、猪皮、健康食物棒及米/玉米糕。
[0151] 在一些实施例中,本发明的一种微生物油可用于增补婴儿奶粉。可单独以本 发明的一种微生物油或组合自一种生产二十碳四烯酸(ARA)的微生物例如高山被孢霉 (Mortierellaalpina)或舒马克氏抱霉(Mortierellasect,schmuckeri)所衍生的一种物 理精制油,而增补婴儿奶粉。任选地,能以本发明的一种微生物油组合富含ARA的一种油, 包括ARASC0? (美国马里兰州哥伦比亚的马泰克生物科学(MartekBiosciences)公 司),而增补婴儿奶粉。
[0152] 在一些实施例中,该组成物是一种动物饲料。"动物"是包括属于动物界的非人类 生物体,及包括而不限于水生动物与陆生动物。"动物饲料"或"动物食品" 一词是指预定 供非人类动物用的任一食品,不论是用于鱼类;经济鱼类;观赏鱼类;仔鱼;二枚贝类;软件 动物;甲壳动物;贝介类;虾;虾苗;丰年虾;轮虫;卤虫;滤食性生物;两栖动物;爬虫类动 物;哺乳类动物;家畜;农场动物;动物园动物;运动用动物;种畜;竞赛用动物;表演用动 物;传承用动物;稀有或濒临绝种的动物;同伴动物;宠物诸如狗、猫、天竺鼠、兔、大鼠、小 鼠或马;灵长类动物诸如猴(如卷尾猴、恒河猴、非洲绿猴、赤猴、食蟹猴及草原猴)、猿、红 毛猩猩、狒狒、长臂猿及黑猩猩;犬科动物诸如狗与狼;猫科动物诸如猫、狮及虎;马科动物 诸如马、驴及斑马;供食用的动物诸如母牛、牛、猪与羊;有蹄动物诸如鹿与长颈鹿;或啮齿 动物诸如小鼠、大鼠、仓鼠及天竺鼠等。动物饲料包括但不限于水产养殖用饲料、包括宠物 饲料的家畜饲料、动物园动物饲料、役畜饲料、牲畜饲料及其组合。
[0153] 在一些实施例中,该组成物是其肉或产物供人类食用的任一动物的一种饲料或饲 料增补剂,诸如取其肉、蛋或乳供人类食用的任一动物。当喂食至所述动物时,营养素诸如 LC-PUFA可被纳入所述动物的肉、乳、蛋或其它产物中,以增加所述营养素的含量。
[0154] 在一些实施例中,该组成物是一种喷雾干燥式物质,其可碎裂形成供浮游动物、丰 年虾、轮虫及滤食性生物食用的适合颗粒尺寸。在一些实施例中,喂食该组成物的浮游动 物、丰年虾或轮虫,进而用于喂食仔鱼、鱼、贝介类、二枚贝类或甲壳动物。
[0155] 在一些实施例中,该组成物是一种药学组成物。适宜的药学组成物包括但不限于 一种消炎组成物、用于治疗冠状动脉心脏病的药物、用于治疗动脉硬化的药物、一种化学治 疗剂、一种活性赋形剂、一种骨质疏松症药物、一种抗忧郁药物、一种抗痉挛药物、一种抗幽 门螺旋杆菌(Helicobacterpylori)药物、用于治疗神经退化性疾病的药物、用于治疗肝脏 退化性疾病的药物、一种抗生素、一种降胆固醇组成物及一种降三酸甘油酯组成物。在一 些实施例中,该组成物是一种药用食品。药用食品包括在医师视导下服用或外部投药的组 成物中的食品及预定用于一种病况的膳食管理,而该病况的独特营养需求是以公认的科学 原理为基础及藉由医学评估而建立的。
[0156] 在一些实施例中,可将微生物油配制于一剂型中。该剂型可包括但不限于包含有 效量的微生物油的锭剂、胶囊、扁囊剂、小丸剂、丸剂、散剂及颗粒剂;及非经肠剂型,其包括 但不限于液剂、悬液剂、乳剂及干粉剂。本领域中亦已知所述配方亦可含有药学上可接受的 稀释剂、填料、崩散剂、黏合剂、润滑剂、表面活性剂、疏水性载剂、水溶性载剂、乳化剂、缓冲 液、保湿剂、增湿剂、助溶剂、防腐剂等。投药形式可包括但不限于含有微生物油及一或多种 适宜的药学上可接受的载剂的锭剂、糖衣锭、胶囊、胶囊锭及丸剂。
[0157] 就口服而言,微生物油可与本领域中所熟知的药学上可接受的载剂组合。所述载 剂有助于将本发明的微生物油配制为锭剂、丸剂、糖衣锭、胶囊、液体、凝胶体、糖浆、浆剂、 悬液剂等,以供待治疗的个体口服使用。在一些实施例中,该剂型是锭剂、丸剂或胶囊锭。 可藉由添加一种固态赋形剂而制得供口服使用的药学制剂,选择性地将所产生的混合物研 磨,及在若为所欲的适宜助剂的添加作用后,加工处理颗粒剂的混合物,以制得锭剂或糖衣 锭核心。适宜的赋形剂包括但不限于填料,诸如糖类,其包括但不限于乳糖、蔗糖、甘露糖醇 及山梨糖醇;纤维素制剂诸如但不限于玉米淀粉、小麦淀粉、米淀粉、马铃薯淀粉、明胶、黄 蓍胶、甲基纤维素、羟基丙基甲基纤维素、羧基甲基纤维素钠及聚乙烯吡咯啶酮(PVP)。若为 所欲者,可添加破碎剂,诸如但不限于交联聚乙烯吡咯啶酮、洋菜或褐藻酸或其盐类诸如褐 藻酸钠。可供口服使用的药学制剂,包括但不限于由明胶制成的推合式胶囊以及由明胶与 一种塑化剂诸如甘油或山梨糖醇制成的软式密封胶囊。在一些实施例中,该剂型是一种素 食用剂型,其中该剂型并非自动物来源的任一组分形成及亦不含有所述组分。在一些实施 例中,该素食用剂型是一种素食用胶囊。
[0158] 在一些实施例中,该组成物是一种化妆品。化妆品包括但不限于乳液、乳霜、洗剂、 面膜、肥皂、洗发精、洗涤剂、面霜、润发乳、彩妆、沐浴剂及乳浊液。化妆品用剂可为药用或 非药用。
[0159] 在一些实施例中,该组成物是一种工业用组成物。在一些实施例中,该组成物是用 于一或多种制品中的一种起始原料。一制品包括但不限于一种聚合物;一种摄影感光材 料;一种清洁剂;一种工业用油;或一种工业用清洁剂。例如,第7, 259, 006号美国专利述 及含DHA的脂肪与油在二十二酸的生产作用及使用二十二酸的摄影敏感性材料的生产作 用的用途。
[0160] 使用该组成物的方法
[0161] 在一些实施例中,该组成物可用于治疗人类或非人类动物中的病况。在一些实施 例中,该组成物可供人类或非人类动物的营养之用。
[0162] "治疗"与"治疗作用"等词是指治疗性治疗与预防性或防止性措施,其中的目标是 预防或减缓(减轻)一种非所欲的生理状况、疾病或失调,或获得有益或所欲的临床结果。 就本发明的目的而言,有益的或所欲的临床结果包括但不限于减轻或消除与病况、疾病或 失调相关联的症状或征象;降低病况、疾病或失调的程度;稳定病况、疾病或失调(亦即该 病况、疾病或失调不再恶化);延迟该病况、疾病或失调的初发或恶化;改善该病况、疾病或 失调;缓解该病况、疾病或失调(不论部分或全面及不论可侦测或不可侦测);或增进或改 善病况、疾病或失调。治疗作用包括引发临床上显著的反应,而无过度的副作用。治疗作用 亦包括延长存活,相较于未接受治疗的预期存活时间而言。
[0163] 在一些实施例中,该组成物是用于治疗病况、疾病或失调诸如青春痘、急性发炎、 年龄相关性黄斑部病变、过敏症、阿滋海默氏(Alzheimer)症、关节炎、气喘、动脉粥状硬 化、自体免疫疾病、血脂异常、乳房囊肿、恶病质、癌症、心脏血管再狭窄化、心血管疾病、慢 性发炎、冠状动脉心脏病、囊肿纤维症、肝脏的退化性疾患、糖尿病、湿疹、胃肠疾患、心脏 病、高三酸甘油酯水平、高血压、过动症、免疫疾病、抑制肿瘤生长、发炎性病症、肠胃疾病、 肾功能障碍、白血病、重郁症、多发性硬化症、神经退化性疾病、骨关节炎、骨质疏松症、过氧 化体疾病、子癫前症、早产、牛皮癣、肺部疾病、类风湿性关节炎、心脏病风险或血栓症。
[0164] 在一些实施例中,该组成物是用于增加第三孕期胎儿的妊娠期长度。
[0165] 在一些实施例中,该组成物是用于控制血压。
[0166] 在一些实施例中,该组成物是用于增进或维护认知功能。
[0167] 在一些实施例中,该组成物是用于增进或维护记忆力。
[0168] 该组成物可藉由与该组成物或剂型相容的任一途径或剂型投药至个体的体内。若 物质是由该个体导入个体的体内,或若该物质是由他人、机器或装置导入个体的体内,则该 物质视为"投药"。因此,"投药"包括如自我投药、由他人投药及间接投药作用。如在此参 照"投药作用"所用的"连续的"或"接连的"等词,是指投药频率至少每日一次。然而,应察 知投药频率可高于每日一次及仍为"连续的"或"接连的",如每日二次或甚至三次,只要未 超过在此所指定的剂量水平即可。用于投药的方式与方法是本领域中所知,及技术人员可 参考各种的药理学参考书以寻求导引。例如可查阅美国保健信息(InformaHealthcare)出 版公司的由Banker与Rhodes所著的"现代药剂学(ModernPharmaceutics) "乙书第4版 (2002年);及美国纽约的麦格罗-希尔(McGraw-Hill)有限公司的"古德曼与吉尔曼的治 疗学的药学基础(Goodman&Gilman'sThePharmaceuticalBasisofTherapeutics) " 乙 书第10版(2001年)。
[0169] "个体(subject) "、"个体(individual) "或"病患",是指人类或非人类的任一个 体,而诊断、预后、疗法或组成物的投药作用或剂型等所需保护的。哺乳类动物个体包括但 不限于人类;家畜;农场动物;动物园动物;运动用动物;宠物诸如狗、猫、天竺鼠、兔、大鼠、 小鼠或马;灵长类动物诸如猴(如卷尾猴、恒河猴、非洲绿猴、赤猴、食蟹猴及草原猴)、猿、 红毛猩猩、狒狒、长臂猿及黑猩猩;犬科动物诸如狗与狼;猫科动物诸如猫、狮及虎;马科动 物诸如马、驴及斑马;供食用的动物诸如母牛、牛、猪与羊;有蹄动物诸如鹿与长颈鹿;啮齿 动物诸如小鼠、大鼠、仓鼠及天竺鼠等。个体一词亦涵盖模式动物,如疾病模式动物。在一 些实施例中,个体一词包括在经济上或其它方面有价值的动物,如经济上重要的种畜、竞赛 用动物、展示用动物、传承用动物、稀有或濒临绝种的动物或同伴动物。在特定的实施例中, 该个体是人类个体。在特定的实施例中,该个体是非人类个体。
[0170] 该组成物可依"营养量"、"治疗有效量"、"预防有效量"、"治疗性剂量"或"预防性 剂量"投药。"营养量"是指在所需的剂量与时间长度有效达成所需营养结果的量。营养结 果可为如一个体所需的脂肪酸组分水平的增加。"治疗有效量"或"治疗性剂量"是指在所 需的剂量与时间长度有效达成所需的治疗结果的量。治疗结果可为如减轻症状、延长存活、 改善活动性等。治疗结果不必定为"治愈"。"预防有效量"或"预防性剂量"是指在所需的 剂量与时间长度有效达成所需的预防结果的量。典型地,因预防性剂量在疾病之前或在较 早期阶段用于个体中,预防有效量将低于用于治疗晚期疾病的治疗有效量。
[0171] 可基于待投药至个体的该微生物、生物质或微生物油的EPA或其它脂肪酸组分的 量,而将该组成物的各种剂量、剂型或药学组成物投药至该个体。"每日剂量"、"每日剂量 水平"及"每日给药量"等词,在此是指每日(每24小时期间)投予的EPA或其它脂肪酸组 分的总量。因此,例如,以2毫克的每日剂量将EPA投药至一个体,是指该个体每日领受总 共2毫克的EPA,不论EPA是以一个包含2毫克EPA的单一剂型投药,或任选地以各包含0. 5 毫克EPA的四个剂型(总共为2毫克EPA)投药。在一些实施例中,每日的EPA量是以一个 单一剂型或以二个剂型投药。可单次服用或分多次服用本发明的剂型。例如,若每日服用 四个锭剂,各锭剂包含〇. 5毫克的EPA,则可每日一次服用所有四个锭剂,或每日二次各服 用2个锭剂,或每6小时服用1个锭剂。在一些实施例中,每日剂量是约100毫克至约15 克的EPA。在一些实施例中,每日剂量是约0. 5毫克至约250毫克、约100毫克至约250毫 克、约100毫克至约500毫克、约100毫克至约1克、约1克至约2. 5克、约1克至约5克、 约1克至约10克、约1克至约15克、约5克至约10克、约5克至约15克、约10克至约15 克、约100毫克至约10克、约100毫克至约5克或约100毫克至约2. 5克的EPA、DHA或其 组合物。在一些实施例中,该组成物是每个剂型包含约0. 5毫克至约250毫克、100毫克至 约250毫克、约0. 5毫克至约500毫克、约100毫克至约500毫克、约0. 5毫克至约1克或 约100毫克至约1克的EPA、DHA或其组合物的一种剂型。
[0172] 可使用各种方式,达成本发明的组成物或剂型的投药作用。例如,在一些实施例 中,接连地每日进行投药,或任选地隔日进行投药(每二日一次)。投药作用可在一或多日 进行。
[0173] 组成物与剂型的投药作用可与用于治疗该病况的其它方法组合。例如,本发明的 方法可组合饮食疗法(如低碳水化合物饮食、高蛋白质饮食、高纤维饮食等)、运动疗法、减 重疗法、戒烟疗法或其组合。本发明的方法亦可与治疗该病况的其它药学产物组合使用。本 发明的组成物或剂型可在其它疗法或药学产物之前或之后投药。
[0174] 包含该组成物的套组
[0175] 本发明有关于含有一或多个单位的本发明的组成物的套组或包装。该套组或包 装可包括一种含有本发明的微生物、生物质或微生物油或其组合物的食用产品、药学组成 物、化妆品或工业用组成物单元。该套组或包装亦可包括一种包含本发明的微生物、生物质 或微生物油或其组合物的添加剂,其用于制备一种食品、化妆品、药学组成物或工业用组成 物。
[0176] 在一些实施例中,该套组或包装含有待依据本发明的方法投药的一或多个单位 的一种药学组成物。该套组或包装可含有一剂量单位或超过一剂量单位(亦即多个剂量单 位)。若在该套组或包装中具有多个剂量单位,则可选择性地配置该多个剂量单位以供循序 投药之用。
[0177] 本发明的套组可选择性地包含与该套组的单位或剂型相关的说明。所述说明可为 管理药学产品的制造、使用或销售的政府机关所指定的形式,该通知亦反映该机关核准其 制造、使用或销售以供投药至人类治疗一病况或疾患。该说明可为传递依据本发明的方法 使用该套组中的单位或剂型的相关信息的任一形式。例如,所述说明可为印刷品的形式,或 为一种预录的媒体装置的形式。
[0178] 在检查病患的期间,医学专业人员可判定施用本发明的方法中的一种适于该病 患,或医师可判定藉由施用本发明的方法中的一种可改善病患的状况。在指定任一疗法之 前,医师可就例如与该疗法相关联的各种风险与效益方面辅导病患。可对病患全盘揭露与 该疗法相关联的所有已知与疑似风险。该项辅导能以口头方式以及以书面方式提供。在一 些实施例中,医师可提供病患有关该疗法的文献数据,诸如产品信息、教育材料等。
[0179] 本发明有关于教育消费者有关所述治疗方法的方法,该方法包括在销售点分发该 剂型与消费者信息。在一些实施例中,是在具有药剂师或健康照护提供者的销售点进行分 发。
[0180] "消费者信息"一词可包括但不限于英语本文、非英语本文、视觉图像、图表、电话 录音、网站及与现场消费者服务代表联络的方式。在一些实施例中,消费者信息将提供有关 依据本发明的方法使用所述剂型、适当的使用年龄、适应症、禁忌、适当的剂量、警语、电话 号码或网址的说明。在一些实施例中,该方法进一步包括提供专业信息给相关人员,所述人 员负责回答消费者有关依据本发明方法使用所揭露疗法的问题。"专业信息"一词包括但不 限于有关依据本发明方法投药的疗法的信息,其设计有助于医学专业人员回答消费者的问 题。
[0181] "医学专业人员"包括例如医师、医师助理、护士、执业护理师、药剂师及消费者服 务代表。
[0182] 在整体地说明本发明之后,可藉由参考在此提供的实例而获得进一步的了解。所 述实例仅为了说明的目的,及并非意欲作为限制。
[0183] 实施例1、微生物的分离
[0184] 在低潮期间,自包括沿着北美洲西海岸(加州、俄勒岗州及华盛顿州)及夏威夷的 海湾与潮口的潮间栖息地收集试样。将水、沉积物、活的植物物质及腐败的植物/动物碎肩 置于无菌的50毫升管中。将各试样的一部分以及水涂抹在分离用培养基的固态洋菜平皿 上。分离用培养基包含:500毫升的人工海水、500毫升的蒸馏水、1克的葡萄糖、1克的甘 油、13克的洋菜、1克的麸胺酸盐、0. 5克的酵母提取物、0. 5克酪蛋白水解物、1毫升的维生 素溶液(100晕克/升的硫胺素、〇. 5晕克/升的生物素、0. 5晕克的B12)、1 _升的微量矿物 质溶液(每升含有 6. 0 克FeCl36H20、6. 84 克Η3Β03、0· 86 克MnCl24H20、0. 06 克ZnCl2、0. 026 C〇C126H20、0. 052 克NiS04H20、0. 002 克CuS045H20 及 0· 005 克Na2Mo042H20 的PII金属)及 各500毫克的盘尼西林G与硫酸链霉素。洋菜平皿于20至25°C的黑暗中培养。在2至4 日后,在放大后检视洋菜平皿,以无菌的牙签挑取细胞菌落及再画线接种在新的培养基平 皿上。将细胞重复地画线接种在新的培养基上直至移除受污染的生物体为止。分离的微生 物中的二种保藏在ATCC登录号PTA-10212与PTA-10208。
[0185] 在ATCC登录号PTA-10212所保藏的分离的微生物的分类特征
[0186] 在ATCC登录号PTA-10212所保藏的分离的微生物("PTA-10212")的培养呈现为 白色、湿的涂抹菌落形式,而无可见的分离的孢子囊群。
[0187] 在固态与液态FFM、固态KMV、KMV泥(1%)、KMV肉汁及MH肉汁中培养PTA-10212, 以进一步检视生长特性。观察到PTA-10212在KMV与MH生长快速。如见美国波士顿的琼 斯与巴雷特(JonesandBartlett)出版社的Margulis,L.、Corliss,J.O.、Melkonian,M.、 Chapman,D.J.(编辑)的"原生生物界手册(HandbookofProtoctista)"乙书第388-398 页的PorterD.于1989年的"网黏菌门(PhylumLabyrinthulomycota)"乙文(KMV);Honda 等人于期刊"Mycol.Res."第102期第439-448页乙文(1998年)(ΜΗ);及第5,130, 242号 美国专利(FFM),其中各者在此完整地并入本案以为参考数据。
[0188]PTA-10212在固态FFM培养基生长数日之后、在KMV培养基与ΜΗ肉汁中生长72小 时之后,进行下列观察。孢子囊并未群集在任一培养基之中或之上,及孢子囊非常地小(5 至10微米)。PTA-10212并未展现裂殖壶菌属(Schizochytrium)分裂型所特有的大量的 四分子。在转移至新的固态培养基约24小时之后,出现变形虫状细胞。所述变形虫状细 胞在数日之后消失,及在液态或泥状培养基中不明显。不同于Y〇koyama,R.等人于期刊 "Mycoscience"第48(6)期第329-341页乙文(2007年)所述的当生长于液态培养基时具 有"位于烧瓶底部的小型沙粒"外观的Aurantiochytrium,PTA-10212并不沉降至烧瓶底部 而是悬浮于KMV与MH液态培养基中。孢子囊的稠密度不如裂殖壶菌属(Schizochytrium) 或Oligochytrium典型所具有者,其等亦具有PTA-10212中所缺乏的强健的外质网络。当 大部分的物种在数小时期间藉由较大型孢子囊的分裂而进行小孢子囊或同化细胞的营养 分裂时,PTA-10212形成哑铃状的拉长型同化细胞,其然后形成薄的峡部及当哑铃的终端分 开时被拉断。所产生的细胞似乎是小型同化细胞。未观察到变形虫状细胞直接转形成为哑 铃状的同化细胞。观察到典型的二鞭毛游走孢子游动,但相当地少。PTA-10212并无繁殖 力,其藉由营养分裂而分裂。虽然观察到游走孢子游动,但未观察到直接释出游走孢子。营 养细胞非常小(2微米至5微米)。
[0189] 使用流通技术进一步检视PTA-10212,其中藉由将一小部分的生长于洋菜的生长 菌落悬浮于一滴的半强度海水中而制备载玻片。藉由该技术,观察到初生孢子囊为球状及 直径约10微米。壁非常薄,及当原生质体的均体分裂起始时并未观察到残迹。重复的均体 分裂产生8至16个较小(直径4至5微米)的次生孢子囊。次生孢子囊维持静息达数小 时,然后再度释出一种无定形的原生质体。无定形原生质体藉由收聚与牵引作用分裂,最初 产生典型的哑铃状中间阶段,及最后产生4至8个直径2. 5至2. 8微米的小型球体。后者休 止数分钟至1至2小时,然后改变形状(拉长)及变成二鞭毛的游走孢子,2. 3至2. 5x3. 7 至3. 9微米。游走孢子的数量众多,及当其等休止时可精确测量。游走孢子然后圆满完成 及开始一个新的发育周期。游走孢子比Sicyoidochytriumminutum大及比威瑟氏吾肯氏 壶菌(Ulkeniavisurgensis)小。
[0190] 以其18srRNA基因与已知物种的相似性为基础,进一步分析PTA-10212的
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