本发明属于药物
技术领域：
，主要涉及一种含有姜黄素药物的纳米胶束口服混悬液及凝胶，以及这二者的用途。
背景技术：
：高血脂症是一种常见的疾病，系人体脂代谢失常所致，主要指血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平过高或高密度脂蛋白水平过低。高血脂症早期没有明显的临床症状，它对身体的损害是隐匿性、渐行性的，而且是全身性的。因为高血脂可加速动脉粥样硬化，一旦动脉堵塞，就会引起很多疾病，如心脑血管疾病、肾脏病、肝脏疾病等。心脑血管疾病是中老年人致死的主要原因，是威胁人类健康的头号杀手。据世界卫生组织统计，每年大约有1700万人死于这种慢性疾病，占全球总死亡人数的30％左右。换言之，平均每3个死者中，就有1个是由心血管疾病引起的(蔡如鹏.心血管病危机来临[N].中国新闻周刊，2007，(05)：54～55.)。现代医药学研究表明，影响人体血脂水平的因素主要有遗传因素和环境因素。但遗传因素的影响是有限的，主要受环境因素的影响。影响人体血脂水平的环境因素主要有：(1)高胆固醇、高饱和脂肪酸饮食：研究表明，当人体进食大量的饱和脂肪酸及高胆固醇，会使血液中胆固醇和甘油三酯的含量过高，形成高血脂症。(2)高糖饮食：有研究结果提示，进食食糖量的比例过高，会引起血糖升高，刺激胰岛素分泌增加，出现高胰岛素血症。后者可增加甘油三酯和极低密度前β-脂蛋白合成，引起高血脂症。(3)肥胖：肥胖促进肝脏输出含载脂蛋白B的脂蛋白，使低密度脂蛋白生成增加，更易引起高血脂症。(4)缺乏运动：习惯静坐的人血浆甘油三酯浓度比坚持体育锻炼者要高。大量实验研究表明，降低血脂主要可通过抑制脂类的吸收、合成或促进脂类的分解和排泄，来达到降低血脂的目的(林肖惠，王玉丽，徐为人.治疗高血脂症药物的研究进展[J].心血管病学进展，2008,29(Suppl1):91-96.)。姜黄素(curcumin)是从姜黄属中药姜黄、郁金、莪术等提取的酚性色素有效成分，是姜黄属中药最重要的活性成分之一。传统医学认为，姜黄其根茎具有破淤、行气、消积通经止痛之功效。现代药理学研究表明，姜黄具有降脂、抗炎、抗微生物等多方面的药理作用(于冬青，邓华聪.姜黄素对糖尿病大鼠糖脂代谢及氧化应激的影响[J].重庆医学，2005,34(1):37-39.)，且与经典的降脂药物相比较毒副反应小。现代医学研究表明，姜黄素可下调环氧合酶-2(cyclooxygenase-2，COX-2)、肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor，TNF)和其它炎症细胞因子，具有抗风湿和抗关节炎的作用(郑玉强，邓立普.姜黄素药理作用研究进展[J].辽宁中医药大学学报，2011,13(2):212-214.)。姜黄素通过抑制前列腺素合成、抑制溶酶体酶和琥珀酸脱氢酶活性而产生抗炎活性(SrivastavaAK,KumarV,RoyBK.InsightsfromthemoleculardockingofcurcumintothevirulentfactorsofHelicobacterpylori[J].Bioinformation,2015,11(10):447-457.)。姜黄凝胶对风湿性关节炎所引起的肿胀、疼痛有较显著的药效活性，且呈现一定的剂量依赖性。这一实验结果将为进一步的临床研究提供实验依据(陈志龙，柳萌萌，张芸等.姜黄凝胶抗炎镇痛药效学研究[J].华南国防医学杂志，2016,30(8):492-495.)。姜黄素的主链为不饱和脂肪族及芳香族基团，水溶性差，性质不稳定，体内代谢迅速，生物利用度低，严重制约了其开发与应用。如何改善姜黄素各方面缺点，制备生物利用度高、用药量低的姜黄素制剂，已经成为近年来药学工作者亟待解决的课题。技术实现要素：本发明的目的在于针对以上要解决的技术问题，提供一种药物稳定性好、生物利用度高、用药量低、安全性高的姜黄素制剂。本发明的另一目的是提供该姜黄素制剂的制备方法。本发明的又一目的是提供该姜黄素制剂的用途。本发明的又一目的是提供一种含有该姜黄素制剂的姜黄素纳米胶束凝胶。本发明的又一目的是提供该凝胶的制备方法。本发明的又一目的是提供该凝胶的用途。为了实现以上目的，本发明提供了以下技术方案。一种姜黄素纳米胶束口服混悬液，其包括活性成分姜黄素、壳聚糖纳米胶束药物载体、表面活性剂、助表面活性剂和纯净水。所述姜黄素是中药姜黄的提取物，高纯度姜黄素，含量≥95％(HPLC)，它是姜黄素、去甲氧基姜黄素及双去甲氧基姜黄素三种成分组成的混合物；所述表面活性剂优选为非离子表面活性剂，包括但不限于吐温、司盘、泊洛沙姆、蔗糖脂肪酸酯；所述助表面活性剂优选为短链醇(具有1至5个碳原子)，包括但不限于乙醇、丙二醇、聚乙二醇等；所述药用纯净水应符合《中国药典》2010版(二部)注射用水项下标准。本发明中，壳聚糖纳米胶束药物载体包裹姜黄素，制成水溶性纳米胶束的口服混悬液。优选地，所述姜黄素纳米胶束口服混悬液由以下质量百分比的组分组成：姜黄素0.1-0.5％、壳聚糖纳米胶束药物载体0.5-1％、表面活性剂0.5-1％、助表面活性剂0.5-1％、药用纯净水余量。优选地，所述姜黄素纳米胶束口服混悬液pH值为6.9-7.2；优选pH值为7.0。本发明还提供了所述姜黄素纳米胶束口服混悬液的制备方法，其包括以下步骤：将高纯度姜黄素、壳聚糖纳米胶束药物载体放入研磨罐中，混合后关闭，紧锁在研磨机上，在500rpm条件下研磨1h；打开研磨罐，加入表面活性剂，关闭，相同条件下研磨1h；打开研磨罐，加入助表面活性剂，关闭，相同条件下研磨1h，加入药用纯净水洗涤、微孔滤膜过滤、装瓶，即得。所述姜黄素纳米胶束口服混悬液的理化指标如下：1)纳米胶束粒径及其分布20±7.33nm，分布宽度20-70nm；2)纳米胶束Zeta电位-42±7.613)纳米胶束载药量9.45％4)纳米胶束包封率81.86％本发明还提供了一种姜黄素纳米胶束凝胶，其包括姜黄素纳米胶束口服混悬液、壳聚糖纳米冰片及凝胶剂。所述姜黄素纳米胶束口服混悬液包括姜黄素、壳聚糖纳米胶束药物载体、表面活性剂及助表面活性剂。所述壳聚糖纳米冰片包括壳聚糖纳米胶束药物载体及冰片；所述凝胶剂优选为卡波姆、聚乙烯醇、羧甲基纤维素钠中的一种或多种。优选地，所述姜黄素纳米胶束凝胶由以下质量百分比的组分组成：壳聚糖纳米胶束药物载体0.4-0.5％、冰片2.6-3.5％、凝胶剂0.6-1％、姜黄素纳米胶束口服混悬液余量。优选地，所述姜黄素纳米胶束凝胶pH值为6.9-7.2；优选pH值为7.0。本发明还提供了所述姜黄素纳米胶束凝胶的制备方法，其包括以下步骤：将冰片用少量乙醇溶解，加入壳聚糖纳米胶束药物载体，搅拌混匀，过滤，回收乙醇，70℃真空干燥得壳聚糖纳米冰片。将姜黄素纳米胶束口服混悬液、所述壳聚糖纳米冰片、凝胶剂以800-1500rpm速度搅拌30min，灌装，即得。所述姜黄素纳米胶束凝胶的外观特点及抑菌特性如下：1)纳米胶束凝胶为金黄色半固体状凝胶；2)大肠杆菌5min抑菌率：55.56％3)金黄色葡萄球菌5min抑菌率：92.10％4)白色念珠菌5min抑菌率：53.75％本发明还提供了所述姜黄素纳米胶束口服混悬液在制备用于预防和治疗高血脂症的药物中的用途。本发明还提供了所述姜黄素纳米胶束凝胶在制备抑菌抗炎抗氧化药物中的用途。该药物为外用涂抹，应用于人体表面各种炎症的治疗，如鼻窦炎、牙龈炎、宫颈炎等疾病。本发明的姜黄素纳米胶束口服混悬液和姜黄素纳米胶束凝胶分别具有治疗高血脂症和抑菌抗炎抗氧化作用，药物稳定性好，生物利用度高，用药量少，吸收快，安全性高。本发明的方法摒弃了传统的采用有机合成或酶合成壳聚糖嵌段化合物制备纳米载药材料的方法，以壳聚糖为材料，通过静电吸附、离子交联及聚电解质复合物-表面活性剂自组装方法制备水溶性壳聚糖纳米胶束包裹姜黄素，制成无毒副作用的纳米胶束水溶液，进而在此基础上加入采用壳聚糖纳米胶束药物载体包裹的冰片及卡波姆等辅助材料，制成姜黄素纳米胶束凝胶，合成效率高，产物质量好。具体实施方式下面结合具体实施例对本发明的技术方案作进一步的详述，但本发明并不限于以下实施例。本发明使用的壳聚糖纳米胶束药物载体优选为中国专利ZL201310034967.7所记载的壳聚糖纳米胶束包裹物溶液，或由其所记载的方法制备获得。实施例1：1.制备0.1％姜黄素纳米胶束口服混悬液制备方法：称取姜黄素0.1g、壳聚糖纳米胶束药物载体0.5g，放入研磨罐中，混合后关闭，紧锁在研磨机上，在500rpm条件下研磨1h；打开研磨罐，加入吐温800.5g，关闭，相同条件下研磨1h；打开研磨罐，加入丙二醇0.5g，关闭，相同条件下研磨1h，加入少量药用纯净水洗涤后加至100mL，微孔滤膜过滤、装瓶，即得。2.制备姜黄素纳米胶束凝胶制备方法：1)称取10g冰片，加入20mL95％乙醇，搅拌溶解，加入1.5g壳聚糖纳米胶束药物载体，搅拌混匀，过滤，回收乙醇，70℃真空干燥，制得8g壳聚糖纳米冰片；2)量取100mL姜黄素纳米胶束口服混悬液，加入3.0g壳聚糖纳米冰片，搅拌均匀，加入1.0g卡波姆941，800rpm速度搅拌30min，灌装，即得。实施例2：1.制备0.5％姜黄素纳米胶束口服液制备方法：称取姜黄素0.5g、壳聚糖纳米胶束药物载体1.0g，放入研磨罐中，混合后关闭，紧锁在研磨机上，在500rpm条件下研磨1h；打开研磨罐，加入泊洛沙姆1.0g，关闭，相同条件下研磨1h；打开研磨罐，加入乙醇1.0g，关闭，相同条件下研磨1h，加入少量药用纯净水洗涤后加至100mL，微孔滤膜过滤、装瓶，即得。2.制备姜黄素纳米胶束凝胶制备方法：1)称取10g冰片，加入20mL95％乙醇，搅拌溶解，加入1.5g壳聚糖纳米胶束药物载体，搅拌混匀，过滤，回收乙醇，70℃真空干燥，制得8g壳聚糖纳米冰片；2)量取100mL姜黄素纳米胶束口服混悬液，加入3.0g壳聚糖纳米冰片，搅拌均匀，加入0.8g用8mL纯净水加热溶解的聚乙烯醇溶液，1000rpm速度搅拌30min，灌装，即得。实施例3：1.制备0.25％姜黄素纳米胶束口服液制备方法：称取姜黄素0.25g、壳聚糖纳米胶束药物载体0.75g，放入研磨罐中，混合后关闭，紧锁在研磨机上，在500rpm条件下研磨1h；打开研磨罐，加入蔗糖脂肪酸酯0.75g，关闭，相同条件下研磨1h；打开研磨罐，加入聚乙二醇0.75g，关闭，相同条件下研磨1h，加入少量药用纯净水洗涤后加至100mL，微孔滤膜过滤、装瓶，即得。2.制备姜黄素纳米胶束凝胶制备方法：1)称取10g冰片，加入20mL95％乙醇，搅拌溶解，加入1.5g壳聚糖纳米胶束药物载体，搅拌混匀，过滤，回收乙醇，70℃真空干燥，制得8g壳聚糖纳米冰片；2)量取100mL姜黄素纳米胶束口服混悬液，加入4.0g壳聚糖纳米冰片，搅拌均匀，加入0.6g用12mL纯净水溶解的羧甲基纤维素钠溶液，1500rpm速度搅拌30min，灌装，即得。实施例4：1.制备0.1％姜黄素纳米胶束口服液制备方法：称取姜黄素0.1g、壳聚糖纳米胶束药物载体0.5g，放入研磨罐中，混合后关闭，紧锁在研磨机上，在500rpm条件下研磨1h；打开研磨罐，加入泊洛沙姆0.5g，关闭，相同条件下研磨1h；打开研磨罐，加入聚乙二醇0.5g，关闭，相同条件下研磨1h，加入少量药用纯净水洗涤后加至100mL，微孔滤膜过滤、装瓶，即得。2.制备姜黄素纳米胶束凝胶制备方法：1)称取10g冰片，加入20mL95％乙醇，搅拌溶解，加入1.5g壳聚糖纳米胶束药物载体，搅拌混匀，过滤，回收乙醇，70℃真空干燥，制得8g壳聚糖纳米冰片；2)量取100mL姜黄素纳米胶束口服混悬液，加入3.0g壳聚糖纳米冰片，搅拌均匀，加入1.0g卡波姆941，800rpm速度搅拌30min，灌装，即得。姜黄素纳米胶束口服混悬液稳定性试验方法：1、姜黄素纳米胶束口服混悬液稳定性影响因素实验取上述各实施例配制好的姜黄素纳米胶束口服混悬液，置于无色透明密封安瓿中，按中国药典2010版的要求进行影响因素实验考察稳定性，分别于温度40℃、光照(4500Lx±500Lx)条件下放置5天、10天后用高效液相色谱法测定样品中姜黄素的含量，结果见表1、表2。表1.姜黄素纳米胶束口服混悬液影响因素40℃试验结果表2.姜黄素纳米胶束口服混悬液影响因素光照试验结果姜黄素纳米胶束凝胶稳定性影响因素实验取上述各实施例配制好的姜黄素纳米胶束凝胶，置于无色透明密封安瓿中，按中国药典2010版的要求进行影响因素实验考察稳定性，分别于温度40℃、光照(4500Lx±500Lx)条件下放置5天、10天后用高效液相色谱法测定样品中姜黄素的含量，结果见表3、表4。表3.姜黄素纳米胶束凝胶影响因素40℃试验结果表4.姜黄素纳米胶束凝胶影响因素光照试验结果姜黄素纳米胶束口服混悬液稳定性对比实验取上述各实施例配制好的姜黄素纳米胶束口服混悬液，置于棕色、密封安瓿中，根据姜黄素特殊性质，设计于温度10℃、无光照条件下放置5天、10天后用高效液相色谱法测定样品中姜黄素的含量，结果见表5，以此作为稳定性对照实验。表5.姜黄素纳米胶束口服混悬液特殊条件下试验结果姜黄素纳米胶束凝胶稳定性对比实验取上述各实施例配制好的姜黄素纳米胶束凝胶，置于棕色、密封安瓿中，根据姜黄素特殊性质，设计于温度10℃、无光照条件下放置5天、10天后用高效液相色谱法测定样品中姜黄素的含量，结果见表6，以此作为稳定性对照实验。表6.姜黄素纳米胶束凝胶特殊条件下试验结果姜黄素纳米胶束口服混悬液稳定性加速试验取上述各实施例配制好的姜黄素纳米胶束口服混悬液，置于棕色、密封安瓿中，于温度10℃±2℃、RH75％±5％的条件下放置6个月，于第1、2、3、6个月分别取样检查，结果与0天样品比较，试验结果见表7：表7.姜黄素纳米胶束口服混悬液加速试验结果姜黄素纳米胶束凝胶稳定性加速试验取上述各实施例配制好的姜黄素纳米胶束凝胶，置于棕色、密封安瓿中，于温度10℃±2℃、RH75％±5％的条件下放置6个月，于第1、2、3、6个月分别取样检查，结果与0天样品比较，试验结果见表8：表8.姜黄素纳米胶束凝胶加速试验结果姜黄素纳米胶束口服混悬液稳定性长期试验取上述各实施例配制好的姜黄素纳米胶束口服混悬液，置于棕色、密封安瓿中，于温度10℃±2℃，RH60％±10％条件下贮存，于第3、6、9、12个月分别取样检查，结果与0天样品比较，试验结果见表9：表9.姜黄素纳米胶束口服混悬液长期试验结果姜黄素纳米胶束凝胶稳定性长期试验取上述各实施例配制好的姜黄素纳米胶束凝胶，置于棕色、密封安瓿中，于温度10℃±2℃，RH60％±10％条件下贮存，于第3、6、9、12个月分别取样检查，结果与0天样品比较，试验结果见表10：表10.姜黄素纳米胶束凝胶长期试验结果结论：由于姜黄素理化性质对温度及光线敏感，实施例样品在温度40℃±2℃、光照(4500Lx±500Lx)条件下，稳定性受到影响，特别是光线对稳定性影响因素更大；在温度10℃±2℃、RH75％±5％和温度10℃±2℃、RH60％±10％条件下放置12个月，姜黄素纳米胶束口服混悬液及姜黄素纳米胶束凝胶稳定性高。试验结果表明，姜黄素纳米胶束口服混悬液及姜黄素纳米胶束凝胶在低温下冷藏及使用，药品的稳定性得到大幅提升，减小了药物的用药风险，增强了药物的安全性。应用实施例1：姜黄素纳米胶束口服混悬液治疗高血脂症的临床疗效观察。观察病例40例，其中女18例，男22例，年龄46-75岁，平均年龄60岁；合并糖尿病7例，高血压病17例，冠心病5例，缺血性脑血管病3例。诊断标准，按1997年中华心血管学会拟定的血脂异常防治建议所定正常范围。血清胆固醇(TC)≥5.72mmol/L，或血清甘油三酯(TG)≥1.70mmol/L，或血清低密度脂蛋白(LDL-C)≥3.64mmol/L为观察对象。3项中有2项超出正常范围者列入观察对象。观察病例口服姜黄素纳米胶束口服混悬液，每次10mL，每天2次。观察期间停用其它降脂药，治疗其它疾病的药物服用保持不变，二个月为一疗程。服药前后测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)、空腹血糖(FBG)、谷丙转氨酶(GPT)。各指标的疗效判定标准参照2002年《中药新药临床研究指导原则(试行)》中“中药新药治疗高脂血症的临床研究指导原则”的实验室检查疗效判断标准。测定结果：显效30例(75％)，有效7例(17.5％)，总有效率92.5％。各指标治疗前后的变化(见表11)。表11.各指标治疗前后的变化NTCLDL-CHDL-CTG治疗前406.62±1.154.37±0.831.48±0.382.32±1.57治疗后406.08±1.21*3.58±0.31*1.69±0.69*1.83±1.28**与治疗前比较，P＜0.01全部观察病例治疗前后测定血清谷丙转氨酶(GPT)，结果比较无统计学差异，提示口服姜黄素纳米胶束口服混悬液确有较好的护肝作用。应用实施例2：姜黄素纳米胶束凝胶治疗鼻窦炎的临床疗效观察。观察病例30例，其中女16例，男14例；年龄40±11岁；病程最短4个月，最长3年；其中慢性鼻窦炎18例，急性鼻窦炎2例，伴鼻息肉者15例；参照中华耳鼻咽喉科学会推荐的变应性鼻炎诊断及分型标准，Ⅰ型4例，Ⅱ型20例，Ⅲ型6例。观察病例用药前3天停用抗生素、抗过敏药物及滴鼻剂，停用激素类药物，将姜黄素纳米胶束凝胶直接涂抹于鼻腔粘膜上面，每天2-3次，每次2-3mg；连续涂抹用药15天。观察指标(见表12)。表12.治疗前后观察的指标以治疗前积分之和减去治疗后积分之和，除以观察项目数，＞2为优；1-2为良；0-1为中；＜0为差。用优与良之和计算总有效率。在30例被观察的患者中，优：13例，占43.3％；良：12例，占40％；中：3例，占10％；差：2例，占6.7％。结论：经临床试验，姜黄素纳米胶束凝胶对鼻窦炎治疗的有效率83.3％，对鼻窦炎的鼻塞、流脓涕等症状控制较好。在单纯性鼻窦炎的治疗中，姜黄素纳米胶束凝胶显示出优良的治疗效果。应用实施例3：姜黄素纳米胶束凝胶治疗牙龈炎的临床疗效观察。观察病例80例，其中女33例，男47例；年龄16-58岁(平均35.4岁)；病程最短6天，最长12年(平均2.6年)。观察病例选择参照《口腔内科学》第四版中有关牙龈炎的诊断标准。观察病例将姜黄素纳米胶束凝胶直接涂抹于口腔牙龈肿胀粘膜上面，每天2-3次，每次2-3mg；3天为一疗程。用药前后采用视觉模拟评分法(visualanaloguescale，VAS)和牙龈指数(GI)检测记录患者消炎镇痛情况。疼痛3度记分法：0为无疼痛；1为轻微疼痛，不影响生活；2为中度疼痛，影响生活，尚可忍受，服止痛药缓解；3为重度疼痛，不能忍受，需服镇痛剂治疗。牙龈指数(GI)：0为牙龈正常；1为轻度炎症，牙龈鲜红或暗红，轻度水肿，探诊无出血；2为中度炎症，牙龈充血，表面光亮水肿，探诊出血；3为重度炎症，牙龈红肿明显，有溃烂或有脓液、瘘道，自发性出血倾向。治疗效果综合评价标准：1为显效，自发性疼痛消失，龈袋渗出、溢脓消失，探诊无出血，牙龈指数减少1.0以上；2为有效，自发性疼痛消失，轻微触痛，龈袋少量渗出，溢脓消失，探诊少量出血，牙龈指数减少0.5以上；3为无效，自发性疼痛与触痛均未消失，甚至有加重倾向，龈袋渗出、溢脓未减轻，探诊出血，牙龈指数无变化。总有效为显效与有效之和，观察患者治疗效果综合评价见表13.表13.观察患者治疗效果综合评价n(％)结论：治疗效果综合评价表明，治疗后第三天有效率47.5％，治疗后第七天显效率97.5％。临床试验证明，姜黄素纳米胶束凝胶具有明显的抑菌、抗炎、镇痛效果，治疗牙龈炎疗效确切，值得临床上推广和使用。应用实施例4：姜黄素纳米胶束凝胶治疗宫颈炎的临床疗效观察。观察病例80例，年龄20-46岁(平均32.2±4.6岁)。其中，宫颈糜烂Ⅰ度49例，宫颈糜烂Ⅱ度23例，宫颈糜烂Ⅲ度8例。治疗前均对患者进行阴道分泌物检查及宫颈细胞学检查，排除宫颈恶性病变，给予姜黄素纳米胶束凝胶于月经干净后2-3天应用，每晚睡前对外阴清洗后，取下给药器前端的前盖，将给药器缓慢插入阴道深处，1支/天，10天一疗程。治疗效果评价标准：1为治愈，临床症状明显消失，宫颈无糜烂，表面光滑；2为显效，临床症状显著改善，糜烂面积呈＞50％缩小；3为有效，临床症状明显减轻，糜烂面积呈＜50％缩小，或颗粒型转变成单纯型，乳突型转变成颗粒型；4为无效，临床症状无明显改善，宫颈糜烂无明显改善。结果：本试验观察80例患者中，治愈69例(86.25％)；显效7例(8.75％)；有效3例(3.75％)；无效1例(1.25％)。总有效率：98.75％。结论：宫颈糜烂采用姜黄素纳米胶束凝胶治疗，具有较高的安全性和有效性，操作简便，且无明显的不良反应，可显著改善患者生活质量，具有重要的临床意义，值得广泛推广。当前第1页1 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