人类免疫缺陷病毒复制的抑制剂的制作方法

1.本发明涉及药物组合物和使用这些组合物治疗hiv感染的方法。


背景技术：

2.获得性免疫缺陷综合征(aids)是hiv感染的结果。hiv仍然是一个主要的全球公共卫生问题。2015年，估计有3670万人感染hiv(包括180万儿童)，全球hiv流行率为0.8％。该数字的绝大多数生活在低收入和中等收入国家。同年，110万人死于aids相关疾病。
3.目前hiv感染个体的治疗由已获批的抗逆转录病毒剂的组合组成。目前有近四十多种药物被批准用于hiv感染，作为单一药剂、固定剂量组合或单一片剂方案；后两种含有2-4种批准的药剂。这些药剂属于许多不同的类别，在病毒复制周期中靶向病毒酶或病毒蛋白的功能。因此，药剂被分类为核苷酸逆转录酶抑制剂(nrti)、非核苷酸逆转录酶抑制剂(nnrti)、蛋白酶抑制剂(pi)、整合酶链转移抑制剂(insti)或进入抑制剂(一种，马拉韦罗(maraviroc)，靶向宿主ccr5蛋白，而另一种，恩夫韦地(enfuvirtide)，是靶向病毒gp160蛋白的gp41区域的肽)。此外，药代动力学增强剂(可比司他(cobicistat)或利托那韦(ritonavir))可与需要加强的抗逆转录病毒剂(arv)联合使用。
4.尽管有各种药剂和药物组合，但仍然存在新的抗逆转录病毒药剂的医疗需求。高病毒异质性、药物相关毒性、耐受性问题和依从性差都可导致治疗失败，并可导致选择具有突变的病毒，从而对一种或多种抗逆转录病毒剂或甚至来自整个类别的多种药物产生耐药性(beyrer,c.,pozniak a.hiv drug resistance
–
an emerging threat to epidemic control.n.engl.j.med.2017,377,1605-1607；gupta,r.k.,gregson j.,等人，hiv-1drug resistance before initiation or re-initiation of first-line antiretroviral therapy in low-income and middle-income countries:a systematic review and meta-regression analysis.lancet infect.dis.2017,18,346-355；zazzi,m.,hu,h.,prosperi,m.the global burden of hiv-1 drug resistance in the past 20 years.peerj.2018,doi 10.7717/peerj.4848)。因此，需要新的药物，其更易于服用，对耐药性的发展具有高的遗传障碍，并且相对于目前的药剂具有改善的安全性。在这种广泛的选择中，可用作优选的抗逆转录病毒疗法(art)的一部分的新作用机制(moa)仍可发挥主要作用，因为它们应有效对抗对当前药剂具有耐药性的病毒。
5.某些潜在的治疗性化合物现在已在本领域中有所描述，并且示出于blair,wade s.等人,antimicrobial agents and chemotherapy(2009),53(12),5080-5087，blair,wade s.等人,plos pathogens(2010),6(12),e1001220,thenin-houssier,suzie；valente,susana t.current hiv research,2016,14,270-282，以及具有以下编号的pct专利申请：wo 2012065062、wo 2013006738、wo 2013006792、wo 2014110296、wo 2014110297、wo 2014110298、wo 2014134566、wo 2015130964、wo 2015130966、wo 2016033243、wo 2018035359、wo 2018203235、wo 2019161017和wo 2019161280。
6.本领域现在需要的是新的并且可用于治疗hiv的其它化合物。另外，这些化合物应
提供药物用途的优势，例如，关于其作用机制、结合、抑制功效、靶标选择性、溶解度、安全性、生物利用度和/或降低的给药频率中的一种或多种。还需要使用这些化合物的新制剂和治疗方法。某些化合物的制剂公开于wo 2020/018459中。


技术实现要素：

7.简而言之，在一个方面，本发明公开了一种药物组合物，该药物组合物包含：式ia、式ib、式ic、或式id的化合物：
[0008][0009]
或它们药学上可接受的盐，以及溶剂或稀释剂，所述溶剂或稀释剂选自水、醇、聚乙二醇(peg)、n-甲基-2-吡咯烷酮(nmp)、乳酸乙酯、丙二醇、四甘醇(glycofurol)和二甲基亚砜(dmso)。
[0010]
在另一方面，本发明公开了一种治疗人hiv感染的方法，该方法包括给药本发明的药物组合物。
[0011]
在另一方面，本发明公开了一种用于疗法的本发明的药物组合物。
[0012]
在另一方面，本发明公开了一种用于治疗人hiv感染的本发明的药物组合物。
[0013]
在另一方面，本发明公开了本发明的药物组合物在制造用于治疗人hiv感染的药物中的用途。
附图说明
[0014]
图1是下述pk实验的概述。
具体实施方式
[0015]
在一个方面，本发明的药物组合物还包含选自聚山梨醇酯20、聚山梨醇酯80、泊洛沙姆188、泊洛沙姆207、泊洛沙姆338、氯化钠和氢氧化钠的赋形剂。
[0016]
在一个方面，本发明的药物组合物是溶液。
[0017]
在一个方面，本发明的药物组合物是悬浮液。
[0018]
在一个方面，本发明的药物组合物包含水。
[0019]
在一个方面，本发明的药物组合物包含聚乙二醇(peg)。
[0020]
在一个方面，本发明的药物组合物包含聚乙二醇(peg)，其中peg的平均分子量为约300(peg 300)。
[0021]
在一个方面，本发明的药物组合物包含乙醇。
[0022]
在一个方面，本发明的药物组合物包含乳酸乙酯。
[0023]
在一个方面，本发明的药物组合物包含泊洛沙姆188。
[0024]
在一个方面，本发明的药物组合物包含氢氧化钠。
[0025]
在一个方面，本发明的药物组合物是其中至少90重量％的溶剂或稀释剂为水和peg 300的药物组合物。
[0026]
在一个方面，本发明的药物组合物是其中至少90重量％的赋形剂为泊洛沙姆188的药物组合物。
[0027]
在一个方面，本发明的药物组合物是其中水以8至20重量％存在于组合物中且peg 300以60-85重量％存在于组合物中的药物组合物。
[0028]
在一个方面，本发明的药物组合物是其中水以8至12重量％存在于组合物中且peg 300以63-70重量％存在于组合物中的药物组合物。
[0029]
在一个方面，本发明的药物组合物是其中式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐以基于式ia、式ib、式ic、或式id的游离化合物的重量计50至500mg/ml的浓度存在于组合物中的药物组合物。贯穿本说明书，提及到的式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐的浓度总是指基于式ia、式ib、式ic、或式id的游离化合物而非基于盐的浓度。
[0030]
在一个方面，本发明的药物组合物是其中式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐以225至275mg/ml的浓度存在于组合物中的药物组合物。
[0031]
在一个方面，本发明的药物组合物是其中式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐以275至350mg/ml的浓度存在于组合物中的药物组合物。
[0032]
在一个方面，本发明的药物组合物是其中式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐以350至425mg/ml的浓度存在于组合物中的药物组合物。
[0033]
在一个方面，本发明的药物组合物由式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐的结晶形式产生。在另一方面，本发明的药物组合物是式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐的结晶形式的悬浮液。
[0034]
在一个方面，本发明的药物组合物由式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药
学上可接受的盐的无定形形式产生。在另一方面，无定形形式是冻干粉末。在另一方面，本发明的药物组合物是无定形形式的悬浮液。
[0035]
在另一方面，制剂包含水。在另一方面，制剂包含四甘醇。在另一方面，制剂包含n-甲基-2-吡咯烷酮(nmp)。在另一方面，制剂包含二甲基亚砜(dmso)。在另一方面，制剂包含醇。在另一方面，制剂包含乙醇。在另一方面，制剂包含盐水。在另一方面，制剂包含聚乙二醇(peg)，其化学式通常可书写为h-(o-ch
2-ch2)
n-oh。在另一方面，制剂包含平均分子量为约100的peg(peg 100)。在另一方面，制剂包含平均分子量为约200的peg(peg 200)。在另一方面，制剂包含平均分子量为约300的peg(peg 300)。在另一方面，制剂包含平均分子量为约400的peg(peg 400)。在另一方面，制剂包含平均分子量为约500的peg(peg 500)。在另一方面，制剂包含平均分子量为约600的peg(peg 600)。在另一方面，制剂包含烷基“封端”的peg，使得peg的式通常可书写为烷基-(o-ch
2-ch2)
n-o-烷基。在另一方面，占制剂》50重量/重量％的成分不是水。在另一方面，占制剂》60重量/重量％的成分不是水。在另一方面，占制剂》70重量/重量％的成分不是水。在另一方面，占制剂》80重量/重量％的成分不是水。在另一方面，占制剂》85重量/重量％的成分不是水。在另一方面，占制剂》90重量/重量％的成分不是水。在另一方面，制剂包含水和peg 200。在另一方面，制剂包含水和peg 300。
[0036]
在一个方面，本发明的药物组合物包含式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐，以及增溶赋形剂。在另一方面，增溶赋形剂是聚山梨醇酯。在另一方面，增溶赋形剂是聚山梨醇酯20。在另一方面，增溶赋形剂是聚山梨醇酯80。在另一方面，增溶赋形剂是泊洛沙姆。在另一方面，增溶赋形剂是泊洛沙姆188(p188)。在另一方面，增溶赋形剂是泊洛沙姆207。在另一方面，增溶赋形剂是泊洛沙姆338(p338)。在另一方面，增溶赋形剂是多库酯钠。在另一方面，增溶赋形剂是聚乙二醇3350(peg3350)。在另一方面，增溶赋形剂是脂肪酸。在另一方面，增溶赋形剂是含有8-12个碳的脂肪酸。在另一方面，增溶赋形剂是含有8个碳(c8)的脂肪酸。在另一方面，增溶赋形剂是含有12个碳(c12)的脂肪酸。在另一方面，增溶赋形剂小于制剂的5重量/重量％。在另一方面，增溶赋形剂小于制剂的约5重量/重量％。在另一方面，增溶赋形剂小于制剂的约4重量/重量％。在另一方面，增溶赋形剂小于制剂的约3重量/重量％。在另一方面，增溶赋形剂小于制剂的约2重量/重量％。在另一方面，增溶赋形剂小于制剂的约1重量/重量％。在另一方面，增溶赋形剂小于制剂的约0.5重量/重量％。在另一方面，增溶赋形剂小于制剂的约0.25重量/重量％。
[0037]
在一个方面，本发明的药物组合物包含泊洛沙姆188和c8脂肪酸。在另一方面，泊洛沙姆188与c8脂肪酸的比率为约3:1。在另一方面，泊洛沙姆188的浓度为制剂的约3重量/重量％，并且c8脂肪酸的浓度为制剂的约1重量/重量％。
[0038]
在一个方面，本发明的药物组合物包含泊洛沙姆188和c12脂肪酸。在另一方面，泊洛沙姆188与c12脂肪酸的比率为约6:1。在另一方面，泊洛沙姆188的浓度为制剂的约3重量/重量％，并且c12脂肪酸的浓度为制剂的约0.5重量/重量％。
[0039]
在一个方面，本发明的药物组合物包含泊洛沙姆338和c8脂肪酸。在另一方面，泊洛沙姆338与c8脂肪酸的比率为约3:1。在另一方面，泊洛沙姆388的浓度为制剂的约3重量/重量％，并且c8脂肪酸的浓度为制剂的约1重量/重量％。
[0040]
在一个方面，本发明的药物组合物包含泊洛沙姆338和c12脂肪酸。在另一方面，泊洛沙姆388与c12脂肪酸的比率为约6:1。在另一方面，泊洛沙姆388的浓度为制剂的约3重
量/重量％，并且c12脂肪酸的浓度为制剂的约0.5重量/重量％。
[0041]
在一个方面，本发明的药物组合物包含多库酯钠和c8脂肪酸。在另一方面，多库酯钠与c8脂肪酸的比率为约3:1。在另一方面，多库酯钠的浓度为制剂的约3重量/重量％，并且c8脂肪酸的浓度为制剂的约1重量/重量％。
[0042]
在一个方面，本发明的药物组合物包含多库酯钠和c12脂肪酸。在另一方面，多库酯钠与c12脂肪酸的比率为约6:1。在另一方面，多库酯钠的浓度为制剂的约3重量/重量％，并且c12脂肪酸的浓度为制剂的约0.5重量/重量％。
[0043]
在一个方面，本发明的药物组合物含有螯合剂。在另一方面，螯合剂是na-edta。在另一方面，na-edta以制剂的0.01-0.05重量/重量％存在。
[0044]
在一个方面，本发明的药物组合物含有抗氧化剂。在另一方面，抗氧化剂是l-甲硫氨酸。在另一方面，抗氧化剂是维生素e。在另一方面，抗氧化剂以制剂的0.01-0.10重量/重量％存在。
[0045]
在一个方面，本发明的药物组合物含有酸。在另一方面，酸是乙磺酸。在另一方面，乙磺酸的浓度为1-10mm。在另一方面，乙磺酸的浓度为4.8-5.2mm。在另一方面，酸是甲磺酸。在另一方面，甲磺酸的浓度为1-10mm。在另一方面，甲磺酸的浓度为4.8-5.2mm。
[0046]
在一个方面，本发明的药物组合物含有碱。在另一方面，碱是无机碱。在另一方面，碱是有机碱。在另一方面，碱的阴离子是-oh(氢氧根)。在另一方面，碱的阴离子是-oet(乙氧基)。在另一方面，碱的阴离子是-oac(乙酸根)。在另一方面，碱的阳离子是
+
na(钠)。在另一方面，碱的阳离子是
+
k(钾)。在另一方面，碱的阳离子是胆碱。在另一方面，碱是乙酸钠。在另一方面，碱是氢氧化钠。在另一方面，碱是乙醇钠。在另一方面，碱是氢氧化胆碱。在另一方面，本发明的药物组合物包含相对于式ia、式ib、式ic、或式id的化合物而言0.1-1.5摩尔当量的碱。在另一方面，本发明的药物组合物包含相对于式ia、式ib、式ic、或式id的化合物而言0.7-1.2摩尔当量的碱。在另一方面，本发明的药物组合物包含相对于式ia、式ib、式ic、或式id的化合物而言0.7-1.0摩尔当量的碱。在另一方面，本发明的药物组合物包含相对于式ia、式ib、式ic、或式id的化合物而言1.0-1.2摩尔当量的碱。在另一方面，本发明的药物组合物包含约等摩尔当量的碱以及式ia、式ib、式ic、或式id的化合物。
[0047]
在一个方面，本发明的药物组合物包含缓冲液。在另一方面，缓冲液是乙酸盐缓冲液。在另一方面，缓冲液的ph为4.0-7.4。在另一方面，缓冲液的ph为4.0-5.5。在另一方面，缓冲液的ph为4.8-5.2。在另一方面，缓冲液的浓度为1-10mm。在另一方面，缓冲液的浓度为4.8-5.2mm。
[0048]
在一个方面，本发明的药物组合物包含50-500mg/ml的式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐。在另一方面，本发明的药物组合物包含约50mg/ml的式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐。在另一方面，本发明的药物组合物包含约100mg/ml的式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐。在另一方面，本发明的药物组合物包含约150mg/ml的式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐。在另一方面，本发明的药物组合物包含约200mg/ml的式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐。在另一方面，本发明的药物组合物包含约250mg/ml的式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐。在另一方面，本发明的药物组合物包含约300mg/ml的式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可
接受的盐。在另一方面，本发明的药物组合物包含约350mg/ml的式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐。在另一方面，本发明的药物组合物包含约400mg/ml的式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐。在另一方面，本发明的药物组合物包含约450mg/ml的式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐。在另一方面，本发明的药物组合物包含约500mg/ml的式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐。
[0049]
在一个方面，本发明的药物组合物包含式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐、水、peg 300，以及0-3种额外的赋形剂。
[0050]
在一个方面，本发明的药物组合物包含式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐、水、peg 200，以及0-3种额外的赋形剂。
[0051]
在一个方面，本发明的药物组合物包含式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐、泊洛沙姆p338，以及乙酸盐缓冲液。在另一方面，式ia、式ib、式ic、或式id、或它们药学上可接受的盐的浓度为280-320mg/ml。在另一方面，泊洛沙姆p338的浓度为3-5重量/重量％。在另一方面，乙酸盐缓冲液的ph为4.8-5.2。在另一方面，乙酸盐缓冲液的浓度为4.8-5.2mm。
[0052]
在一个方面，本发明的药物组合物包含式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐、泊洛沙姆p338、乙磺酸，以及乙酸盐缓冲液。在另一方面，式ia、式ib、式ic、或式id、或它们药学上可接受的盐的浓度为280-320mg/ml。在另一方面，泊洛沙姆p338的浓度为3-5重量/重量％。在另一方面，乙磺酸的浓度为4.8-5.2mm。在另一方面，乙酸盐缓冲液的ph为4.8-5.2。在另一方面，乙酸盐缓冲液的浓度为4.8-5.2mm。
[0053]
在一个方面，本发明的药物组合物包含式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐、泊洛沙姆p338、c8-c12脂肪酸，以及乙酸盐缓冲液。在另一方面，式ia、式ib、式ic、或式id、或它们药学上可接受的盐的浓度为280-320mg/ml。在另一方面，泊洛沙姆p338的浓度为3-5重量/重量％。在另一方面，脂肪酸的浓度为0.5-1重量/重量％。在另一方面，乙酸盐缓冲液的ph为4.8-5.2。在另一方面，乙酸盐缓冲液的浓度为4.8-5.2mm。
[0054]
在一个方面，本发明的药物组合物包含式ia、式ib、式ic、或式id的化合物、或它们药学上可接受的盐、多库酯钠，以及乙酸盐缓冲液。在另一方面，式ia、式ib、式ic、或式id、或它们药学上可接受的盐的浓度为280-320mg/ml。在另一方面，多库酯钠的浓度为1-2重量/重量％。在另一方面，乙酸盐缓冲液的ph为4.8-5.2。在另一方面，乙酸盐缓冲液的浓度为4.8-5.2mm。
[0055]
在一个方面，本发明公开了一种药物组合物，它是溶液，并且经由通过过滤器而使其无菌。
[0056]
本发明的盐是药学上可接受的。这样的盐可以是酸加成盐或碱加成盐。对于合适的药学上可接受的盐的综述，参见例如berge等人,j.pharm,sci.,66,1-19,1977。
[0057]
代表性的药学上可接受的酸加成盐包括但不限于4-乙酰胺基苯甲酸盐、乙酸盐、己二酸盐、藻酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯磺酸盐(benzenesulfonate)(苯磺酸盐(besylate))、苯甲酸盐、硫酸氢盐、酒石酸氢盐、丁酸盐、依地酸钙、樟脑酸盐、樟脑磺酸盐(右旋樟脑磺酸盐)、癸酸盐(caprate)(癸酸盐(decanoate))、己酸盐(caproate)(己酸盐(hexanoate))、辛酸盐(caprylate)(辛酸盐(octanoate))、肉桂酸盐、柠檬酸盐、环己氨基
磺酸盐、二葡萄糖酸盐、2,5-二羟基苯甲酸盐、二琥珀酸盐、十二烷基硫酸盐(丙酸酯月桂硫酸盐)、依地酸盐(乙二胺四乙酸盐)、丙酸酯月桂硫酸盐(月桂基硫酸盐)、乙烷-1,2-二磺酸盐(乙二磺酸盐)、乙烷磺酸盐(乙磺酸盐)、甲酸盐、富马酸盐、半乳糖二酸盐(galactarate)(粘酸盐(mucates))、龙胆酸盐(2,5-二羟基苯甲酸盐)、葡庚糖酸盐(glucoheptonate)(葡庚糖酸盐(gluceptate))、葡糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、谷氨酸盐、戊二酸盐、甘油磷酸盐(glycerophosphorate)、乙醇酸盐、己基间苯二酚盐、马尿酸盐、海巴明(hydrabamine)(n,n'-二(去氢枞基)-乙二胺)、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、羟基萘甲酸盐、异丁酸盐、乳酸盐、乳糖醛酸盐、月桂酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲烷磺酸盐(甲磺酸盐)、甲基硫酸盐、粘酸盐、萘-1,5-二磺酸盐(萘二磺酸盐)、萘-2-磺酸盐(萘磺酸盐)、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、棕榈酸盐、对氨基苯磺酸盐、对氨基水杨酸盐、双羟萘酸盐(思波酸盐)、泛酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、苯乙酸盐、苯乙基巴比妥酸盐、磷酸盐、聚半乳糖醛酸盐、丙酸盐、对甲苯磺酸盐(甲苯磺酸盐)、焦谷氨酸盐、丙酮酸盐、水杨酸盐、癸二酸盐、硬脂酸盐、次醋酸盐、琥珀酸盐、氨基磺酸盐、硫酸盐、丹宁酸盐、酒石酸盐、氯茶碱盐(teoclate)(8-氯茶碱盐)、硫氰酸盐、三乙基碘、十一烷酸盐、十一碳烯酸盐和戊酸盐。
[0058]
代表性的药学上可接受的碱加成盐包括但不限于铝、2-氨基-2-(羟甲基)-1,3-丙二醇(tris，氨丁三醇)、精氨酸、苯乙苄胺(n-苄基苯乙胺)、苄星(n,n
’‑
二苄基乙二胺)、双-(2-羟乙基)胺、铋、钙、氯普鲁卡因、胆碱、克立咪唑(1-对氯苄基-2-吡咯烷-1
’‑
基甲基苯并咪唑)、环己胺、二苄基乙二胺、二乙胺、二乙基三胺、二甲胺、二甲基乙醇胺、多巴胺、乙醇胺、乙二胺、l-组氨酸、铁、异喹啉、勒皮啶、锂、赖氨酸、镁、葡甲胺(n-甲葡糖胺)、哌嗪、哌啶、钾、普鲁卡因、奎宁、喹啉、钠、锶、叔丁胺和锌。
[0059]
特别优选的盐是钠盐。另一种特别优选的盐是钾盐。
[0060]
在另一方面，本发明公开了预防人hiv感染或降低感染风险的方法，该方法包括给药本发明的药物组合物。暴露前预防(或prep)是处于hiv感染风险的人每天服用药物以降低他们获得hiv感染的机会的情况。prep已显示有效地降低感染的风险。
[0061]
据信本发明的化合物和盐使hiv衣壳作为其生物靶标，并因此其作用机制是以一种或多种方式改变hiv衣壳的功能。
[0062]
本发明的化合物和盐可单独使用或与其它治疗剂组合使用。因此，根据本发明的联合治疗包括施用至少一种本发明的化合物或盐，以及施用至少一种可用于治疗hiv感染的其它药剂。本发明的化合物或盐和其它药剂可以在单一药物组合物中一起配制和施用或可以分开配制和施用。当单独配制和施用时，施用可以同时发生或以任何顺序依次发生。合适的其它药剂包括，例如，阿巴卡韦(abacavir)、阿扎那韦(atazanavir)、比克替拉韦(bictegravir)、卡波特韦(cabotegravir)、地瑞那韦(darunavir)、地拉夫定(delavirdine)、去羟肌苷(didanosine)、双脱氧肌苷(dideoxyinosine)、度鲁特韦(dolutegravir)、多拉韦林(doravirine)、依法韦仑(efavirenz)、埃替格韦(elvitegravir)、恩曲他滨(emtricitabine)、依曲韦林(etravirine)、膦沙那韦(fosamprenavir)、福斯特沙韦(fostemsavir)、茚地那韦(indinavir)、slatravir、拉米夫定(lamivudine)、洛匹那韦(lopinavir)、马拉韦罗、奈非那韦(nelfinavir)、奈韦拉平(nevirapine)、雷格拉韦(raltegravir)、rilpiverine、利托那韦(ritonavir)、沙奎那韦(saquinavir)、司他夫定(stavudine)、替拉那韦(tipranavir)、替诺福韦(tenofovir)、替
诺福韦艾拉酚胺(tenofovir alafenamide)、富马酸替诺福韦二吡呋酯(tenofovir disoproxil fumarate)、扎西他滨(zalcitabine)和齐多夫定(zidovudine)。优选的药剂包括，例如，度鲁特韦、比克替拉韦、islatravir、拉米夫定、福斯特沙韦和卡波特韦。特别优选的药剂包括，例如，度鲁特韦、比克替拉韦、拉米夫定、福斯特沙韦和卡波特韦。
[0063]
实施例
[0064]
双环[3.1.0]己-3-醇的制备
[0065][0066]
在n2气氛下，在0-5℃，在3小时内向环戊-3-烯醇(130g,1545mmol)在dcm(1200ml)中的搅拌溶液中滴加二乙基锌的己烷溶液(1.0m,3091ml,3091mmol)。在0℃在1小时内向该溶液中滴加二碘甲烷(249ml,3091mmol)的dcm溶液(300ml)。使反应混合物温热至27℃，此时观察到白色沉淀的形成。将混合物搅拌16小时。通过tlc(sio2，20％etoac/石油醚，rf＝0.3，uv-无活性，pma-活性)监测反应进程。通过小心加入饱和nh4cl水溶液(1.5l)淬灭反应混合物。将混合物通过硅藻土垫过滤。将水层用dcm(2
×
1l)萃取。将合并的有机层用无水na2so4干燥，过滤，然后减压浓缩，得到粗品双环[3.1.0]己-3-醇，其为红色液体，180g。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝4.41-4.35(m,1h),2.18-2.05(m,2h),1.73(d,j＝13.9hz,2h),1.35-1.25(m,2h),1.21-1.14(m,1h),0.57-0.43(m,2h).gcms：m/z＝98.1).
[0067]
双环[3.1.0]己-3-酮的制备
[0068][0069]
在n2气氛下，在0℃，向双环[3.1.0]己-3-醇(210g,2054mmol)在dcm(5000ml)中的搅拌溶液中分批加入戴斯马丁氧化剂(dess-martin periodinane)(954g,225mmol)。使混合物温热至27℃，然后搅拌16小时。通过tlc(sio2，20％丙酮/己烷，rf＝0.3，uv无活性，pma活性)监测反应进程。将反应混合物通过硅藻土垫过滤，并将滤液用naoh水溶液(1n，8
×
1l)洗涤。将合并的水相用dcm(5x 1l)萃取。将合并的有机层用无水na2so4干燥，过滤，然后减压浓缩(浴温：20℃)，得到粗品双环[3.1.0]己-3-酮，其为棕色液体。将该液体通过在70℃向下蒸馏进一步纯化，得到双环[3.1.0]己-3-酮，其为浅黄色粘性液体，125g(62％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝2.61-2.54(m,2h),2.17-2.12(m,2h),1.54-1.46(m,2h),0.92-0.86(m,1h),-0.01
‑‑
0.08(m,1h)；gcms：m/z＝96.1.
[0070]
2-(2,2-二氟乙酰基)双环[3.1.0]己-3-酮的制备
[0071][0072]
在n2气氛下，在-78℃，向双环[3.1.0]己-3-酮(125g,1274mmol)在thf(1500ml)中的搅拌溶液中加入lda(2.0m，在thf中，0.701l，1402mmol)。将溶液在-78℃搅拌1小时。在30分钟内向该溶液中缓慢加入二氟乙酸乙酯(174g，1402mmol)的thf溶液(300ml)，保持温度为-78℃。使反应混合物温热至27℃，然后搅拌1小时。通过tlc(sio2，20％丙酮/己烷，rf＝0.3，uv-活性)监测反应进程。通过添加hcl水溶液(1n，2000ml)淬灭反应混合物。将混合物搅拌30分钟。然后用etoac(3
×
1000ml)萃取。将合并的有机层用盐水(1000ml)洗涤，经无水
na2so4干燥并过滤。将滤液减压浓缩，得到2-(2,2-二氟乙酰基)双环[3.1.0]己-3-酮，其为浅黄色粘稠液体，180g(71％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝6.18(t,j＝54.8hz,1h),2.70-2.62(m,1h),2.35(d,j＝19.4hz,1h),2.14(br s,1h),1.26-1.21(m,1h),1.04-1.03(m,1h),0.22-0.21(m,1h),lcms：m/z＝173.17).
[0073]
2-(3-(二氟甲基)-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸乙酯的制备
[0074][0075]
在n2气氛下，在27℃，向2-(2,2-二氟乙酰基)双环[3.1.0]己-3-酮(180g,910mmol)在乙醇(2l)中的搅拌溶液中加入2-肼基乙酸乙酯盐酸盐(422g，2729mmol)，然后加入硫酸(20ml，375mmol)。将混合物搅拌30分钟，然后加热至100℃并搅拌16小时。通过tlc(sio2，20％丙酮/己烷，rf＝0.3，uv-活性)监测反应进程。将反应混合物减压浓缩。将残余物溶于etoac(2000ml)，并用水(2
×
1l)、盐水(1.0l)洗涤，用无水na2so4干燥，过滤，然后减压浓缩。将所得残余物经硅胶柱色谱法(石油醚(pet.)：丙酮100:0
→
98:2)，得到2-(3-(二氟甲基)-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸乙酯，其为灰白色固体，110g(46％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝6.86(t,j＝54.8hz,1h),4.93(s,2h),4.14(q,j＝7.2hz,2h),2.88-2.79(m,1h),2.76-2.68(m,1h),2.14-2.04(m,2h),1.19(t,j＝7.2hz,3h),1.10-1.03(m,1h),0.14(q,j＝4.3hz,1h).
[0076]
2-(3-(二氟甲基)-5-氧代-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸乙酯的制备
[0077][0078]
在0℃，向2-(3-(二氟甲基)-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸乙酯(110g,422mmol)和硅藻土(395g)在环己烷(3.5l)中的搅拌溶液中分批加入重铬酸吡啶鎓(794g,2110mmol)。在氮气气氛下，在10分钟内向该混合物中滴加叔丁基过氧化氢(355ml,2130mmol)。将反应混合物温热至27℃，然后在该温度搅拌48小时。通过tlc(sio2，30％丙酮/石油醚，rf＝0.4，uv-活性)监测反应进程。将反应混合物过滤，并将滤饼用etoac(1000ml)萃取。将滤液用饱和na2s2o3水溶液(2x500ml)；饱和feso4水溶液(300ml)洗涤；然后用盐水(500ml)洗涤。将有机层用无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到粗品标题化合物(150g)。
[0079]
2-(3-(二氟甲基)-4,4a-二氢螺[环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-5,2'-[1,3]二硫戊环]-1(3bh)-基)乙酸乙酯的制备
[0080][0081]
在氮气气氛下，在27℃，向2-(3-(二氟甲基)-5-氧代-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸乙酯(75g,269mmol)在dcm(1500ml)中的搅拌溶液中加入乙烷-1,2-二硫醇(43.0ml,511mmol)，然后加入三氟化硼乙酸(72.6ml,511mmol)。将该溶液搅拌16小时。通过tlc(sio2，20％丙酮/石油醚，rf＝0.35，uv活性)监测反应进程。完成后，将反应混合物冷却至0℃，并通过加入饱和nahco3水溶液(500ml)淬灭。将混合物用dcm(2
×
1000ml)萃取。将合并的有机物用盐水(1000ml)洗涤，用无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到棕色液体。将该物质经硅胶柱色谱法(石油醚:etoac 95:5
→
90:10)，得到2-(3-(二氟甲基)-4,4a-二氢螺[环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-5,2'-[1,3]二硫戊环]-1(3bh)-基)乙酸乙酯，其为灰白色固体，80g(74％)。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ＝6.61(t,j＝55.2hz,1h),5.00-4.85(m,2h),4.29-4.19(m,2h),3.55-3.46(m,4h),2.63-2.53(m,1h),2.49-2.38(m,1h),1.30-1.24(m,4h),0.65-0.60(m,1h).lcms m+h＝346.9.
[0082]
2-(3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸乙酯的制备
[0083][0084]
在n2气氛下，在-70℃，向1,3-二溴-5,5-二甲基咪唑烷-2,4-二酮(26.3g,92mmol)在dcm(20ml)中的搅拌溶液中加入hf-吡啶(2.460g，24.83mmol)。将溶液保持30分钟。向该溶液中加入2-(3-(二氟甲基)-4,4a-二氢螺[环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-5,2'-1,3]二硫戊环]-1(3bh)-基)乙酸乙酯(10g,25mmol)的dcm溶液(20ml)。使反应混合物温热至-40℃，然后在该温度搅拌1小时。通过tlc(sio2，30％etoac/石油醚，rf＝0.3，uv无活性)监测反应进程。通过加入饱和nahco3水溶液(200ml)淬灭反应混合物。将混合物温热至室温，然后用etoac(2
×
100ml)萃取。将合并的有机物用盐水(50ml)洗涤；经无水na2so4干燥；过滤；减压浓缩，得到棕色固体。将该物质经硅胶柱色谱法(石油醚:etoac 100:0
→
75-25)，得到2-(3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸乙酯，其为浅黄色固体，8.5g(91％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝6.62(t,j＝55.2hz,1h),4.82(s,2h),4.30-4.18(m,2h),2.51-2.37(m,2h),1.42-1.35(m,1h),1.31-1.23(m,3h),1.14-1.08(m,1h).lcms m+h＝293.07.
[0085]
2-(3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸的制备
[0086][0087]
在n2气氛下，在0℃，向2-(3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸乙酯(15g,50mmol)在thf(17ml)和meoh(66ml)中的搅拌溶液中加入lioh(1.788g，74.7mmol)的水溶液(66ml)。使反应混合物温热至27℃，然后在该温度搅拌3小时。通过tlc(sio2，5％meoh/dcm，rf＝0.2，uv活性)监测反应进程。完成后，将反应混合物减压浓缩；用水(50ml)稀释；并用etoac(2
×
250ml)洗涤以除去杂质。将水层用hcl水溶液(1m)调节至ph 2-3，然后用etoac(3
×
1000ml)萃取。将合并的有机物用无水na2so4干燥；过滤；并减压浓缩，得到2-(3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸，其为灰白色固体，14g(98％)。lcms m+h＝265.15.
[0088]
分离得到2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸和2-((3br,4as)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸
[0089][0090]
将2-(3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸(5.5g)溶解于异丙醇(20ml)中。将该溶液按如下分批进行sfc手性分离：仪器＝thar 80；柱＝chiralpak ic 30x250mm，5微米；溶剂a＝超临界co2；溶剂b＝含有0.5％异丙胺(v/v)的异丙醇；洗脱剂组成＝70％a：30％b；流速＝65g/min；背压＝100巴；温度＝30℃；进样量＝2.5ml；检测＝220nm。收集2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸在7.5分钟至14分钟的洗脱峰；收集2-((3br,4as)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸在2.7分钟至5.8分钟的洗脱峰。对于每种对映异构体，将所得溶液进行减压浓缩并将所得固体溶解于etoac中，然后依次用柠檬酸水溶液(1m)、水和盐水洗涤两次。将有机溶液经na2so4干燥；过滤；然后真空浓缩，得到分离的对映异构体，回收率为80-90％。
[0091]
n-(7-氨基-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基)-n-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺的制备
[0092]
[0093]
合成方案：
[0094][0095]
步骤1：2,6-二氯-3-硝基苯甲醛的制备
[0096][0097]
在低于15℃向圆底烧瓶中的硫酸(h2so4)(5.63l，4.5v)溶液(0-5℃)中分批加入2,6-二氯苯甲醛(1.25kg，7.10mol，1.0当量)。将反应物料在0-5℃搅拌30分钟。在低于10℃，将新鲜制备的硝化混合物的溶液[由浓h2so4(0.425l，0.34v)和70％hno3(0.85kg，13.49mol，1.30当量)在0℃制备]加入到上述反应混合物中[注意：反应轻微放热(3-6℃)；因此优选在较低温度添加]。将反应混合物在5-10℃搅拌2-3小时。在反应完成后(通过tlc监测)，在低于25℃用冰冷水(18.75l，15v)淬灭。然后将反应物料温热至室温并搅拌2小时。将固体通过过滤分离，然后用水(2.5l，2.0v)洗涤。通过保持真空过滤60-90分钟从固体中除去大量残余水。将粗品湿固体先在空气气氛下干燥；然后在热风烘箱中在50-55℃干燥10-12小时(直至水分含量不超过5.0％)，得到干燥的标题产物2,6-二氯-3-硝基苯甲醛(1.44kg，92％收率)，其为黄色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)：δ10.44(s,1h),7.88(d,j＝8.4hz,1h),7.56(d,j＝8.8hz,1h).
[0098]
步骤2：2，6-二氯-3-硝基苄腈的制备
[0099][0100]
(步骤-2a)在室温向圆底烧瓶中的dmso(5.9l，5.0v)溶液中加入2,6-二氯-3-硝基苯甲醛(1.17kg,5.31mol,1.0当量)。在室温搅拌30分钟后，加入盐酸羟胺(0.63kg，9.04mol，1.70当量)，并将反应物料在室温搅拌3小时。在反应完成后(通过tlc监测)，通过以足以维持温度低于30℃的速率加入冰冷水(18.0l，15.0v)淬灭反应物料(观察：加入水后
形成固体)。将反应物料在室温搅拌60-90分钟。将固体通过过滤分离；用水(2.5l，2.0v)洗涤；然后用丙酮和己烷的混合物(6.0l，1：1比例)洗涤。通过保持真空过滤60-90分钟从固体中除去大量残余水。将湿固体先风干，然后最后在热风烘箱中在50-55℃干燥10-12小时(直到水分含量不超过1.0％)，得到干燥的目标产物2,6-二氯-3-硝基苯甲醛肟(1.22kg,92％收率)，其为灰白色固体。粗产物(其含有10-20％的2,6-二氯-3-硝基苄腈)无需进一步纯化直接用于下一步。
[0101]
(步骤-2b)在0-5℃，向粗品肟(上述制备，1.13kg，4.80mol，1.0当量)在dcm(9.04l，8.0v)中的搅拌溶液中加入三乙胺(“tea”，1.02kg，10.09mol，2.1当量)。搅拌5分钟后，在15℃缓慢加入甲磺酰氯(0.60kg，5.29mol，1.1当量)(观察：在添加过程中注意到放热)。然后将反应物料在室温搅拌30-45分钟。反应完成后(通过tlc监测反应进程；流动相：20％乙酸乙酯的己烷溶液)，将反应物料用水(6.78l，6.0v)稀释；将有机层分离；并将水层用dcm(3.4l，3.0v)萃取。将合并的有机层用盐水(5.65l，5.0v)洗涤；经na2so4干燥；并真空浓缩。将所得粗品固体在室温与己烷(4.50l，4.0v)一起研磨。将湿物质在热风烘箱中在50-55℃干燥5-6小时，得到干燥产物2,6-二氯-3-硝基苄腈(0.95kg,91％收率)，其为黄色固体。1h nmr(400mhz,cdcl3)：δ8.07(d,j＝8.8hz,1h),7.63(d,j＝8.8hz,1h).
[0102]
步骤3：4-氯-7-硝基-1h-吲唑-3-胺的制备
[0103][0104]
在15-20℃向2,6-二氯-3-硝基苄腈(750.0g,3.45mol,1.0当量)在乙醇(7.5l，10.0v)中的搅拌溶液中缓慢加入水合肼(519.0g,10.36mol,3.0当量)，同时保持反应物料低于25℃(观察：添加时会轻微放热，添加后将开始形成固体)。将反应混合物温度缓慢升至室温，然后将混合物搅拌3小时(观察：在此过程中固体的量将增加)。反应完成后(通过tlc监测)，将混合物用水(7.5l，10.0v)稀释并在室温进一步搅拌1小时。将固体通过过滤分离，然后用水(2.25l，3.0v)洗涤。将湿固体用1：1比例的丙酮(1.875l，2.5v)和己烷(1.875l，2.5v)的混合物洗涤。通过保持真空过滤60-90分钟从固体中除去大量残余水。最后将湿固体在热风烘箱中在50℃干燥7-8小时(直到水分含量达到低于1.5％)，得到干燥产物4-氯-7-硝基-1h-吲唑-3-胺(549.0g,75％收率)，其为砖红色固体。1h nmr(400mhz,cdcl3)：δ10.36(bs,1h),8.20(d,j＝8.4hz,1h),7.07(d,j＝8.40hz,1h),4.73(bs,2h).
[0105]
步骤4：4-氯-1-甲基-7-硝基-1h-吲唑-3-胺的制备
[0106][0107]
在5-10℃向4-氯-7-硝基-1h-吲唑-3-胺(500g,0.42mol,1.0当量)在dmf(5.0l，10.0v)中的搅拌溶液中缓慢加入碳酸铯(cs2co3)(1.91kg，5.88mol，2.5当量)，同时保持反应物料低于10℃。搅拌5-10分钟后，加入硫酸二甲酯(326.3g，2.59mol，1.1当量)，同时保持反应物料低于10℃(注意：为了获得更有利的区域选择性，优选缓慢添加)。然后，将反应温度缓慢升至室温，并在相同温度再继续搅拌2小时。反应完成后(通过tlc监测)，通过加入冰
冷的水(15.0l，30.0v)淬灭反应物料，然后将所得混合物在室温搅拌6-8小时。将固体通过过滤分离，然后用水(1.5l，3.0v)洗涤。将湿固体用ipa(1.5l，3.0v)洗涤，然后用己烷(1.0l，2.0v)洗涤。通过保持真空过滤60-90分钟从固体中除去大量残余水。将湿固体在热风烘箱中在50℃干燥7-8小时(直至水分含量低于1.0％)。分离的物质4-氯-1-甲基-7-硝基-1h-吲唑-3-胺(319.0g,60％收率)无需进一步纯化即可用于下一步。1h nmr(400mhz,cdcl3)：δ7.97(d,j＝8.32hz,1h),6.97(d,j＝8.24hz,1h),4.63(bs,2h),3.96(s,3h).
[0108]
步骤5：n-(4-氯-1-甲基-7-硝基-1h-吲唑-3-基)甲磺酰胺的制备
[0109][0110]
(步骤5a)在0-5℃向4-氯-1-甲基-7-硝基-1h-吲唑-3-胺(625.0g,2.76mol,1.0当量)的dcm(6.25l，10.0v)溶液中加入三乙胺(tea)(837.0g，8.27mol，3.0当量)；然后加入4-二甲基氨基吡啶(dmap)(20.60g,0.165mol,0.06当量)。将反应物料搅拌5-10分钟，然后缓慢加入甲磺酰氯(mscl)(790.0g,6.89mol,2.5当量)，同时保持反应物料低于10℃。将反应混合物温热至室温，然后搅拌1.5-2.0小时。反应完成后(通过tlc监测)，将混合物用水(6.25l，10.0v)稀释，然后在室温搅拌15分钟。将有机层分离，并将水层用dcm(6.25l，10.0v)萃取。将合并的有机层用盐水(1.25l，2.0v)洗涤，经na2so4干燥并浓缩，得到粗品固体。将固体在室温与己烷(1.25l，2.0v)一起研磨，得到中间体n-(4-氯-1-甲基-7-硝基-1h-吲唑-3-基)-n-(甲磺酰基)甲磺酰胺，将其直接用于下一步。
[0111]
(ii)在室温，向n-(4-氯-1-甲基-7-硝基-1h-吲唑-3-基)-n-(甲磺酰基)甲磺酰胺(如上制备)在乙醇(10.5l，20.0v)中的搅拌溶液中缓慢加入5％naoh水溶液(4.38l，7.0v)[注：优选通过滴液漏斗缓慢添加]。将反应物料在相同温度搅拌3小时。反应完成后(通过tlc监测)[tlc分析的样品制备：将～1.0ml样品用2.0n hcl水溶液酸化至达到ph：2-3，用乙酸乙酯萃取，将有机层进行tlc分析]，将反应物料冷却至0-5℃并通过加入2.0n hcl水溶液(3.13l，5.0v)将ph调节至2-3，同时保持反应温度低于10℃[注意：在加入hcl时发生沉淀并随着搅拌而增加]。将反应混合物温热至室温，然后搅拌1.5-2.0小时。将所得固体通过过滤分离，然后用水(1.25l，2.0v)洗涤；然后用己烷(1.25l，2.0v)洗涤。通过保持真空过滤60-90分钟从固体中除去大量残余水。将湿物质在热风烘箱中在50℃干燥6-7小时(直到水分含量低于1.0％)，得到干燥产物n-(4-氯-1-甲基-7-硝基-1h-吲唑-3-基)甲磺酰胺(640.0g,76％)，其为黄色固体。1hnmr(400mhz,cdcl3)：δ8.05(d,j＝8.32hz,1h),7.32(bs,1h),7.17(d,j＝8.28hz,1h),4.15(s,3h),3.45(s,3h).
[0112]
步骤6：n-(4-氯-1-甲基-7-硝基-1h-吲唑-3-基)-n-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺的制备
[0113][0114]
在室温，向n-(4-氯-1-甲基-7-硝基-1h-吲唑-3-基)甲磺酰胺(635.0g,2.08mol,
1.0当量)和1-(氯甲基)-4-甲氧基苯(359.0g,2.30mol,1.1当量)在dmf(6.35l，10.0v)中的混合物中加入碳酸钾(374.7g，2.70mol，1.3当量)。将反应混合物加热至80-90℃并在该温度保持3小时。反应完成后(通过tlc监测)，将混合物倒入冰冷的水(19.05l，30.0v)中[注意：优选在剧烈搅拌下缓慢淬灭以避免产物沉淀时结块]。将所得固体通过过滤分离并用水(1.90l，3.0v)洗涤；然后用己烷(1.27l，2.0v)洗涤固体。通过保持真空过滤60-90分钟从固体中除去大量残余水。将分离的固体溶解于乙酸乙酯(12.7l，20.0v)中并加入木炭(63.5g)。将混合物加热至60-70℃，然后在该温度搅拌30-45分钟。将混合物趁热(40-50℃)通过硅藻土垫过滤，然后用乙酸乙酯(3.17l，5.0v)萃取硅藻土垫。将合并的滤液在低于50℃减压浓缩至干。在室温将乙酸乙酯(0.635l，1.0v)加入固体。将所得固体悬浮液搅拌30分钟。将固体通过过滤分离，然后用己烷(1.27l，2.0v)洗涤。通过保持真空过滤45-60分钟从固体中除去残余的水，得到产物n-(4-氯-1-甲基-7-硝基-1h-吲唑-3-基)-n-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺(705.0g,80％收率)，其为黄色固体。1h nmr(400mhz,cdcl3)：δ7.99(d,j＝8.24hz,1h),7.27(d,j＝8.68hz,2h),7.19(d,j＝8.24hz,1h),6.80(d,j＝8.44hz,2h),4.95-4.76(m,2h),4.17(s,3h),3.76(s,3h),3.01(s,3h).
[0115]
步骤7：n-(7-氨基-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基)-n-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺的制备
[0116][0117]
在室温，向锌粉(540.0g，8.23mol，10.0当量)在thf(3.50l，10.0v)和水(7.0l，20.0v)的混合物中的搅拌悬浮液中加入氯化铵(nh4cl)(449.0g，8.23mol，10.0当量)。向混合物中加入n-(4-氯-1-甲基-7-硝基-1h-吲唑-3-基)-n-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺(350g，0.823mol，1.0当量)的thf(7.0l，20.0v)溶液。将反应混合物在室温搅拌3-4小时。反应完成后(通过过程中tlc/hplc监测)，将混合物用乙酸乙酯(3.5l，10.0v)和水(1.12l，2.5v)稀释。将混合物搅拌15分钟。将反应物料通过硅藻土垫过滤，用乙酸乙酯(1.75l，5.0v)洗涤。收集双相滤液，并分离各相。将水层用乙酸乙酯(3.50l，10.0v)萃取。将合并的有机层用盐水(3.50l，10v)洗涤，经na2so4干燥，然后真空浓缩，得到粗品固体。向粗产物中加入mtbe(3.25l，10v)，并将悬浮液在室温搅拌30分钟。将固体通过过滤分离。通过保持真空过滤30-45分钟从固体中除去大量残余水。将湿产物在热风烘箱(50℃)中干燥2小时，得到标题产物n-(7-氨基-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基)-n-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺(276.0g,85％收率)，其为灰白色固体。1h nmr(400mhz,cdcl3)：δ7.29-7.26(m,2h),6.86-6.79(m,2h),6.42(d,j＝7.80hz,1h),4.99-4.70(m,2h),4.25(s,3h),3.77(s,5h),2.98(s,3h).
[0118]
2-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲酸的制备：
[0119][0120]
合成方案：
[0121][0122]
步骤1：4-溴-2-硝基苯甲酸甲酯的制备
[0123]
在0℃下，向搅拌的4-溴-2-硝基苯甲酸(500g，2032mmol)的甲醇(2000ml)溶液中添加硫酸(500ml，9381mmol)。将溶液在70℃下搅拌4小时。通过tlc(sio2，30％etoac/石油醚，rf＝0.3)监测反应进程。在反应完成后，使反应物料冷却至室温，然后减压浓缩以移除甲醇。将所得的残余物倾注到水(1000ml)中，并经由添加无水碳酸钠将ph调节至ph 9。用乙酸乙酯(2
×
1000ml)萃取混合物。将合并的有机物用水(500ml)，然后用盐水溶液(500ml)洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过滤，然后减压浓缩，得到呈灰白色固体的4-溴-2-硝基苯甲酸甲酯(520g，94％)。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ＝8.04
–
7.99(m,1h),7.85
–
7.78(m,1h),7.66(d,j＝8.2hz,1h),3.92(s,3h).lcms纯度＝95.2％。产物直接用于下一步骤而无需进一步纯化。
[0124]
步骤2：2-氨基-4-溴苯甲酸甲酯的制备
[0125]
在0℃和氮气气氛下，向搅拌的锌粉(704g，10.8mol)的水(2000ml)溶液中缓慢添加4-溴-2-硝基苯甲酸甲酯(400g，1538mmol)的四氢呋喃(thf)(4000ml)溶液，继之以乙酸(1057ml，18.5mol)。将反应混合物在27℃下搅拌4小时。通过tlc(sio2，20％etoac/石油醚，rf＝0.4)监测反应进程。完成后，将反应混合物过滤通过硅藻土垫，并将硅藻土垫用etoac(2000ml)萃取。使合并的滤液减压浓缩。将所得的残余物用水(3000ml)稀释并用etoac(2
×
4000ml)萃取。将合并的有机物用饱和na2co3溶液(2
×
3000ml)，然后用盐水(2
×
2000ml)洗涤。有机层经无水na2so4干燥，过滤，然后减压浓缩，得到呈灰白色固体的2-氨基-4-溴苯甲
酸甲酯(350g，94％)。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ＝7.76
–
7.65(m,1h),6.84(d,j＝1.9hz,1h),6.78
–
6.72(m,1h),5.91
–
5.63(m,2h),3.86(s,3h).lcms纯度＝95.0％。产物直接用于下一步骤而无需进一步纯化。
[0126]
步骤3：2-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲酸甲酯的制备
[0127][0128]
向搅拌的2-氨基-4-溴苯甲酸甲酯(350g，1521mmol)的1,4-二噁烷(7000ml)溶液中添加双(频哪醇合)二硼(522g，2054mmol)和乙酸钾(597g，6085mmol)。通过将n2气体鼓泡通入混合物10分钟使反应混合物脱气。向反应混合物中添加pdcl2(dppf)(78g，106mmol)。将混合物在90℃下搅拌4小时。通过tlc监测反应进程。在反应完成后，使混合物冷却至室温。向混合物中添加2-氯-6-(三氟甲基)吡啶(359g，1978mmol)、磷酸三钾(1130g，5325mmol)和水(1190ml)。经由氮气鼓泡10分钟使混合物脱气。向混合物中添加pdcl2(dppf)(78g，106mmol)。将反应混合物在60℃下搅拌16小时。通过tlc(sio2，20％etoac/石油醚rf＝0.4)监测反应进程。完成后，将反应混合物过滤通过硅藻土，然后将硅藻土垫用乙酸乙酯(2000ml)萃取。使合并的滤液减压浓缩，得到呈褐色液体的粗产物(550g)。经由硅胶色谱法用5-30％etoac/石油醚洗脱来纯化该材料。将含有期望产物的级分汇集并减压浓缩。将分离的材料用正戊烷(2200ml)洗涤，并将固体经由过滤收集，然后在真空下干燥，得到呈灰白色固体的2-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲酸甲酯(380g，83％)。1h nmr(氯仿-d)δ:7.99(d,j＝8.3hz,1h),7.92-7.98(m,2h),7.67(dd,j＝6.9,1.5hz,1h),7.49(d,j＝1.5hz,1h),7.27(dd,j＝8.3,1.8hz,1h),5.90(br s,2h),3.93(s,3h).lcms纯度＝98.25％。
[0129]
步骤4：2-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲酸的制备：
[0130]
在0℃和氮气气氛下，向搅拌的2-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲酸甲酯(650g，2194mmol)在四氢呋喃(thf)(5000ml)和水(2167ml)中的溶液中添加氢氧化锂一水合物(369g，8776mmol)。将反应混合物在70℃下搅拌16小时。通过tlc(sio2，50％etoac/石油醚，rf＝0.4)监测反应进程。完成后，将反应混合物减压浓缩，然后使所得的残余物溶解于水(5000ml)中并经由添加3n hcl(3000ml)酸化至ph 4。将所得的沉淀经由过滤收集，并用水(4000ml)，然后用正己烷(5000ml)洗涤，然后干燥，得到呈灰白色固体的2-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲酸(581g，93％)。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝8.18(d,j＝4.0hz,2h),7.92
–
7.88(m,1h),7.84(d,j＝8.3hz,1h),7.54(d,j＝1.7hz,1h),7.22(d,j＝8.4,1.8hz,1h).lcms纯度＝99.62％。
[0131]
实施例1的制备：n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-7-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊
二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺.
[0132][0133]
合成方案：
[0134][0135]
步骤1：(s)-(1-(3-(4-氯-3-(n-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-7-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0136]
在氮气气氛和27℃下，向搅拌的(s)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸(91g，301mmol)和2-氨基-4-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)苯甲酸(94g，332mmol)的乙腈(3.8l)溶液中添加吡啶(0.059l，724mmol)。将所得的混合物冷却至-9℃保持10分钟，然后
在10分钟内滴加2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三膦烷2,4,6-三氧化物(“t3p”，50重量％于etoac中，0.888l，1507mmol)。将该溶液在-9℃和n2气氛下搅拌2.1小时。在-9℃下，向该溶液中添加n-(7-氨基-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基)-n-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺(120g，301mmol)，然后将溶液温热至-5℃，并且在搅拌下在该温度下维持1小时。然后允许反应物料缓慢温热至27℃，然后在该温度下搅拌16小时。通过tlc(sio2，50％etoac/石油醚，rf＝0.5)监测反应进程。完成后，将反应混合物减压浓缩，并使所得的残余物溶解于etoac(5000ml)中，然后用1nnaoh溶液(2000ml)，继之以盐水(1000ml)洗涤。有机层经na2so4干燥，过滤，然后减压浓缩，得到粗产物，通过硅胶色谱法用30-35％etoac/石油醚洗脱对其进行纯化。将含有期望产物的级分汇集，并减压浓缩，得到作为纯手性阻转异构体的混合物(非对映体)的(s)-(1-(3-(4-氯-3-(n-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-7-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(252g，88％，灰白色固体)。
[0137]
步骤2：(s)-n-((6p)-7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-4-氧代-7-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)二氢喹唑啉-3(4h)-基)-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基)甲磺酰胺的制备
[0138]
在27℃下，向搅拌的(s)-(1-(3-(4-氯-3-(n-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-7-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(97％纯度，252g，264mmol)的tfa(815ml，10.6mol)溶液中添加三氟甲磺酸(70.4ml，793mmol)。将该溶液在氮气气氛下搅拌2小时。通过tlc(sio2，50％etoac/石油醚，rf＝0.2)监测反应进程。完成后，在温和的氮气流下移除挥发物。使残余物溶解于etoac(5000ml)中，然后用1n naoh溶液(2000ml)，继之以盐水(1500ml)洗涤。有机层经na2so4干燥，过滤，然后减压浓缩，得到粗产物，通过硅胶色谱法用含5-15％meoh的dcm洗脱对其进行纯化。将含有期望产物的级分汇集，并减压浓缩，得到作为纯手性阻转异构体的混合物(非对映体)的(s)-n-(7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-4-氧代-7-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)二氢喹唑啉-3(4h)-基)-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基)甲磺酰胺(180g，95％，灰白色固体)。将该材料溶解于甲醇:乙腈(40:60，3000ml)中，然后使用以下方法通过制备型sfc进行纯化：柱＝(r,r)welk-01，30
×
250mm，5μ；洗脱剂＝co2:甲醇(1:1)；流速＝90.0g/分钟；背压＝120.0巴；检测＝254nm(uv)；重合时间(stack time)＝8.8分钟；每次注射的加载量＝700mg。sfc分离产生两个峰，这两个峰单独收集。使主峰(洗脱的第二个峰)减压浓缩，得到呈灰白色固体的(s)-n-((6p)-7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-4-氧代-7-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)二氢喹唑啉-3(4h)-基)-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基)甲磺酰胺(100g，54％)。产物是单一立体异构体。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝8.64
–
8.55(m,2h),8.44
–
8.25(m,3h),8.01(d,j＝7.7hz,1h),7.42
–
7.31(m,2h),7.07
–
6.95(m,1h),6.76(dd,j＝2.0,8.5hz,2h),3.70(s,3h),3.59(dd,j＝4.8,8.2hz,1h),3.35(br d,j＝4.8hz,1h),3.17(d,j＝5.1hz,3h),2.92
–
2.83(m,1h).lcms纯度＝99％。
[0139]
步骤3：n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-7-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺的制备：
[0140]
在27℃下，向搅拌的(s)-n-((6p)-7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-4-氧
代-7-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)二氢喹唑啉-3(4h)-基)-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基)甲磺酰胺(45g，63.9mmol)的dmf(450ml)溶液中添加2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸(20.26g，77mmol)，继之以n-(3-二甲氨基丙基)-n
′‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(“edc-hcl”，14.70g，77mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(“hobt水合物”，11.75g，77mmol)和n-甲基吗啉(28.1ml，256mmol)。将反应物料在27℃下搅拌24小时。通过tlc(sio2，50％etoac/石油醚，rf＝0.5)监测反应进程。完成后，将反应物料用冰水(1.5l)稀释，并将所得的沉淀经由过滤收集，然后在真空下干燥，得到呈灰白色固体的粗产物(59g)。将该粗产物与通过以相同规模重复该程序而生成的另一批粗产物(61g)共混。将120g的粗产物一起通过硅胶色谱法用20-40％etoac/石油醚洗脱来纯化。将含有期望产物的级分汇集并减压浓缩，得到纯化产物。通过使用研钵和研杵研磨化合物，然后使微细固体在50℃烘箱中维持约2小时来移除痕量etoac残余物；再重复该研磨和加热过程4次，直到etoac含量下降到低于4000ppm，得到呈灰白色固体的n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-7-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺(85.7g，79％)。1h nmr(丙酮-d6)δ:8.60(t,j＝1.0hz,1h),8.58(s,1h),8.48(d,j＝8.0hz,1h),8.39(d,j＝0.9hz,2h),8.32(t,j＝7.9hz,1h),8.16(d,j＝8.6hz,1h),7.95-7.99(m,1h),7.49(d,j＝7.7hz,1h),7.37(d,j＝8.0hz,1h),6.86(tt,j＝9.3,2.3hz,1h),6.70-6.76(m,2h),6.77(t,j＝54.7hz,1h),4.93(td,j＝9.0,4.6hz,1h),4.63-4.74(m,2h),3.69(s,3h),3.55(dd,j＝14.2,4.6hz,1h),3.28(s,3h),3.15(dd,j＝14.2,9.4hz,1h),2.42-2.51(m,2h),1.37-1.43(m,1h),0.95-1.00(m,1h).lcms分析方法：柱：acquity beh c18，2.1
×
50mm，1.7μm粒子；溶剂a＝含0.1％甲酸的水；溶剂b＝含0.1％甲酸的乙腈；流速＝0.6ml/分钟；梯度{时间点(分钟)/时间点的％b(％)}＝0/3，0.4/3，7.5/98，9.5/98，9.6/3，10/3；柱温＝35℃。lcms结果：保留时间＝5.57分钟；观察到的离子＝949.98(m+h)；lcms纯度＝99.4％。
[0141]
实施例1的命名：
[0142]
如上所制备的实施例1的化合物是含有轴向手性的纯手性材料。轴向手性可使用如iupac gold book(doi:10.1351/goldbook.a00547)中所详述的p/m命名法来描述。然而，此时只有有限数量的能够生成含有p/m命名法的化学名的软件工具是可用的，并甚至较少的选项可用于将使用该命名法的化学名转化为分子的结构表示。因此，为了清楚和方便，下面提供了实施例1的几个名称：
[0143]
如由chemdraw professional 16(不存在p/m命名法)生成的实施例1的名称为：
[0144]
n-((s)-1-(3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-7-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺
[0145]
如由jchem for excel(包括p/m命名法)生成的实施例1的化学名为：
[0146]
n-[(1s)-1-[3-(4-氯-3-甲磺酰胺基-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-7-[6-(三氟甲基)吡啶-2-基]-3,4-二氢喹唑啉-2-基]-2-(3,5-二氟苯基)乙基]-2-[(2s,4r)-9-(二
氟甲基)-5,5-二氟-7,8-二氮杂三环[4.3.0.02,4]壬-1(6),8-二烯-7-基]乙酰胺
[0147]
通过chemdraw professional 16采用手动添加的p/m命名法生成的实施例1的化学名称为：
[0148]
n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-7-(6-(三氟甲基)吡啶-2-基)-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺
[0149]
2-氨基-4-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)苯甲酸的制备：
[0150][0151]
合成方案：
[0152][0153]
步骤1：2-氨基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯甲酸甲酯的制备
[0154]
在氩气下，将2-氨基-4-溴苯甲酸甲酯(10g，43.5mmol)、4,4,4',4',5,5,5',5'-八甲基-2,2'-二(1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷)(11.04g，43.5mmol)、pdcl2(dppf)(1.590g，2.173mmol)和乙酸钾(12.80g，130mmol)在1,4-二噁烷(100ml)中的混合物于97℃加热2小时。使混合物冷却至室温，然后用dcm稀释。将有机层用水，继之以盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤，并减压浓缩，得到粗产物。经由硅胶色谱法(330g柱，5-30％etoac:hex)纯化粗产物，得到呈黄色固体的产物2-氨基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯甲酸甲酯(9.2g，76％)。1h nmr(500mhz,cdcl3)δppm 7.86(d,j＝8.05hz,1h),7.14(s,1h),7.06(dd,j＝7.90,1.04hz,1h),5.67(br s,2h),3.89(s,3h),1.37(s,12h).
[0155]
步骤2：2-氨基-4-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)苯甲酸甲酯的制备
[0156]
在圆底烧瓶中合并2-氨基-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼杂环戊烷-2-基)苯甲酸甲酯(14.8g，53.4mmol)、2-氯-4-(二氟甲基)嘧啶(8.79g，53.4mmol)、pdcl2(xantphos)(2.019g，2.67mmol)和碳酸钾(22.14g，160mmol)。将烧瓶用橡胶隔片密封，并且向烧瓶中添加1,4-二噁烷(200ml)和水(50.0ml)。然后用氩气回填烧瓶(真空，然后用氩气回填3次)。将混合物在60℃下搅拌3.5小时。使混合物冷却至室温并在减压下移除挥发性有机物，得到含水混合物。使浆料吸收在etoac(300ml)中，然后用水(400ml)进一步稀释。将混
合物混合，然后过滤通过硅藻土垫，以移除不溶解性材料。然后，将有机层分离并用盐水洗涤，经mgso4干燥，过滤并减压浓缩。使残余物吸收在最少量的etoac(100ml)中，然后与硅藻土混合并减压浓缩，得到流动性良好的粉末。将该粉末分成三等份，使每份经受反相色谱法(415g redisep gold c18柱)，用(95:5水:mecn+0.1％甲酸):(95:5mecn:水+0.1％甲酸)25:75
→
0:100洗脱。将含有期望产物的级分汇集并在减压下部分浓缩，得到含水混合物。将浆料与etoac混合，并且通过添加5n naoh水溶液使水层呈微碱性(ph 8)。将混合物混合，然后将有机层分离，并用盐水洗涤，经mgso4干燥，并减压浓缩，得到呈深黄色固体的产物2-氨基-4-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)苯甲酸甲酯(10.2g，68％)。1h nmr(500mhz,cdcl3)δppm 9.02(br d,j＝4.77hz,1h),8.01(d,j＝8.34hz,1h),7.86(s,1h),7.76(br d,j＝8.35hz,1h),7.55(br d,j＝4.77hz,1h),6.52-6.78(m,1h),5.88(br s,2h),3.94(s,3h).lcms方法g：保留时间＝2.66分钟；观察到的离子＝321.1(m+mecn)。
[0157]
步骤3：2-氨基-4-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)苯甲酸的制备
[0158]
向2-氨基-4-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)苯甲酸甲酯(12g，43.0mmol)在甲醇(50ml)和thf(50.0ml)中的溶液中添加5n氢氧化钠水溶液(25.8ml，129mmol)，然后将混合物在60℃下搅拌1小时，此时lcms分析指示反应完成。使混合物冷却至室温，然后向混合物中添加1m hcl水溶液(129ml，129mmol)。向浓稠黄色浆料中添加etoac(250ml)和水(150ml)，此时黄色浆料部分溶解；有机层是浑浊的，而水层看起来是均一的。将有机层用盐水洗涤并仍然浑浊。分离有机层并加热，直到混浊的混合物变成澄清的黄色溶液。将溶液经mgso4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈黄色固体的产物2-氨基-4-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)苯甲酸(11.3g，99％)。1h nmr(500mhz,cd3od)δppm 9.06(d,j＝5.07hz,1h),7.96(d,j＝8.35hz,1h),7.93(d,j＝1.19hz,1h),7.67(dd,j＝8.49,1.64hz,1h),7.64(d,j＝5.07hz,1h),6.66-6.91(m,1h).lcms方法g：保留时间＝2.14分钟；观察到的离子＝307.0(m+mecn)。
[0159]
2-氨基-4-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)苯甲酸的另选制备：
[0160][0161]
合成方案：
[0162][0163]
4-溴-2-硝基苯甲酸甲酯的制备：
[0164]
该化合物通过遵循wo 2005037796和j.am.chem.soc.,2018,140(33),10553
–
10561报道的程序以200g规模进行制备。
[0165]
步骤1：4-氰基-2-硝基苯甲酸甲酯的制备
[0166]
在氮气和27℃下，向搅拌的4-溴-2-硝基苯甲酸甲酯(340g，1307mmol)的dmf(3000ml)溶液中添加氰化亚铜(i)(234g，2615mmol)。然后将反应混合物在150℃下搅拌5小时。通过tlc(sio2，20％etoac/石油醚，rf＝0.6，uv活性)监测反应进程。完成后，允许反应混合物冷却至27℃。将反应混合物倾注到etoac(5000ml)中，并将所得的混合物用5％乙二胺水溶液(5000ml)洗涤，以移除铜盐。然后将有机溶液用冰冷水(3
×
3000ml)，继之以冰冷盐水(3000ml)洗涤。有机层经na2so4干燥，过滤，并减压浓缩，得到呈褐色固体的280g(83％)4-氰基-2-硝基苯甲酸甲酯。产物直接用于下一步骤而无需进一步纯化。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ＝8.37(d,j＝1.6hz,1h),7.97(dd,j＝7.9,1.6hz,1h),7.87(d,j＝7.9hz,1h),3.97(s,3h).注意：进一步优化后处理过程以避免过滤的需要：将反应混合物倾注到etoac(5000ml)中，并将所得的混合物用5％乙二胺水溶液(5000ml)洗涤，以移除铜盐。然后将有机溶液用冰冷水(3
×
3000ml)，继之以冰冷盐水(3000ml)洗涤。其余过程与以上描述的相同。
[0167]
步骤2：4-甲脒基-2-硝基苯甲酸甲酯盐酸盐的制备
[0168]
在氮气下，向搅拌的4-氰基-2-硝基苯甲酸甲酯(280g，1358mmol)的meoh(4000ml)溶液中添加甲醇钠(44.0g，815mmol)，并然后将反应混合物在27℃下搅拌16小时。向反应混合物中添加氯化铵(72.6g，1358mmol)，然后将反应混合物在27℃下搅拌18小时。通过tlc(sio2，80％etoac/石油醚，rf＝0.1，uv活性)监测反应进程。完成后，使反应混合物过滤，并将滤饼用含10％meoh的dcm(3
×
1000ml)萃取。使合并的滤液减压浓缩，获得呈胶状固体的粗产物。将该材料用etoac(1000ml)研磨，得到呈黄色固体的250g(56％)4-甲脒基-2-硝基苯甲酸甲酯盐酸盐。产物直接用于下一步骤而无需进一步纯化。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝9.01(br s,3h),8.50(d,j＝1.6hz,1h),8.23(dd,j＝7.9,1.6hz,1h),8.08(d,j＝7.9hz,1h),3.91(s,3h).lcms纯度＝79％。
[0169]
(e)-4-乙氧基-1,1-二氟丁-3-烯-2-酮的制备：
[0170][0171]
在1小时内，在0℃下向搅拌的2,2-二氟乙酸酐(179ml，1436mmol)的dcm(1250ml)溶液中滴加吡啶(128ml，1580mmol)与乙氧基乙烯(165ml，1724mmol)的混合物。允许反应混合物温热至27℃，然后搅拌12小时。通过添加冰冷水(1000ml)淬灭反应混合物。将有机层分离并用饱和nahco3水溶液(1000ml)，然后用盐水(1000ml)洗涤，经na2so4干燥，并过滤。将滤液小心地减压浓缩(压力≥100毫巴；浴温度≤25℃)，得到呈褐色液体的180g(80％)(e)-4-乙氧基-1,1-二氟丁-3-烯-2-酮。粗制化合物直接用于下一步骤而无需进一步纯化。1hnmr(400mhz,cdcl3)δ＝7.84(d,j＝12.4hz,1h),5.89
–
5.63(m,2h),4.06(q,j＝7.0hz,2h),1.39(t,j＝7.0hz,3h).gc-ms纯度＝95％。
[0172]
步骤3：4-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)-2-硝基苯甲酸甲酯的制备
[0173]
在氮气气氛和27℃下，向5l高压釜烧瓶中的搅拌的4-甲脒基-2-硝基苯甲酸甲酯(200g，708mmol)的etoh(2000ml)溶液中添加(e)-4-乙氧基-1,1-二氟丁-3-烯-2-酮(159g，1062mmol)，继之以三乙胺(296ml，2124mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌16小时。通过tlc(sio2，20％etoac/石油醚，rf＝0.5，uv活性)监测反应进程。将反应混合物过滤并使滤液减压浓缩，得到呈褐色液体的220g(58％)4-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)-2-硝基苯甲酸甲酯。产物直接用于下一步骤而无需进一步纯化。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ＝9.07
–
9.00(m,1h),8.80(dd,j＝7.9,1.6hz,1h),7.88(d,j＝7.9hz,1h),7.78
–
7.56(m,1h),7.62(d,j＝4.8hz,1h),6.65(t,j＝54.8hz,1h),3.96(s,3h).hplc纯度：58％。
[0174]
步骤4：2-氨基-4-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)苯甲酸甲酯的制备
[0175]
在27℃下，向搅拌的4-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)-2-硝基苯甲酸甲酯(220g，711mmol)在etoh(2150ml)和水(215ml)中的溶液中添加氯化铵(190g，3557mmol)，继之以铁(199g，3557mmol)。将反应混合物在80℃下搅拌16小时。通过tlc(sio2，20％etoac/石油醚，rf＝0.4，uv活性)监测反应进程。完成后，将反应混合物趁热过滤通过硅藻土垫，然后将硅藻土垫用etoac(4
×
500ml)萃取。使合并的滤液减压浓缩，得到呈黄色固体的230g(64％)2-氨基-4-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)苯甲酸甲酯。产物直接用于下一步骤而无需任何进一步纯化。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ＝8.99(d,j＝4.8hz,1h),7.98(d,j＝8.3hz,1h),7.83(s,1h),7.73(d,j＝8.4hz,1h),7.52(d,j＝4.8hz,1h),6.61(t,j＝54.8hz,1h),3.91(s,3h).lcms纯度＝56％。
[0176]
步骤5：2-氨基-4-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)苯甲酸的制备
[0177]
在27℃下，向搅拌的2-氨基-4-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)苯甲酸甲酯(230g，461mmol)在thf(2300ml)、meoh(575ml)和水(192ml)中的溶液中添加lioh(66.3g，2767mmol)。将反应混合物在50℃下搅拌16小时。通过tlc(sio2，40％etoac/石油醚，rf＝0.1，uv活性)监测反应进程。完成后，允许反应混合物冷却至27℃，然后减压浓缩。使粗制残余物溶解于水(1000ml)中并用etoac(2
×
250ml)洗涤。将水层用1nhcl水溶液酸化至ph～6。将沉淀的固体经由过滤收集，并且用水(500ml)，然后用正戊烷(500ml)洗涤，然后干燥，得到呈黄色固体的80g(63％)2-氨基-4-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)苯甲酸。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝9.15(d,j＝4.8hz,1h),7.87
–
7.84(m,2h),7.74(d,j＝4.8hz,1h),7.53(d,j＝8.4hz,1h),7.06(t,j＝54.2hz,1h).lcms纯度＝96％。
[0178]
实施例2的制备：n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-7-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺
[0179][0180]
合成方案：
[0181][0182]
步骤1：(s)-(1-(3-(4-氯-3-(n-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-7-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的制备
(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺的制备
[0187]
在27℃下，向(s)-n-((6p)-7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-7-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)-4-氧代喹唑啉-3(4h)-基)-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基)甲磺酰胺(50g，61.9mmol)、2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸(16.34g，61.9mmol)和1-羟基苯并三唑水合物(“hobt水合物”，3.79g，24.74mmol)的dmf(500ml)溶液中添加n-甲基吗啉(13.60ml，124mmol)和n-(3-二甲氨基丙基)-n
′‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(21.34g，111mmol)。将反应混合物在27℃下搅拌16小时。通过tlc(sio2，50％etoac/石油醚，rf＝0.5，uv活性)监测反应进程。将反应混合物用冰冷水(7l)稀释，然后搅拌30分钟。将沉淀的固体经由过滤收集，然后在真空下干燥，得到呈灰白色固体的75g粗制化合物。lcms纯度＝60％。将上述程序再重复三次，以产生共185g的粗制n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-7-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺，将其共混，然后经硅胶色谱法用30-40％etoac/石油醚洗脱进行纯化。将含有期望产物的级分收集并减压浓缩，得到呈灰白色固体的期望产物(100g，lcms纯度：97％)。使该材料悬浮于异丙醇(1000ml，10v)中，在70℃下加热30分钟，然后允许在16小时内缓慢冷却至27℃，以产生结晶产物。将所获得的固体经由过滤收集，然后在真空下干燥，得到呈灰白色固体的80g(79％)n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-7-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺。1h nmr(丙酮-d6)δ:9.27(d,j＝5.1hz,1h),8.89(d,j＝1.8hz,1h),8.69(dd,j＝8.3,1.8hz,1h),8.57(br s,1h),8.39(d,j＝8.3hz,1h),8.12(d,j＝8.9hz,1h),7.84(d,j＝5.1hz,1h),7.51(d,j＝7.7hz,1h),7.37(d,j＝8.0hz,1h),7.03(t,j＝54.4hz,1h),6.86(tt,j＝9.2,2.4hz,1h),6.70-6.76(m,2h),6.78(t,j＝54.7hz,1h),4.93(td,j＝9.0,4.6hz,1h),4.65-4.76(m,2h),3.69(s,3h),3.56(dd,j＝14.2,4.6hz,1h),3.27(s,3h),3.15(dd,j＝14.3,9.2hz,1h),2.42-2.53(m,2h),1.37-1.44(m,1h),0.95-1.00(m,1h).lcms方法：柱＝acquity beh c18，2.1
×
50mm，1.7μm粒子；溶剂a＝含0.1％甲酸的水；溶剂b＝含0.1％甲酸的乙腈；流速＝0.6ml/分钟；梯度{时间点(分钟)/时间点的％b(％)}＝0/3，0.4/3，3.2/98，3.8/98，4.2/3，4.5/3；柱温＝35℃。lcms结果：保留时间＝2.73分钟；观察到的离子＝933.09(m+h)；纯度＝99％。
[0188]
实施例2的命名：
[0189]
如上所制备的实施例2的化合物是含有轴向手性的纯手性材料。轴向手性可使用如iupac gold book(doi:10.1351/goldbook.a00547)中所详述的p/m命名法来描述。然而，此时只有有限数量的能够生成含有p/m命名法的化学名的软件工具是可用的，并甚至较少的选项可用于将使用该命名法的化学名转化为分子的结构表示。因此，为了清楚和方便，下面提供了实施例2的几个名称：
[0190]
如由chemdraw professional 16(不存在p/m命名法)生成的实施例2的名称为：
[0191]
n-((s)-1-(3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-7-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺
[0192]
如由jchem for excel(包括p/m命名法)生成的实施例2的化学名为：
[0193]
n-[(1s)-1-[(3p)-3-(4-氯-3-甲磺酰胺基-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-7-[4-(二氟甲基)嘧啶-2-基]-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基]-2-(3,5-二氟苯基)乙基]-2-[(2s,4r)-9-(二氟甲基)-5,5-二氟-7,8-二氮杂三环[4.3.0.02,4]壬-1(6),8-二烯-7-基]乙酰胺
[0194]
通过chemdraw professional 16采用手动添加的p/m命名法生成的实施例2的化学名称为：
[0195]
n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-7-(4-(二氟甲基)嘧啶-2-基)-4-氧代-3,4-二氢喹唑啉-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺
[0196]
3,3-二氟丁-1-醇的制备
[0197][0198]
合成方案：
[0199][0200]
步骤1：苯甲酸3-氧代丁基酯的制备
[0201][0202]
在1小时的时段内，在-70℃和氮气气氛下，向搅拌的苯甲酰氯(0.396l，3405mmol)的dcm(1l)溶液中滴加吡啶(470ml)。在相同温度的下搅拌30分钟后，在1小时的时段内滴加含4-羟基丁-2-酮(250.0g，2837mmol)的dcm(500ml)。允许反应混合物温热至26℃，然后搅拌16小时。通过tlc(sio2，30％etoac/石油醚，rf＝0.4)监测反应进程。完成后，将反应混合物用水(2
×
1000ml)、1n hcl(2
×
500ml)，然后用饱和nahco3溶液(2
×
500ml)洗涤。将有机
层经na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈浅黄色液体的苯甲酸3-氧代丁基酯(400g，收率＝69％)。1h nmr(400mhz,氯仿-d)δ＝8.05-7.94(m,2h),7.60-7.51(m,1h),7.47-7.36(m,2h),4.65-4.54(t,2h),2.97-2.84(t,2h),2.28-2.13(s,3h).hplc纯度＝94.1％。
[0203]
步骤2：苯甲酸3,3-二氟丁基酯的制备
[0204][0205]
在1小时的时段内，在0℃和氮气气氛下，向搅拌的苯甲酸3-氧代丁基酯(90g，427mmol)的二氯甲烷(700ml)溶液中滴加dast(677ml，5125mmol)。使反应混合物温热至26℃并搅拌16小时。通过tlc(sio2，20％etoac/石油醚，rf＝0.6)监测反应进程。完成后，将反应混合物用dcm(500ml)稀释并缓慢倾注到冷的饱和nahco3(1l)水溶液中。将有机层分离并用盐水溶液(400ml)洗涤，经无水na2so4干燥，过滤并减压浓缩，得到呈黄色液体的粗制化合物(95g)。通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)用含0-5％etoac的石油醚洗脱来纯化该材料。将含有产物的级分收集并减压浓缩，得到呈褐色液体的苯甲酸3,3-二氟丁基酯(60g，收率＝59％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝8.06-8.01(m,2h),7.60-7.54(m,1h),7.48-7.40(m,2h),4.54-4.48(t,2h),2.43-2.29(m,2h),1.77-1.64(m,3h).lcms纯度＝89.74％；m/z＝215.33.
[0206]
步骤3：3,3-二氟丁-1-醇的制备
[0207][0208]
在0℃和氮气气氛下，向搅拌的苯甲酸3,3-二氟丁基酯(100g，467mmol)的thf(800ml)溶液中添加氢氧化锂一水合物(137g，3268mmol)的水(800ml)溶液。允许反应混合物温热至26℃，然后搅拌16小时。通过tlc(sio2，20％etoac/石油醚，rf＝0.6，kmno4活性)监测反应进程。完成后，将反应混合物用二乙醚(400ml)稀释。分离有机层，并再次用二乙醚(300ml)萃取水层。将合并的有机物用盐水(200ml)洗涤，经na2so4干燥，过滤并减压浓缩(挥发性产物，浴温度＝25℃)，得到呈黑色液体的粗制化合物。将该材料用二乙醚(100ml)稀释并用木炭处理。使混合物过滤通过硅藻土垫。将硅藻土垫用二乙醚(200ml)萃取。将合并的滤液减压浓缩(挥发性产物，浴温度＝25℃)，得到呈浅黄色液体的3,3-二氟丁-1-醇(40g，收率＝71％)。1h-nmr(400mhz,cdcl3)δ＝3.87(t,j＝6.1hz,2h),2.22-2.07(m,2h),1.73-1.57(m,3h).gcms纯度＝91.3％；m/z＝110.0.
[0209]
2-氨基-6-(苄氧基)烟酸的制备
[0210][0211]
合成方案：
[0212][0213]
步骤1：2-氨基-6-(苄氧基)烟酸的制备
[0214][0215]
在26℃和n2气氛下，向搅拌的2-氨基-6-氯烟酸(200g，1159mmol)的苄醇(1400ml，13464mmol)溶液中添加叔丁醇钾(390g，3477mmol)。将反应混合物加热至120℃并在该温度下搅拌16小时。通过tlc(sio2，含10％meoh的dcm，rf＝0.5)监测反应进程。完成后，将反应混合物用水(3l)稀释并用二乙醚(2
×
1000ml)萃取。分离有机层，并将水层用柠檬酸水溶液(0.5m)酸化至ph 4。将沉淀的固体通过过滤收集，然后减压干燥，得到呈灰白色固体的2-氨基-6-(苄氧基)烟酸(220g，收率＝72％)。1h nmr(400mhz,dmso-d6)δ＝12.56-12.32(m,1h),7.97-7.91(m,1h),7.52-7.41(m,2h),7.38-7.11(m,5h),6.03(d,j＝8.5hz,1h),5.39-5.31(m,2h).lcms纯度＝93％；m/z＝245.29(m+h).
[0216]
步骤2：2-氨基-6-(苄氧基)烟酸甲酯的制备
[0217][0218]
在26℃和n2气氛下，向搅拌的2-氨基-6-(苄氧基)烟酸(220g，901mmol)的dmf(2.5l)溶液中缓慢添加碳酸钾(373g，2702mmol)和碘甲烷(0.282l，4504mmol)。将反应混合物在27℃下搅拌16小时。通过tlc(sio2，40％etoac/石油醚，rf＝0.6)监测反应进程。完成后，将反应混合物用水(5l)稀释。将沉淀的固体通过过滤分离，然后在真空下干燥，得到呈灰白色固体的2-氨基-6-(苄氧基)烟酸甲酯(220g，收率＝92％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝8.00(d,j＝8.4hz,1h),7.42
–
7.40(m,2h),7.39
–
7.35(m,2h),7.34
–
7.31(m,1h),6.01(d,j＝8.4hz,1h),5.33(s,2h),3.84(s,3h).lcms纯度＝97％，m/z＝259.30(m+h).
[0219]
步骤3：2-氨基-6-羟基烟酸甲酯的制备
[0220][0221]
在26℃和n2气氛下，向搅拌的2-氨基-6-(苄氧基)烟酸甲酯(50g，190mmol)的dcm(500ml)溶液中缓慢添加tfa(800ml)和三氟甲磺酸(25ml，282mmol)。将反应混合物在26℃下搅拌16小时。通过tlc(sio2，etoac，rf＝0.2)监测反应进程。完成后，在真空下移除挥发物，得到粗产物。将该材料用二乙醚(3
×
1000ml)研磨，并然后通过过滤分离沉淀的固体。向固体中添加水(2l)，然后使混合物保持5小时。将固体通过过滤收集并用水洗涤。在真空下干燥固体，得到呈灰白色固体的2-氨基-6-羟基烟酸甲酯(25g，收率＝78％)。1h nmr(300mhz,dmso-d6)δ＝10.92
–
10.76(m,1h),7.65(d,j＝9.5hz,1h),7.43
–
6.87(m,2h),5.51(d,j＝9.5hz,1h),3.69(s,3h).lcms纯度＝99.32％；m/z＝169.32(m+h)。通过
19
f-nmr证实产物中不存在tfa和三氟甲磺酸。产物直接用于下一步骤而无需额外纯化。
[0222]
步骤4：2-氨基-6-(3,3-二氟丁氧基)烟酸甲酯的制备
[0223][0224]
在0℃和n2气氛下，向搅拌的2-氨基-6-羟基烟酸甲酯(25g，147mmol)的thf(375ml)溶液中添加三苯基膦(77g，294mmol)，然后滴加diad(57.2ml，294mmol)。将反应混合物在0℃下搅拌15分钟，然后在0℃下向混合物中滴加3,3-二氟丁-1-醇(25.3g，221mmol)的thf(125ml)溶液。允许反应混合物至27℃，然后搅拌5小时。通过tlc(sio2，etoac，rf＝
0.5)监测反应进程。完成后，使反应混合物减压浓缩，得到粗产物。将该材料在mtbe:石油醚(1:1，1l)中搅拌。将混合物过滤，并用mtbe:石油醚(1:1，4
×
200ml)萃取过滤垫。使合并的滤液减压浓缩，得到浅黄色胶状固体。通过柱色谱法使用硅胶(100-200目)用含10-20％etoac的石油醚洗脱来纯化该材料。将含有产物的级分收集并减压浓缩，得到呈浅黄色液体的2-氨基-6-(3,3-二氟丁氧基)烟酸甲酯(20g，收率＝48％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝8.05-7.95(m,1h),6.02(d,j＝8.8hz,1h),4.45(t,j＝6.8hz,2h),3.80(s,3h),2.40-2.22(m,2h),1.68(t,j＝18.6hz,3h).lcms纯度＝91.1％,m/z＝261.25(m+h).
[0225]
步骤5：2-氨基-6-(3,3-二氟丁氧基)烟酸的制备
[0226][0227]
在26℃下，向搅拌的2-氨基-6-(3,3-二氟丁氧基)烟酸甲酯(5.7g,20.81mmol)在thf(120ml)和甲醇(30ml)中的溶液中添加lioh(2.491g，104mmol)的水(30ml)溶液。将反应混合物加热至70℃并在该温度下搅拌16小时。通过tlc(sio2，50％etoac/石油醚，rf＝0.2)监测反应进程。完成后，使反应混合物减压浓缩。将所得的残余物溶解于水(60ml)中并使用1n hcl酸化至ph 4。用乙酸乙酯(3
×
100ml)萃取混合物。将合并的有机物用盐水(100ml)洗涤，经无水na2so4干燥，并减压浓缩，得到呈褐色固体的2-氨基-6-(3,3-二氟丁氧基)烟酸(4.6g，收率＝87％)。1h nmr(400mhz,cdcl3)δ＝11.66-10.84(m,1h),8.12-7.97(m,1h),6.07(d,j＝8.3hz,1h),4.52-4.36(m,2h),2.41-2.28(m,2h),1.68(t,j＝18.6hz,3h).lcms纯度＝97.68％,m/z＝247.24(m+h).
[0228]
实施例3的制备：n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-7-(3,3-二氟丁氧基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3，4]环戊二烯并[1，2-c]吡唑-1-基)乙酰胺
[0229][0230]
合成方案：
[0231][0232]
步骤1：(s)-(1-(3-(4-氯-3-(n-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-7-(3,3-二氟丁氧基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯的制备
[0233][0234]
在氮气气氛和-25℃下，向搅拌的(s)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸(50g，166mmol)和2-氨基-6-(3,3-二氟丁氧基)烟酸(41.3g，166mmol)的乙腈(1000ml)溶液中添加吡啶(47.0ml，581mmol)。在15分钟内向所得的混合物中滴加2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三膦烷2,4,6-三氧化物(“t3p”，50重量％于etoac中，494ml，830mmol)。允许溶液温热至13℃，然后搅拌5小时。在13℃下向该溶液中添加n-(7-氨基-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基)-n-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺(62.3g，158mmol)。然后允许反应物料缓慢温热至27℃，然后在该温度下搅拌48小时。通过tlc(sio2，50％etoac/石油醚.，rf＝0.4)监测
反应进程。完成后，使反应混合物减压浓缩，并将残余物在0℃下滴加到饱和nahco3水溶液(1000ml)中。形成白色沉淀，通过真空过滤对其进行收集。将固体分离并用水(2l)洗涤。维持真空过滤，直到从固体中移除大部分残余水。然后使固体溶解于dcm(2l)中。将溶液经na2so4干燥，过滤，然后减压浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱法用含50-65％etoac的石油醚洗脱来纯化该材料。将含有期望产物的级分汇集并减压浓缩，得到呈黄色泡沫状固体的(s)-(1-(3-(4-氯-3-(n-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-7-(3,3-二氟丁氧基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(50g，收率＝31％)。将上述程序以相同规模再重复七次，以产生共592g的产物。使合并的产物(592g)溶解于meoh(1l)中。将溶液用正己烷(6l)稀释。使灰白色固体沉淀，然后将悬浮液搅拌20分钟。通过真空过滤收集固体，同时保留滤液。将固体在真空下干燥，得到呈灰白色固体的(s)-(1-(3-(4-氯-3-(n-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-7-(3,3-二氟丁氧基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(300g，收率＝48％)。产物是纯手性阻转异构体的混合物(非对映体)。lcms分析方法：柱＝x bridge beh c18(50mm
×
4.6mm，2.5μm粒子)；流动相a＝5mm碳酸氢铵；流动相b＝乙腈；梯度曲线(时间(分钟)/％b)＝0/5，0.5/5，1.5/15，7/98，9/98，9.5/5，10/5；柱温＝35℃；流速＝1.3ml/分钟。lcms结果：保留时间＝6.20分钟；观察到的离子＝888.09(m+h)；lcms纯度＝95％。注意：将保留的滤液浓缩并在真空下干燥，得到产物(120g，浅黄色固体)，其独立于上述产物也用于下游化学。
[0235]
步骤2：(s)-n-((6p)-7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-7-(3,3-二氟丁氧基)-4-氧代吡啶并[2,3-d]嘧啶-3(4h)-基)-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基)甲磺酰胺的制备
[0236][0237]
在0℃下，向搅拌的(s)-(1-(3-(4-氯-3-(n-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-7-(3,3-二氟丁氧基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(95％纯度，300g，321mmol)的dcm(3000ml)溶液中添加三氟乙酸(tfa)(900ml)，继之以三氟甲磺酸(158ml，1782mmol)。允许溶液温热至27℃，然后在氮气气氛下搅拌2小时。通过tlc(sio2，80％etoac/石油醚.，rf＝0.3)监测反应进程。完成后，在温和的氮气流下移除挥发物。在0℃下，将残余物添加到饱和nahco3溶液(1000ml)中。通过添加固体nahco3将其调节至溶液ph～8。将混合物用etoac(5
×
1000ml)萃取。将合并的有机层经na2so4干燥，过滤，然后减压浓缩，得到粗产物。通过硅胶色谱法用含5-10％meoh的dcm洗脱来纯化该材料。将含有期望产物的级分汇集并减压浓缩，得到作为纯
手性阻转异构体的混合物(非对映体，主要：79％，以及次要：10％，通过lcms确定)的(s)-n-(7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-7-(3,3-二氟丁氧基)-4-氧代吡啶并[2,3-d]嘧啶-3(4h)-基)-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基)甲磺酰胺(211g，褐色泡沫状固体)。将该材料溶解于甲醇:乙腈(80:20，1800ml)中，然后使用以下方法通过制备型sfc进行纯化：柱＝(r,r)whelk-01(30
×
250mm，5μm粒子)；洗脱剂＝co2:meoh(60:40)；流速＝90g/分钟；背压＝100巴；检测＝214nm(uv)；重合时间＝15.5分钟；每次注射的加载量＝1.125克。将纯的主峰收集并减压浓缩，得到呈褐色固体的(s)-n-((6p)-7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-7-(3,3-二氟丁氧基)-4-氧代吡啶并[2,3-d]嘧啶-3(4h)-基)-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基)甲磺酰胺(151g，收率＝69％)。产物是单一立体异构体。1h-nmr(400mhz,dmso-d6)δ:8.41(d,j＝8.8hz,1h),7.39(dd,j＝22.4,7.9hz,2h),7.05(d,j＝8.3hz,1h),7.03
–
6.98(m,1h),6.72(d,j＝8.8hz,2h),4.66
–
4.63(m,2h),3.67(s,3h),3.54
–
3.50(m,1h),3.28
–
3.23(m,1h),3.21(s,3h),2.88
–
2.82(m,1h),2.56
–
2.52(m,1h),2.47
–
2.44(m,1h),1.73(t,j＝19.0hz,3h)；lcms方法：柱＝acquity beh c18(50mm
×
2.1mm，1.7μm粒子)；流动相a＝含0.1％甲酸的水；流动相b＝含0.1％甲酸的mecn；梯度曲线(时间(分钟)/％b)：0/3，0.4/3，3.2/98，3.8/98，4.2/3，4.5/3；柱温＝35℃；流速：0.6ml/分钟。lcms结果：保留时间＝1.93分钟；观察到的离子＝668.05(m+h)；hplc纯度＝98％；手性hplc纯度＝96.9％。
[0238]
步骤3：n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-7-(3,3-二氟丁氧基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺的制备
[0239][0240]
在27℃下，向搅拌的(s)-n-((6p)-7-(2-(1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-7-(3,3-二氟丁氧基)-4-氧代吡啶并[2,3-d]嘧啶-3(4h)-基)-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基)甲磺酰胺(50g，74.1mmol)的dmf(500ml)溶液中添加2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸(21.75g，82mmol)，继之以n-(3-二甲氨基丙基)-n
′‑
乙基碳二亚胺盐酸盐(“edc-hcl”，18.47g，96mmol)、1-羟基苯并三唑水合物(“hobt水合物”，13.62g，89mmol)和n-甲基吗啉(65.2ml，593mmol)。将反应物料在27℃下搅拌16小时。通过tlc(sio2，50％etoac/石油醚，rf＝0.5)监测反应进程。完成后，将反应物料用冰水(1l)稀释，并将所得的沉淀经由过滤收集，然后在真空下干燥，得到呈灰白色固体的粗产物(77g)。将该粗产物与通过以相同规模重复该程序而生成的额外两批粗产物共混。将227g的粗产物一起通过硅胶色谱法用含40-50％etoac
的石油醚洗脱来纯化。将含有期望产物的级分汇集并减压浓缩，得到纯化产物(180g)。将该纯化产物与额外一批类似制备的产物(25g)共混。使用以下方法，通过反相色谱法将纯化产物的一部分(150g)进一步分批(30
×
5g)纯化：柱＝redisep 275g，hp c18(cv 243ml，150ml/分钟)；流动相a＝水:mecn:tfa(950:50:1)；流动相b＝水:mecn:tfa(50:950:1)；梯度曲线(时间(分钟)/％b)＝3/10，6/20，9/30，12/40，15/50，18/60，42/70(化合物开始洗脱)，52/80，57/100；流速＝80ml/分钟；柱温＝26℃；每次加载量＝5g。将含有纯产物的级分汇集并减压浓缩，以移除乙腈组分。通过添加饱和nahco3使水溶液呈碱性，然后用etoac(3
×
500ml)萃取。将合并的有机物经无水na2so4干燥，然后过滤。使滤液减压浓缩，获得呈灰白色固体的期望产物(102g)。将该材料溶解于etoac(200ml)中，然后将溶液用正己烷(1l)稀释。将所得的沉淀在27℃下搅拌2小时，然后经由过滤收集。使固体真空干燥。通过使用研钵和研杵研磨化合物，然后使微细固体在50℃烘箱中维持约2小时来移除痕量溶剂残余物；重复该研磨和加热过程(约4-5次)，直到移除所有痕量溶剂(通过nmr分析)，得到呈灰白色固体的n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-7-(3,3-二氟丁氧基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺(88.7g，收率＝87％)。1h-nmr(dmso-d6)δ:9.86(s,1h),9.45(d,j＝8.3hz,1h),8.44(d,j＝8.7hz,1h),7.77(d,j＝8.3hz,1h),7.48(d,j＝7.4hz,1h),7.09(d,j＝8.7hz,2h),7.07
–
6.77(m,1h),6.65(d,j＝6.2hz,2h),4.70(d,j＝16.7hz,1h),4.65(t,j＝6.3hz,2h),4.55(d,j＝16.7hz,1h),4.51
–
4.45(m,1h),3.50(s,3h),3.42
–
3.37(m,1h),3.18(s,3h),3.06
–
3.00(m,1h),2.56
–
2.52(m,2h),2.47
–
2.42(m,2h),1.73(t,j＝19.2hz,3h),1.38
–
1.32(m,1h),0.85
–
0.81(m,1h)；lcms方法：柱＝acquity beh c18(50mm
×
2.1mm，1.7μm粒子)，流动相a＝含0.1％甲酸的水；流动相b＝含0.1％甲酸的mecn；梯度曲线(时间(分钟)/％b)＝0/3，0.4/3，7.5/98，9.5/98，9.6/3，10/3；柱温＝35℃；流速＝0.6ml/分钟。lcms结果：保留时间＝5.05分钟；观察到的离子＝913.97(m+h)；hplc纯度＝99.5％；手性hplc纯度＝99.5％。
[0241]
实施例3的命名：
[0242]
如上所制备的实施例3的化合物是含有轴向手性的纯手性材料。轴向手性可使用如iupac gold book(doi:10.1351/goldbook.a00547)中所详述的p/m命名法来描述。然而，此时只有有限数量的能够生成含有p/m命名法的化学名的软件工具是可用的，并甚至较少的选项可用于将使用该命名法的化学名转化为分子的结构表示。因此，为了清楚和方便，下面提供了实施例3的几个名称：
[0243]
如由chemdraw professional 16(不存在p/m命名法)生成的实施例3的名称为：
[0244]
n-((s)-1-(3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-7-(3,3-二氟丁氧基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺
[0245]
如由jchem for excel(包括p/m命名法)生成的实施例3的化学名为：
[0246]
n-[(1s)-1-[(3p)-3-(4-氯-3-甲磺酰胺基-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-7-(3,3-二氟丁氧基)-4-氧代-3h,4h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基]-2-(3,5-二氟苯基)乙基]-2-[(2s,
4r)-9-(二氟甲基)-5,5-二氟-7,8-二氮杂三环[4.3.0.02,4]壬-1(6),8-二烯-7-基]乙酰胺
[0247]
通过chemdraw professional 16采用手动添加的p/m命名法生成的实施例3的化学名称为：
[0248]
n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-7-(3,3-二氟丁氧基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺
[0249]
n-[(6p)-7-{2-[(1s)-1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基]-7-羟基-4-氧代-3h,4h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-3-基}-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基]-n-[(4-甲氧基苯基)甲基]甲磺酰胺的制备
[0250]
路线：
[0251][0252]
步骤1：
[0253]
在-25℃下，向(s)-2-((叔丁氧羰基)氨基)-3-(3,5-二氟苯基)丙酸(5.49g，18.23mmol)和2-氨基-6-(苄氧基)烟酸(4.45g，18.23mmol)在乙腈(92ml)中的悬浮液(黄色溶液)中添加吡啶(9.83ml，122mmol)，继之以2,4,6-三丙基-1,3,5,2,4,6-三氧杂三膦烷2,4,6-三氧化物(“t3p”，45.2ml，76mmol)。将反应混合物(在添加t3p后变为澄清溶液)在-25℃至10℃下搅拌4.5小时，然后添加n-(7-氨基-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基)-n-(4-甲氧基苄基)甲磺酰胺(6g，15.19mmol)，并将混合物搅拌18小时，同时温热至室温。将反应混合物用乙酸乙酯稀释，用1n naoh、然后水、然后0.5m柠檬酸、然后水洗涤，然后经na2so4干燥并真空浓缩。使用含0-60％乙酸乙酯的己烷历经15cv，然后在60％etoac下保持10cv，在硅胶(330g redisep gold柱)上纯化所得的残余物。将期望的级分汇集并浓缩，得到浅黄色固体(8.1g，9.14mmol，60.1％收率)，即n-[(1s)-1-[(3p,3p)-7-(苄氧基)-3-(4-氯-3-{n-[(4-甲氧基苯基)甲基]甲磺酰胺基}-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-3h,4h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基]-2-(3,5-二氟苯基)乙基]氨基甲酸叔丁酯(主要)和n-[(1s)-1-[(3m,3m)-7-(苄氧基)-3-(4-氯-3-{n-[(4-甲氧基苯基)甲基]甲磺酰胺基}-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-3h,4h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基]-2-(3,5-二氟苯基)乙基]氨基甲酸叔酯(次要)的混合物。lc/ms:m/z＝886.25[m+1]
+
.
[0254]
步骤2：
[0255]
将tfa(21.1ml，274mmol)添加到(s)-(1-(7-(苄氧基)-3-(4-氯-3-(n-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)氨基甲酸叔丁酯(来自步骤1的产物，8.1g，9.14mmol)的二氯
甲烷(45.7ml)溶液中。将混合物在室温下搅拌2小时。使所得的浅黄色溶液浓缩。将残余物吸收在乙酸乙酯中，然后用1n naoh洗涤三次，然后经na2so4干燥，然后真空浓缩，得到油状残余物。通过溶剂a:溶剂b 65:35
→
0:100(2cv)，然后0:100(9cv)；溶剂a＝己烷；溶剂b＝9:9:2己烷:乙酸乙酯:meoh的梯度方法，在硅胶(330g redisep gold柱)上纯化残余物。将第一洗脱异构体(主要)收集并真空浓缩，得到n-[(6p)-7-{2-[(1s)-1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基]-7-羟基-4-氧代-3h,4h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-3-基}-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基]-n-[(4-甲氧基苯基)甲基]甲磺酰胺(4.1g，5.89mmol,64.5％收率)。1h nmr(500mhz,dmso-d6)δ7.86-7.98(m,1h)7.15
[0256]-7.37(m,4h)6.97-7.06(m,1h)6.70-6.89(m,4h)6.40-6.48(m,1h)4.70
[0257]-4.88(m,2h)3.41-3.81(m,7h)3.20-3.28(m,1h)3.08-3.12(m,3h)2.71-2.79(m,1h)1.69-2.00(m,2h).lc/ms:m/z＝696.20[m+1]
+
.
[0258]
n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-3-(n-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-7-羟基-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺的制备
[0259][0260]
向搅拌的n-[(6p)-7-{2-[(1s)-1-氨基-2-(3,5-二氟苯基)乙基]-7-羟基-4-氧代-3h,4h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-3-基}-4-氯-1-甲基-1h-吲唑-3-基]-n-[(4-甲氧基苯基)甲基]甲磺酰胺(0.926g，1.330mmol)的dmf(13ml)溶液中添加2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酸(0.351g，1.330mmol)、2-(3h-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基异脲鎓六氟磷酸盐(v)(“hatu”，0.531g，1.397mmol)和dipea(0.581ml，3.33mmol)。将反应混合物搅拌2小时，然后将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的etoac萃取物用盐水洗涤，经na2so4干燥，并真空浓缩。经由硅胶快速色谱法使用含10-100％乙酸乙酯的己烷来纯化粗产物，提供呈灰白色泡沫状固体的n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-3-(n-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-7-羟基-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺(1.1g，88％)。lc/ms:m/z＝942.25[m+1]
+
.
[0261]
实施例4的制备：n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-7-(3,3,3-三氟丙氧基)-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺
[0262][0263]
在室温下，将(e)-二氮烯-1,2-二甲酸二异丙酯(“diad”，0.125ml，0.637mmol)的thf(0.2ml)溶液滴加到n-(1-((3p)-3-(4-氯-3-(n-(4-甲氧基苄基)甲基磺酰胺基)-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-7-羟基-4-氧代-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺(0.2g，0.212mmol))、3,3,3-三氟丙-1-醇(0.073g，0.637mmol)和三苯基膦(0.178g，0.679mmol)在四氢呋喃(2.1ml)中的混合物中。将反应混合物在室温下搅拌18小时，然后真空浓缩。使用含0-60％乙酸乙酯的己烷历经15cv的梯度，然后在含60％乙酸乙酯的己烷保持5cv，在硅胶(24g redisep gold柱)上纯化残余物。将含有纯产物的级分汇集，然后浓缩，给出黄色固体。使该固体吸收在dcm(1ml):tfa(0.5ml)中；使溶液冷却至0℃；并且向溶液中添加三氟甲磺酸(0.057ml，0.637mmol)。将混合物搅拌1小时，然后真空浓缩。使残余物吸收在乙酸乙酯中；用1n naoh洗涤；用0.5m柠檬酸洗涤；经na2so4干燥；过滤；然后真空浓缩。使用含0-60％乙酸乙酯的己烷历经20cv，然后在60％乙酸乙酯保持10cv，使残余物经受硅胶色谱法(24g redisep gold柱)。将含有纯产物的级分汇集，然后真空浓缩，给出呈褐色固体的n-(1-((6p)-3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-7-(3,3,3-三氟丙氧基)-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺(0.078g，0.081mmol，38.0％收率)。1h nmr(500mhz,甲醇-d4)δppm 8.46-8.53(m,1h)7.28-7.34(m,1h)7.19-7.24(m,1h)7.03-7.09(m,1h)6.53-6.81(m,4h)4.80(dd,j＝5.96,2.98hz,3h)4.49-4.62(m,2h)3.58-3.62(m,3h)3.40-3.49(m,1h)3.22-3.24(m,3h)3.06-3.14(m,1h)2.80-2.89(m,2h)2.37-2.44(m,2h)1.32-1.37(m,1h)0.96-1.01(m,1h).lcms分析方法：柱＝acquity uplc beh c18，2.1
×
100mm，1.7μm粒子；进样体积＝5.00μl；流速＝0.80ml/分钟；溶剂a＝95:5水:mecn w/0.1％v/v甲酸；溶剂b＝5:95水:mecn w/0.1％v/v甲酸；洗脱曲线＝开始％b：0，结束％b：100，梯度时间：3.5分钟，然后在100％b保持1分钟；检测波长1＝220nm，波长2＝254nm。lcms保留时间＝3.097分钟；m/z＝918.05[m+1]
+
.
[0264]
实施例4的命名：
[0265]
如上所制备的实施例4的化合物是含有轴向手性的纯手性材料。轴向手性可使用如iupac gold book(doi:10.1351/goldbook.a00547)中所详述的p/m命名法来描述。然而，此时只有有限数量的能够生成含有p/m命名法的化学名的软件工具是可用的，并甚至较少的选项可用于将使用该命名法的化学名转化为分子的结构表示。因此，为了清楚和方便，下面提供了实施例4的几个名称：
[0266]
如由chemdraw professional 16(不存在p/m命名法)生成的实施例4的名称为：
[0267]
n-((s)-1-(3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-7-(3,3,3-三氟丙氧基)-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺
[0268]
如由jchem for excel(包括p/m命名法)生成的实施例4的化学名为：
[0269]
n-[(1s)-1-[(3p,3p)-3-(4-氯-3-甲磺酰胺基-1-甲基-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-7-(3,3,3-三氟丙氧基)-3h,4h-吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基]-2-(3,5-二氟苯基)乙基]-2-[(2s,4r)-9-(二氟甲基)-5,5-二氟-7,8-二氮杂三环[4.3.0.02,4]壬-1(6),8-二烯-7-基]乙酰胺
[0270]
通过chemdraw professional 16采用手动添加的p/m命名法生成的实施例4的化学名称为：
[0271]
n-((s)-1-((3p)-3-(4-氯-1-甲基-3-(甲基磺酰胺基)-1h-吲唑-7-基)-4-氧代-7-(3,3,3-三氟丙氧基)-3,4-二氢吡啶并[2,3-d]嘧啶-2-基)-2-(3,5-二氟苯基)乙基)-2-((3bs,4ar)-3-(二氟甲基)-5,5-二氟-3b,4,4a,5-四氢-1h-环丙烯并[3,4]环戊二烯并[1,2-c]吡唑-1-基)乙酰胺
[0272]
生物学方法：
[0273]
hiv细胞培养测定-mt-2细胞、293t细胞和nl
4-3
病毒的前病毒dna克隆获自nih aids研究和试剂项目(nih aids research and reference reagent program)。mt-2细胞在补充有10％热灭活胎牛血清(fbs)、100μg/ml青霉素g和至多100单位/ml链霉素的rpmi 1640培养基中繁殖。293t细胞在补充有10％热灭活fbs、100μg/ml青霉素g和100μg/ml链霉素的dmem培养基中繁殖。重组nl
4-3
前病毒克隆(其中nef基因的一部分被renilla荧光素酶基因替代)用于制备在这些研究中使用的参考病毒。通过使用来自mirus bio llc(madison，wi)的transit-293转染试剂将重组nl
4-3
前病毒克隆转染到293t细胞中来制备重组病毒。2-3天后收集上清液，并使用荧光素酶活性作为标记物通过测量荧光素酶活性来滴定mt-2细胞中存在的病毒量。荧光素酶使用promega(madison，wi)的enduren活细胞底物定量。化合物对重组病毒的抗病毒活性通过测量在化合物的连续稀释的情况下用重组病毒感染4-5天的mt-2细胞中的荧光素酶活性来定量。
[0274]
50％有效浓度(ec
50
)通过使用中值效应方程的指数形式计算，其中(fa)＝1/[1+(ed
50
/药物浓度)m](johnson va,byington rt.infectivity assay.in techniques in hiv research.ed.aldovini a,walker bd.71-76.new york:stockton press.1990)。通过使用指数型中值效应公式(median effect equation)来计算50％抑制浓度(ec
50
)，其中抑制百分比＝1/[1+(ec
50
/药物浓度)m]，其中m是反映浓度-反应曲线的斜率的参数。
[0275]
使用与抗病毒测定中所述相同的方案测定化合物细胞毒性和相应的cc
50
值，不同之处在于使用未感染的细胞。在第4天，通过使用基于xtt(2,3-双[2-甲氧基-4-硝基-5-磺酸苯基]-2h-四唑鎓-5-甲酰苯胺内盐)的比色测定(sigma-aldrich,st louis,mo)在未感染的mt2细胞中评估细胞毒性。
[0276]
实施例ec
50
nmcc
50
μm实施例10.093》20
实施例20.043》20实施例30.019》20实施例40.025》0.5
[0277]
用于测量皮下体内实验中的药代动力学参数的程序(制剂a)：
[0278]
向装有实施例1(320mg)的20ml小瓶中添加peg 300(0.906ml)。将混合物超声处理，得到澄清溶液。向该溶液中添加水(0.160ml)，得到轻微浑浊的溶液。将混合物超声处理5分钟，得到澄清溶液。所得溶液为“制剂a”且溶液的浓度为21.3重量/重量％实施例1、68.1重量/重量％peg 300和10.6重量/重量％水。
[0279]“制剂a”以0.167ml/kg的剂量经皮下注射给药于wistar han大鼠。在给予后0.5、1、3、5、7、24、48、72小时和第6、8、12、15、19、22、26、29、33、36、40、43、47、50、54、57、61天采集血样。将血样采集到k2edta管中并以1500至2000x g离心以获得血浆。将血浆样品储存于-80℃，直到通过lc-ms/ms分析。将所有体外样品注射到mds sciex api 4000三重四极lc-ms/ms系统上。使用的分析柱是维持于室温的phenomenex2.6μm ps(c18，2.1mm
×
50mm，2.6μm)。流动相a由含0.1％(v/v)甲酸的milliq-纯化水组成。流动相b由含0.1％(v/v)甲酸的乙腈组成。流速为0.70ml/分钟。梯度如下：将流动相b在35％下保持0.5分钟，然后在1.5分钟内从35％线性增加至98％，在98％下维持0.5分钟，并在35％下维持0.5分钟。pk实验的结果描述于表1和图1中。
[0280]
表1.用于评价以0.167ml/kg的剂量经皮下给药于大鼠的“制剂a”的研究的血浆浓度与时间数据(n＝3)。
[0281][0282]
lod＝检出限
[0283]
本公开不限于前述说明性实施例，并且这些实施例在所有方面都应被视为说明性而非限制性的，参考所附权利要求而非前述实施例，并因此旨在涵盖落入权利要求书的等同物的含义和范围内的所有改变。