用于预防和治疗先兆子痫的方法
【专利说明】用于预防和治疗先兆子痫的方法
[0001] 先兆子痫疾病
[0002] 先兆子痫（妊娠期蛋白尿高血压；PE)在所有妊娠的3%至5%中出现。[1]在美 国，其是妊娠相关孕产妇死亡的第二最常见原因，并且在发展中国家，其是孕产妇死亡率的 主要原因。PE占全世界所有孕产妇死亡的约15%，折算为每年估计60, 000名孕产妇死亡， 即每十分钟就有一名妇女由于先兆子痫的并发症死亡[1，2]。
[0003] PE是一种在妊娠期间临床上存在高血压、水肿和蛋白尿的全身综合征。其通过联 合检测两种因素进行诊断：新发型高血压（保持的静坐血压[BP]多140/90mm Hg)和蛋白 尿（彡300mg/24h)。目前对于PE唯一有效的治疗就是分娩。PE的并发症包括惊厥、高凝 状态、急性肾功能衰竭和肺水肿[1，3]。
[0004] 在正常人妊娠期间，向子宫的血流增加，在晚期妊娠达到心输出量的约25%。在第 一孕期期间螺旋动脉的调节和扩张降低了子宫胎盘的血管阻力且增加了子宫胎盘的血流 量。在发展先兆子痫的妇女中，子宫胎盘的血流量减少了 50%至70% [3,4]。
[0005] 母亲的健康主要取决于先兆子痫的类型（轻度或重度）、并发症（比如癫痫发作） 的预防及适时分娩。
[0006] 围产期结果取决于病症的严重程度，因此取决于使妊娠达到足月的能力。在严重 先兆子痫的情况下，导致胎死的早产是许多情况下的结果。
[0007] 尽管正常妊娠本身就是全身性炎症的状态，先兆子痫的特征为广泛全身性孕产妇 炎症性反应[8]。正常妊娠中的全身性炎症性反应与先兆子痫的全身性炎症性反应并非本 质上不同，但只不过是更轻度的。该发现导致提出当全身性炎性过程达到妊娠本身引起的 孕产妇全身性炎症反应范围的极端时，出现先兆子痫，引起一个或另一个孕产妇系统代谢 失调[8]。依据这理论，炎症性反应产生氧化应激，相反，氧化应激可以刺激炎症性反应，形 成正反馈系统的基础。由胎盘的合胞体表面释放到孕产妇的循环中的一种或多种促炎症因 子可能参与了该情况。
[0008] 先兆子痫是一种对于人类妊娠特定的多系统病症；其发展的基础在妊娠早期已确 定。病理学特点似乎是从妊娠的16周到20周的异常滋养层着床，和因此足够的胎盘床灌 流所需要的孕产妇血管中异常生理学改变。随着妊娠进展，胎儿胎盘单位的代谢性要求增 加，并且由于胎盘的异常浅侵入，螺旋小动脉没有扩张到足以适应所需的血流量增加。这引 起胎盘功能障碍和导致血管痉挛和内皮损伤的来自缺血性胎盘的因子的异常释放。最新研 宄表明孕产妇、胎儿和胎盘循环中促血管生成因子（例如，VEGF和胎盘生长因子[PlGF])和 抗血管生成因子（例如sFltl [可溶性VEGF受体]和内皮因子[可溶性TGF-β受体])的 不平衡参与了 PE的发展。循环的促血管生成和抗血管生成因子之间不平衡进一步导致胎 盘血管系统发育异常和循环因子减少，循环因子对于血管健康和血管舒张很重要，比如NO 和 PGI2。
[0009] 虽然对先兆子痫中的分子机制的理解很少，但是研宄已经提示对胎儿-父亲抗原 的胎儿耐受性不足在受孕和着床期间之间有联系[1，3,5-7]。有趣地是，已经建立了微嵌合 体（microchimerisms)(母体的循环细胞，其是来自孕产妇的祖母或之前妊娠的残留物）的 水平和PE发生之间的联系，其中较高的微嵌合体水平降低了 PE的概率。这表明来自胎儿 胎盘接触面的细胞，其与来自骨髓、胎盘和脂肪组织的贴壁细胞具有类似的来源（参见，例 如，在国际专利公开号WO 2007/108003和WO 2009/037690中描述的细胞，将其全文并入本 文作为参考），可以减少PE的发生[8]。
[0010] 在多数情况下，先兆子痫和子痫在分娩的一周至两周之内消失，但是20%的妇女 在七年之内发展为高血压和微白蛋白尿（microalbuminuria)，心脏和脑的血管病的长期风 险增加两倍[1，3]。
[0011] 目前治疗诜择的限制
[0012] 尽管PE研宄有所进展，但是除了胎儿分娩之外，仍然没有用于先兆子痫的治疗。 使用抗高血压药物通常没有减轻PE症状。先兆子痫的控制取决于胎龄和该疾病的严重 程度。然而，在所有情况下，分娩是唯一的治疗选择。患有轻度PE的患者可以预期得到控 制。在某些情况下，可以通过静脉内递送硫酸镁以预先阻止癫痫发作而暂时性稳定PE，同 时考虑到分娩，施用类固醇注射剂以促进胎儿肺发育成熟。在这些情况下，需要住院停留， 并密切监测胎儿状态。然而，在更严重的PE或子痫的情况下，存在器官功能障碍、胎儿不良 (fetal compromise)或HELLP综合征（肝酶升高、血小板计数减少和溶血），建议立即分娩 而不考虑胎龄[1，3,9，10]。
[0013] PE动物樽塑
[0014] 人类先兆子痫的可用模型包括：
[0015] 鲁在几种物种中，夹紧腹主动脉或闭塞和/或捆扎向子宫供给的动脉，导致子宫 胎盘的灌流压力显著（约50% )减少，从而模拟先兆子痫[11]。
[0016] ?近亲繁殖的BPH-5小鼠，来源于临界高血压BPH/2小鼠的兄弟-姐妹交配，显示 出妊娠后期的血压升高（从130到160mmHg，与之相比，对照C57BL-6为105mmHg)，其在分 娩2天之内消除，并且伴随有蛋白尿增加。外源性VEGF和抗氧化剂降低了血压，且提高了 胎儿存活率[7,12]。
[0017] · SHHF/Mcc-fa(Cp)(自发性高血压和心力衰竭）大鼠显示出自发性妊娠相关高 血压，小于胎龄的后代（small-for-gestational-age offspring)和胎盘基因表达改变
[13]。
[0018] ?用于PE的遗传修饰的小鼠模型，包括：具有p57Kip2基因敲除的小鼠，p57Kip2 是几个细胞周期蛋白/细胞周期蛋白-依赖性激酶复合物的一种有效抑制剂；eNOS-缺陷 型小鼠；和缺乏儿茶酚-0-甲基转移酶（COMT)的小鼠，儿茶酚-0-甲基转移酶是一种雌激 素分解的限速酶[14]。
[0019] 细朐疗法作用机制
[0020] PE的病因学包括血管系统调节异常以及血管生成相关细胞因子的全身谱异常，主 要是抗血管生成蛋白升高。
[0021] 来自骨髓、胎盘和脂肪组织的三维-贴壁细胞（参见，例如国际专利公开号WO 2007/108003和WO 2009/037690[Plurix的3D-贴壁细胞；PLX细胞])分泌高水平的促血管 生成因子，包括例如VEGF、血管生成素、PDGF和IL-8,以及组织调节因子，比如??ΜΡ和MMP。 在体外，由贴壁胎盘或脂肪组织细胞产生的条件培养基能够同时增加内皮细胞和平滑肌细 胞增殖，其是对血管生成和血管调节重要的两个过程。另外，所述贴壁细胞显示出显著的免 疫调节性质。
[0022] 动物模型中的试验以及临床试验表明在后肢局部缺血模型中和在患有外周动脉 疾病（PAD)的患者中施用（頂）贴壁胎盘或脂肪组织细胞引起灌流和血管生成的增加，其表 现为从头形成毛细管，和很可能重塑现有的血管系统以增加血流量（血管发生）。
[0023] 因此，本发明的方面涉及贴壁胎盘或脂肪组织细胞疗法预防或治疗先兆子痫的能 力。
[0024] -个实施方案涉及一种治疗或预防有此需要的受试者中先兆子痫或子痫的方法， 所述方法包括向所述受试者施用治疗或预防有效量的贴壁基质细胞，从而治疗或预防先兆 子痫或子痫。在某些实施方案中，所述细胞是从骨髓、胎盘或脂肪组织获得的。
[0025] 另一个实施方案涉及贴壁基质细胞在制备用于治疗或预防先兆子痫或子痫的药 物中的用途。在某些实施方案中，所述细胞是从骨髓、胎盘或脂肪组织获得的。
[0026] 某些实施方案涉及用于治疗或预防先兆子痫或子痫的贴壁基质细胞。在一个实施 方案中，细胞是从骨髓、胎盘或脂肪组织获得。
[0027] 另一个实施方案涉及包括包装材料的制品，所述包装材料包括用于治疗或预防先 兆子痫或子痫的标签，所述包装材料包装药用有效量的贴壁基质细胞。在一个实施方案中， 所述细胞是从骨髓、胎盘或脂肪组织获得的。
[0028] 在所述方法、用途、贴壁基质细胞或制品的某些实施方案中，受试者患有早发型 (early-onset)先兆子痫。在其它实施方案中，受试者处于约20周至约34周的妊娠期。在 仍然其它实施方案中，受试者患有后发型（late-onset)先兆子痫。在另外的实施方案中， 受试者处于约34周至约38周或以上的妊娠期。
[0029] 在一些实施方案中，受试者具有增加的对妊娠的炎症性反应。在其它实施方案 中，受试者具有一种或多种选自下述的先兆子痫的危险因素：一级亲属中的先兆子痫、之 前妊娠的先兆子痫史、胎盘生长因子（PlGF)的血清浓度降低、可溶性fms-样酪氨酸激 酶-l(sFlt-l)的血清浓度增加、可溶性内皮因子的血清浓度增加、心血管疾病的危险因 素、预先存在的亚临床内皮功能障碍、慢性高血压、糖尿病、高脂血症、母体肥胖、胰岛素抗 性、早期妊娠的高血压、肾病、代谢综合征、高度凝血状态、低龄孕产妇、高龄孕产妇、胎盘形 成差、胎盘质量增加、多胞妊娠、葡萄胎和带给之前的伴侣之前先兆子痫妊娠的男性的产前 亲子关系（prenatal paternity by a man who fathered a prior preclamptic pregnancy with a prior partner)〇
[0030] 在其它实施方案中，通过在妊娠之前施用贴壁基质细胞预防先兆子痫或子痫。在 仍然更进一步的实施方案中，通过在妊娠期间的任何时间施用贴壁基质细胞预防先兆子痫 或子痫。在其它实施方案中，在约16周至约20周的妊娠期间，