症、胰岛素抵抗和肥胖症。在其它方面中，病状为 非酒精性脂肪肝病（NAFLD)、脂肪性肝炎、高血脂症、血脂异常、高胆固醇血症、非家族性高 胆固醇血症、家族性高胆固醇血症、杂合型家族性高胆固醇血症、纯合型家族性高胆固醇血 症、混合型血脂异常、动脉粥样硬化、早发型冠心病、血脂异常、高甘油三酯血症、高脂肪酸 血症和肝硬化。方法还包括那些其中施用Nrg4、Nrg4变体或其生物学活性片段来治疗以 升高的脂质水平为特征的紊乱或病状的方法，此类脂质包括LDL-C、ApoB、VLDL-C、IDL-C、 非HDL-C、Lp(a)、血清甘油三酯、肝甘油三酯、Ox-LDL-C、小LDL颗粒、小VLDL、磷脂和氧化磷 脂。
[0106] 在一些实施方案中，可通过施用Nrg4、Nrg4变体或其生物学活性片段而减轻的病 状特征为与来自健康患者的脂肪组织中的NRG4表达相比，脂肪组织中的NRG4表达减轻的 病状为脂肪细胞和人体组织之间的异常交流。
[0107] 通过施用Nrg4、Nrg4变体或其生物学活性片段而可治疗的病状的指示"NRG4表达 减少"可被定义为在来自已知具有病状的个体的样品中的NRG4表达相对于在来自已知没有 病状的个体的样品中的NRG4表达的减少水平。在来自患有病状的个体的样品中，NRG4表 达的水平可降低例如至少1. 1倍、1. 2倍、1. 3倍、1. 4倍、1. 5倍、1. 6倍、1. 7倍、1. 8倍、1. 9 倍、2. 0 倍、2. 1 倍、2. 2 倍、2. 3 倍、2. 4 倍、2. 5 倍、2. 6 倍、2. 7 倍、2. 8 倍、2. 9 倍、3. 0 倍、3. 1 倍、3. 2 倍、3. 3 倍、3. 4 倍、3. 5 倍、3. 6 倍、3. 7 倍、3. 8 倍、3. 9 倍、4. 0 倍、4. 1 倍、4. 2 倍、4. 3 倍、4. 4 倍、4. 5 倍、4. 6 倍、4. 7 倍、4. 8 倍、4. 9 倍、5. 0 倍、5. 1 倍、5. 2 倍、5. 3 倍、5. 4 倍、5. 5 倍、5. 6倍、5. 7倍、5. 8倍、5. 9倍、或6. 0倍。
[0108] 在一些实施方案中，可通过施用Nrg4、Nrg4变体或其生物学活性片段而减轻的病 状为脂肪细胞和人体组织之间的异常交流。
[0109] 不希望受理论束缚，施用的Nrg4、Nrg4变体或其生物学活性片段负调节参与脂肪 重新生成的基因的表达。这种肝脂肪生成的下调可能成为Nrg4的有益的代谢效果的基础。
[0110] 组合物和制剂
[0111] 最佳的Nrg4或Nrg4调节剂制剂将依据施用途径和所需剂量由本领域的技术人员 来确定。此类制剂可影响所施用药剂的物理状态、稳定性、体内释放速率和体内清除速率。
[0112] 除了本文所描述的那些代表性的Nrg4或Nrg4调节剂剂型之外，药学上可接受的 赋形剂和载体通常是本领域的技术人员所已知的，并且因此包括在本发明中。此类赋形剂 和载体被描述在例如"Remingtons Pharmaceutical Sciences"Mack Pub. Co.，New Jersey中。
[0113] 使用一种或多种生理可接受的载体以常规方式来配制根据本发明使用的包含 Nrg4或Nrg4调节剂的药物组合物，所述载体包括促进治疗组合物加工成可药学上使用的 制剂的赋形剂和辅助剂。可用本身已知的方式制造这些药物组合物，例如，通过常规混合、 溶解、造粒、糖衣丸制备、研磨、乳化、包封、包埋或冻干方法。适合的制剂依赖于所选施用途 径。
[0114] 当治疗有效量的Nrg4或Nrg4调节剂组合物通过例如皮内、皮肤或皮下注射来施 用时，组合物在一个方面中呈无热原的、胃肠外可接受的水性溶液的形式。制备此类胃肠 外可接受的蛋白质或多核苷酸溶液，并适当考虑PH、等渗性、稳定性等，在本领域的技术内。 除了本发明的Nrg4、Nrg4调节剂或本发明的其它活性成分之外，组合物任选地包括等渗 媒介物如氯化钠注射液、林格氏（Ringer's)注射液、葡萄糖注射液、葡萄糖和氯化钠注射 液、乳酸林格氏注射液、或本领域内已知的其它媒介物。在另一个方面中，Nrg4或Nrg4调 节剂组合物还包括稳定剂、防腐剂、缓冲液、抗氧化剂或本领域中技术人员已知的其它添加 剂。本发明的药剂被配制为水性溶液，优选地为生理相容的缓冲液如汉克斯溶液（Hanks's solution)、林格氏溶液或生理盐水缓冲液。对于经粘膜施用，适合于待渗透的屏障的渗透 剂用于制剂中。此类渗透剂通常为本领域中已知的。
[0115] 在某些方面中，Nrg4或Nrg4调节剂制剂被设计成如下文所描述的短效、快速释 放、长效或持续释放的形式。因此，药物制剂的一种形式被配制用于控释或用于缓释。在其 它方面中，本发明Nrg4或Nrg4调节剂组合物包括例如微胶粒或脂质体或一些其它包封形 式，或者可以延迟释放的方式施用以提供持久储存和/或递送效果。因此，药物Nrg4或Nrg4 调节剂制剂被任选地压制成小球或圆柱体并且作为储库注射液或作为植入物（如支架）被 肌肉内或皮下植入。此类植入物可利用已知的惰性材料如聚硅酮和生物可降解聚合物。
[0116] 对于口服施用，可通过将活性化合物和本领域中熟知的药物可接受的载体结合来 容易地配制组合物。此类载体能够使本发明的化合物被配制为片剂、丸剂、糖衣丸、粉末、胶 囊、液体、溶液、凝胶、糖浆剂、药浆、混悬剂等，以用于待治疗患者的口服摄取。
[0117] 对于吸入施用，根据本发明使用的组合物使用适合的推进剂（例如，二氯二氟甲 烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其它适合的气体）从加压包装或喷雾器以气溶 胶喷雾剂呈现形式方便地递送。
[0118] 用于胃肠外施用的包含Nrg4或Nrg4调节剂的组合物包括呈可溶于水的形式的组 合物的水性溶液。任选地，混悬剂也可含有适合的稳定剂或增加组合物的溶解度以允许制 备高浓度溶液的试剂。或者，活性成分可以呈粉末形式以在使用前用适合的媒介物（例如， 无菌无热原水）复原。
[0119] 组合物还可以被配制为直肠组合物，如（例如）含有常规栓剂基质（如可可脂或 其它甘油酯）的栓剂或保留灌肠剂。除前述制剂以外，化合物还可配制为储库制剂。此类 长效制剂可通过植入（例如皮下或肌肉内）或通过肌肉内注射来施用。因此，例如，组合物 可与适合的聚合材料或疏水性材料（例如在可接受的油中的乳液）或离子交换树脂一起配 制，或配制为微溶的衍生物，例如，为微溶盐。
[0120] 组合物还可包括适合的固相或胶相载体或赋形剂。
[0121] 本发明的组合物可以呈本发明的蛋白质或其它活性成分连同蛋白或肽抗原的复 合物的形式。
[0122] 组合物可包括能够将含有蛋白质或含有其它活性成分的组合物递送至组织损伤 的位点的基质，该基质提供了用于形成骨骼和软骨的结构并且能够最佳地被再吸收到身体 中。此类基质可由目前用于其它植入医疗应用的材料形成。基质材料的选择是基于生物相 容性、生物可降解性、机械性能、装饰性外观和界面性能。
[0123] 组合物还可含有增强蛋白质或其它活性成分的活性，或者补充其在治疗中的活性 或用途的其它试剂。此类另外的因子和/或试剂可包括在药物组合物中以与本发明的蛋白 质或其它活性成分产生协同效果，或者使副效应最小化。
[0124] 用于配制和施用本申请的治疗组合物的技术可见于最新版的"Remington's Pharmaceutical Sciences, "Mack出版公司，Easton, PA中。当应用于单独施用的单独活 性成分时，治疗有效剂量是指该单独的成分。当应用于组合时，治疗有效剂量是指产生治疗 效果的活性成分的组合的量，无论是组合地、连续地或是同时施用。
[0125] 施里
[0126] 根据所提供的方法施用Nrg4或Nrg4调节剂将经由任何途径。涵盖施用的常规途 径，例如胃肠外、皮下、静脉内、皮内、肌肉内、乳房内、腹膜内、鞘内、眼内、眼球后、肺内、气 管内滴注、支气管内滴注、气雾剂、舌下、口、鼻、直肠、阴道或经皮递送，或通过在特定的位 置手术植入。具体地涵盖包括静脉内施用的方法。
[0127] 在各种方面中，所提供的方法中的治疗包括单次剂量或一段时间内的多次剂量。 Nrg4或Nrg4调节剂的施用是全身性或局部的，并且可包括治疗有效量的Nrg4蛋白质组合 物的单一位点的注射或输注。或者，涵盖治疗性的Nrg4或Nrg4调节剂组合物在多个位点 处递送至患者。可同时给予多次施用，或者在一段时间内施用多次施用。还涵盖另外的疗 法，其中Nrg4或Nrg4调节剂以周期（例如每天、每周或每月）为基础来施用。
[0128] 在某些实施方案中，治疗组合物的胃肠外施用通过起始大药丸进行，然后进行连 续输注，以便维持药物产品的治疗循环水平。本领域一般技术人员将易于优化如根据良好 的医学规范和个别患者的临床病状确定的有效剂量和施用方案。所提供的方法包括那些其 中Nrg4经口和通过注射来施用的方法。在其中Nrg4或Nrg4调节剂被注射的方法中，注射 为静脉内的或皮下的。在某些方面中，注射是用形成储库的组合物，并且在包括储库形成的 实施方案中，形成储库的组合物通过将适合的递送装置植入患者中来施用。在一个方面中， 递送装置被皮下植入，并且在某些方面中，递送装置为栗。
[0129] 给药频率将取决于Nrg4的药代动力学参数和施用途径。取决于施用途径，根据体 重、体表面积或器官大小来计算适合的剂量。动物模型的有效性在促进对给定的治疗剂的 适当剂量的决定中尤其有用。
[0130] 为确定适当的治疗剂量所必需的计算的进一步细化通过本领域中的普通技术人 员来常规地进行，而无需过多的实验。最终的剂量方案将通过主治医师来确定，考虑到了改 变Nrg4或Nrg4调节剂作用的因素，例如特异活性、患者响应性、患者的年龄、病状、体重、性 别和饮食、任何病状的严重性、施用时间、同时治疗的种类（如果有的话）、治疗频率和期望 效果的性质和其它临床因素。在进行研究时，将出现关于用于具体的疾病和病状的适当剂 量水平和治疗持续时间的另外的信息。
[0131] 在一些实施方案中，Nrg4或Nrg4调节剂单独来施用，在其它实施方案中，Nrg4或 Nrg4调节剂结合针对目标病状或针对其其它症状的其它治疗剂来施用。剂量水平的数量级 为每天每千克体重约〇?Olmg至30mg，例如约0?lmg至10mg/kg。
[0132] 也提供了Nrg4或Nrg4调节剂的单位剂量。"单位剂量"被定义为分散在适合的载 体中的治疗组合物的离散量。
[0133] 应理解所提供的Nrg4或Nrg4调节剂和治疗方法在人类医学和兽医医学中是有用 的。因此，待治疗的受试者为哺乳动物，如人类或其它哺乳动物。出于兽医目的，受试者包括 例如农场动物（包括牛、绵羊、猪、马和山羊）、伴侣动物（如狗和猫）、异国动物和/或动物 园动物、实验室动物（包括小鼠大鼠、兔子、豚鼠和仓鼠）；以及家禽如小鸡、火鸡、鸭和鹅。 被治疗的患者具有任何年龄，例如在10岁-50岁之间、20岁或更小、或10岁或更小。
[0134] 此外，可以预期本发明的Nrg4或Nrg4调节剂与用于以下疾病的任何现有的治疗 组合使用：非酒精性脂肪肝病（NAFLD)、脂肪性肝炎、II型糖尿病、高血糖症、高血脂症、血 脂异常、肥胖症、高胰岛素血症、胰岛素抵抗、高胆固醇血症、非家族性高胆固醇血症、家族 性高胆固醇血症、杂合型家族性高胆固醇血症、纯合型家族性高胆固醇血症、混合型血脂异 常、动脉粥样硬化、早发型冠心病、血脂异常、高甘油三酯血症、高脂肪酸血症或肝硬化。例 如，在某些实施方案中，可以预期本发明的方法与已知的代谢紊乱、心血管紊乱和/或升高 的脂质紊乱的疗法组合使用。包括Nrg4、变体或片段或Nrg4调节剂的组合物在此类疗法之 前、之后或期间施用。
[0135] 组合疗法
[0136] 为了增加用所提供的Nrg4或Nrg4调节剂组合物治疗的有效性，在某一方面中希 望将这些组合物和在具体的疾病或病状的治疗中有效的其它疗法结合。
[0137] 在一些情况下，本发明的组合物可在其它药剂治疗之前或之后间隔数分钟至数周 施用。可以预期在相互约12h_24h内或在相互约6h_12h内施用两种形式。在一些情形下， 希望显著延长治疗时期，其中各次施用之间经过数天（2、3、4、5、6或7天）至数周（1、2、3、 4、5、6、7 或 8 周）。
[0138] 在某些具体的情况下，Nrg4或Nrg4调节剂组合物与第二种药剂组合施用以预防 或治疗代谢紊乱或者预防或治疗心血管疾病。例如，与疗法组合使用的药剂包括但不限于 降血糖剂（即降低血糖的药剂）或降脂剂（即降低脂质水平的药剂）。
[0139] 降血糖剂
[0140] 当前，存在用于治疗2型糖尿病的各种药物方法。它们经由不同的作用模式起作 用：1)磺酰脲类（例如，格列美脲、格列生脲、磺酰脲、AY31637)本质上刺激胰岛素分泌； 2)双胍类（例如，二甲双胍）通过促进葡萄糖利用、减少肝葡萄糖产生和减少肠葡萄糖输 出来起作用；3)a-葡萄苷酶抑制剂（例如，阿卡波糖、米格列醇）减慢碳水化合物消化 并且因此减慢从消化道的吸收并且减少餐后的高血糖症；4)噻唑烷二酮类（例如，曲格列 酮、吡格列酮、罗格列酮、格列吡嗪、巴格列酮、来格列酮、萘格列酮、曲格列酮、恩格列酮、AD 5075、T174、YM268、R102380、NC2100、NIP223、NIP221、MK0767、环格列酮、艾格列酮 (adaglitazone)、CLX0921、达格列酮、CP92768、BM152054)增强胰岛素作用，因此促进了 外围组织中葡萄糖的利用；5)胰高血糖素样肽和激动剂（例如，艾塞那肽（exendin))或其 稳定剂（例如，DPP4抑制剂如西他列汀）加强葡萄糖刺激的胰岛素分泌；和6)胰岛素或其 类似物（例如LANTUS?)刺激组织葡萄糖利用并且抑制肝葡萄糖输出。以上提到的药 物方法可被单独利用或以组合疗法利用。
[0141] 降脂剂
[0142] 术语"降脂剂"是指向个体提供以实现降低个体中的脂质的药剂。例如，在某些实 施方案中，降脂剂被提供给个体以减少LDL-C、ApoB、VLDL-C、IDL-C、非HDL-C、Lp(a)、血清 甘油三酯、肝甘油三酯、Ox-LDL-C、小LDL颗粒、小VLDL、磷脂和氧化磷脂中的一个或多个。 理想地，施用降脂剂导致个体中的一种或多种血清脂质随着时间的减少。
[0143] 在某些此类实施方案中，可与本发明的药物组合物共同施用的降脂药剂包括但不 限于：阿托伐他汀、辛伐他汀、罗素伐他汀、普伐他汀（pravastatin)、氟伐他汀、依泽替米 贝、苯扎贝特、环丙贝特、安妥明、吉非罗齐和非诺贝特。在某些此类实施方案中，降脂剂在 施用本发明的药物组合物之前施用。在某些此类实施方案中，降脂剂在施用本发明的药物 组合物之后施用。在某些此类实施方案中，降脂剂与本发明的药物组合物同时施用。在某 些此类实施方案中，共同施用的降脂剂的剂量与如果降脂剂单独施用的情况下将要施用的 剂量相同。在某些此类实施方案中，共同施用的降脂剂的剂量低于如果降脂剂单独施用的 情况下将要施用的剂量。在某些此类实施方案中，共同施用的降脂剂的剂量高于如果降脂 剂单独施用的情况下将要施用的剂量。
[0144] 试剂盒
[0145] 本发明也涵盖用于治疗本文所描述的紊乱的试剂盒。此类试剂盒包括至少第一无 菌组合物，该无菌组合物包含在药学可接受的载体中以上描述的Nrg4(SEQIDN0:l)、Nrg4 变体或其生物学活性片段。另一组分为任选地第二治疗剂，该治疗剂和用于施用治疗组合 物的适合的容器和媒介物一起用于治疗紊乱。试剂盒任选地包括用于悬浮、稀释或达到递 送第一组合物和第二组合物目的的溶液或缓冲剂。试剂盒任选地还包括用于递送使用在本 发明的方法中的一种或多种组合物的导管、注射器或其它递送装置。在另一个方面中，试剂 盒任选地还包括含有用于治疗方案的施用方法的说明书。
[0146] 诊断以Nrg4缺陷为特征的病状的方法
[0147] 本公开也涵盖诊断患者中的选自由以下各项组成的组的代谢紊乱的方法：非酒精 性脂肪肝病（NAFLD)、脂肪性肝炎、II型糖尿病、高血糖症、高血脂症、血脂异常、肥胖症、高 胰岛素血症、胰岛素抵抗、高胆固醇血症、非家族性高胆固醇血症、家族性高胆固醇血症、杂 合型家族性高胆固醇血症、纯合型家族性高胆固醇血症、混合型血脂异常、动脉粥样硬化、 早发型冠心病、血脂异常、高甘油三酯血症、高脂肪酸血症和肝硬化，该方法包括测定来自 疑似罹患该病状的患者的样品中的Nrg4水平。
[0148] 应理解测定患者样品中的Nrg4水平将会在确定如何处理患者中的病状中有用。 例如，因为Nrg4水平的减少与代谢紊乱和肝病相关，所以临床医生可使用关于Nrg4水平的 信息以帮助做出关于患者的治疗的决定。因此，如果Nrg4水平指示处于以上提到的病状中 之一的早期阶段，那么可以开具适当的治疗方案。
[0149] 为代谢紊乱的指示物的Nrg4水平可被定义为存在于来自已知具有紊乱的个体的 样品中的Nrg4水平相比在来自已知没有紊乱的个体的样品中的Nrg4水平的减少水平。在 来自具有紊乱的个体的样品中，Nrg4水平可降低例如至少1. 1倍、1. 2倍、1. 3倍、1. 4倍、 1. 5 倍、1. 6 倍、1. 7 倍、1. 8 倍、1. 9 倍、2. 0 倍、2. 1