流行性感冒病毒疫苗及其用途的制作方法

文档序号:11107384阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种流行性感冒血球凝集素主干域多肽,包括:

(a)一种流行性感冒血球凝集素HA1域,该HA1域包含HA1N-末端主干区段,该HA1N-末端主干区段通过具有0-50个氨基酸残基的连接序列共价连接至HA1C-末端主干区段,所述HA1C-末端区段被连接到(b)一种流行性感冒血球凝集素HA2域,其中该HA1域和HA2域来源于包括H1亚型的HA的甲型流行性感冒病毒亚型;

(c)其中该多肽不包括在HA1和HA2域之间的接合处的蛋白酶切割位点;

(d)其中所述HA1N-末端区段包含HA1的氨基酸1-x,优选地是HA1的氨基酸p-x,并且其中该HA1C-末端主干区段包含HA1的氨基酸y-C-末端氨基酸,其中x=SEQ ID NO:1的位置52(或在另一个流行性感冒病毒株的血球凝集素中的等价位置)上的氨基酸,p=SEQ ID NO:1的位置18(或在另一个流行性感冒病毒的血球凝集素中的等价位置)上的氨基酸并且y=SEQ ID NO:1的位置320(或在另一个血球凝集素中的等价位置)上的氨基酸;

(e)其中包括氨基酸残基402-418的区域包含氨基酸序列X1NTQX2TAX3GKEX4N(H/K)X5E(K/R)(SEQ ID NO:8),

其中:

X1是选自下组的氨基酸,该组由以下各项组成:M、E、K、V、R以及T,

X2是选自下组的氨基酸,该组由以下各项组成:F、I、N、T、H、L以及Y,优选I、L或Y,

X3是选自下组的氨基酸,该组由以下各项组成:V、A、G、I、R、F以及S,优选A、I或F,

X4是选自下组的氨基酸,该组由以下各项组成:F、I、N、S、T、Y、E、K、M、以及V,优选I、Y、M或V,

X5是选自下组的氨基酸,该组由以下各项组成:L、H、I、N、R,优选I;

(f)其中位置337上的氨基酸残基(HA1域)选自下组,该组由以下各项组成:I、E、K、V、A、以及T,

位置340上的氨基酸残基(HA1域)选自下组,该组由以下各项组成:I、K、R、T、F、N、S以及Y,

位置352上的氨基酸残基(HA2域)选自下组,该组由以下各项组成:D、V、Y、A、I、N、S、以及T,并且

位置353上的氨基酸残基(HA2域)选自下组,该组由以下各项组成:K、R、T、E、G、以及V;并且

(g)其中该多肽进一步包含位置324上的氨基酸和位置436上的氨基酸之间的二硫桥;并且

(h)其中氨基酸序列RMKQIEDKIEEIESK(SEQ ID NO:20)已经引入位置419-433处,或其中序列RMKQIEDKIEEIESKQK(SEQ ID NO:21)已经引入位置417-433处。

2.根据权利要求1所述的多肽,其中该HA2域已被截短。

3.根据权利要求1或2所述的多肽,其中从位置519到C末端氨基酸的HA2域的C-末端部分已被缺失。

4.根据权利要求1或2所述的多肽,其中从位置530到C末端氨基酸的HA2域的C-末端部分已被缺失。

5.根据权利要求3或4所述的多肽,其中该HA2域的C-末端部分已被氨基酸序列GYIPEAPRDGQAYVRKDGEWVLLSTFL(SEQ ID NO:3)替代,任选通过接头连接。

6.根据以上权利要求中任一项所述的多肽,其中该HA1C-末端主干区段的C-末端氨基酸残基是除了精氨酸(R)或赖氨酸(K)的任何氨基酸,优选地是谷氨酰胺(Q)。

7.根据以上权利要求中任一项所述的多肽,其中该多肽在该HA1域和/或该HA2域中包含一或多个其他突变。

8.根据以上权利要求中任一项所述的多肽,其中该多肽选择性结合抗体CR6261和/或CR9114。

9.根据以上权利要求中任一项所述的多肽,其中该多肽不结合抗体CR8020和/或CR8057。

10.核酸分子,该核酸分子编码如权利要求1至9中任一项所述的多肽。

11.载体,该载体包括如权利要求10所述的核酸分子。

12.组合物,该组合物包括如权利要求1至9中任一项所述的多肽,和/或根据权利要求10所述的核酸分子。

13.根据权利要求1-9中任一项所述的多肽、根据权利要求10所述的核酸分子、和/或根据权利要求11所述的载体,用作一种药物。

14.根据权利要求1-9中任一项所述的多肽、根据权利要求10所述的核酸分子、和/或根据权利要求11所述的载体,用于在诱导针对流行性感冒病毒的免疫应答中使用。

15.根据权利要求1-9中任一项所述的多肽、根据权利要求10所述的核酸分子、和/或根据权利要求11所述的载体,用作一种疫苗。

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