技术总结
本发明提供构建pgRNA表达质粒文库的方法，所述pgRNA表达质粒文库当与Cas蛋白一同被引入细胞中时，可以使得基因组上两个sgRNA靶位点被切割，引起靶核酸序列的敲除，通过靶核酸序列的敲除筛选功能性的核酸序列。本发明还提供构建核酸序列敲除文库的方法，所述核酸序列敲除文库通过将本发明的pgRNA文库转入细胞获得，所述基因敲除文库可用于筛选功能性核酸序列。本发明还提供高通量筛选功能性核酸序列的方法。本发明是一种高通量CRISPR/Cas策略，可以使用多对gRNA(pgRNA)产生大量核酸序列的删除，使得能够快速鉴别功能性核酸序列。
技术研发人员：魏文胜;朱诗优
受保护的技术使用者：北京大学
文档号码：201610969127
技术研发日：2016.10.28
技术公布日：2017.05.10