对咽拭子样本或鼻咽拭子直接实时定量的PCR的方法与流程

文档序号:11145928阅读:来源:国知局

技术特征:

1.对咽拭子样本或鼻咽拭子样本直接实时定量的PCR的方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)制备裂解液和PCR反应液;

(2)将咽拭子样本或鼻咽拭子样本加入到含有步骤(1)中裂解液的PCR扩增管中,再加入磁珠到PCR扩增管中,振荡摇匀混合;

(3)将步骤(2)中的PCR扩增管在80-100℃高温处理10min后冷却到室温,然后在18-28℃反应5-10min;

(4)将PCR扩增管瞬时离心后放入到磁力架中,待磁珠吸附到磁力架一侧后将上清吸出;

(5)在PCR扩增管内加入配置好的PCR反应液,进行实时定量PCR反应;

所述步骤(1)中裂解液的成分为0-2M的NaCl、0-0.3%的Triton-X和0-0.2M的KCl。

2.根据权利要求1所述的对咽拭子样本或鼻咽拭子样本直接实时定量的PCR的方法,其特征在于所述步骤(3)中的高温为100℃。

3.根据权利要求1所述的对咽拭子样本或鼻咽拭子样本直接实时定量的PCR的方法,所述步骤(2)中咽拭子样本或鼻咽拭子样本与裂解液的体积比为1:3—1:10。

4.根据权利要求1所述的对咽拭子样本或鼻咽拭子样本直接实时定量的PCR的方法,所述磁珠为市售的核酸提取使用的且平均粒径为≤1000nm的单分散性羟基磁珠。

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