一种蕨菜中黄酮的提取方法与流程

本发明涉及黄酮提取方法技术领域，具体涉及一种蕨菜中黄酮的提取方法。

背景技术：

蕨菜是野菜的广泛生长于稀疏针阔混交林中，长作为干菜和罐头被食用。有研究发现，蕨菜中的黄酮物质含量丰富，因此可以对蕨菜进行深加工，提高其附加值。而黄酮本身具有一定的抗氧化性，而对于蕨菜中黄酮的抗氧化性的研究较少。同时对于提取方法的不同，产生的黄酮的抗氧化效果亦不相同，因此针对黄酮的抗氧化效果，研究蕨菜中黄酮的提取方法是十分必要的。

技术实现要素：

本发明的目的是为了克服上述现有技术存在的不足之处，而提供一种蕨菜中黄酮的提取方法。

本发明的一种蕨菜中黄酮的提取方法，其具体操作方法如下：

a、预处理：将蕨菜洗净，80℃～85℃烘干后，粉碎至100目，制成蕨菜粉末待用；

b、除蛋白：将a步骤制得的蕨菜粉末与水混合，水与蕨菜粉末的质量比为1:5～15，在50℃～60℃、ph8.0～8.5条件下，加入碱性蛋白酶，碱性蛋白酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:30～50，恒温搅拌30～60min后，95℃灭酶5min，得酶解液ⅰ；

c、除纤维：将b步骤制得的酶解液ⅰ，在40℃～60℃、ph4.0～5.5条件下，加入纤维素酶，纤维素酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:30～50，恒温搅拌30～60min后，95℃灭酶5min，得酶解液ⅱ；

d、浸提：将c步骤制得的酶解液ⅱ与有机溶剂混合，使有机溶剂的体积分数为60%～80%，将混合液在60℃下、进行500w超声处理20min，取液体得到浸提液；

f、浓缩：将d步骤制得的浸提液在50℃真空旋转蒸发，得到浓缩液；

g、冻干：将f步骤制得的浓缩液于-50℃冷冻干燥12h，即得蕨菜黄酮。

作为本发明的进一步改进，其具体操作方法如下：

a、预处理：将蕨菜洗净，80℃～85℃烘干后，粉碎至100目，制成蕨菜粉末待用；

b、除蛋白：将a步骤制得的蕨菜粉末与水混合，水与蕨菜粉末的质量比为1:7～12，在50℃～60℃、ph8.0～8.5条件下，加入碱性蛋白酶，碱性蛋白酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:35～45，恒温搅拌40～50min后，95℃灭酶5min，得酶解液ⅰ；

c、除纤维：将b步骤制得的酶解液ⅰ，在40℃～60℃、ph4.0～5.5条件下，加入纤维素酶，纤维素酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:35～45，恒温搅拌40～50min后，95℃灭酶5min，得酶解液ⅱ；

d、浸提：将c步骤制得的酶解液ⅱ与有机溶剂混合，使有机溶剂的体积分数为65%～75%，将混合液在60℃下、进行500w超声处理20min，取液体得到浸提液；

f、浓缩：将d步骤制得的浸提液在50℃真空旋转蒸发，得到浓缩液；

g、冻干：将f步骤制得的浓缩液于-50℃冷冻干燥12h，即得蕨菜黄酮。

作为本发明的进一步改进，所述的d步骤的有机溶剂为无水乙醇或乙酸乙酯。

本发明的一种蕨菜中的黄酮提取方法，其黄酮得率高达9.0%，利用酶解法将蛋白和纤维素依次去除，一方面去除了杂质对于提取的影响，另一方面可以将多余的结构打开，更加利于提高黄酮的提取率。同时，除去蛋白和纤维素能够提高产品的抗氧化活性，同时成品与vc的抗氧化活性差别不大，可用于食品的抗氧化剂。

附图说明：

图1是每100g使用蕨菜茎叶中的营养成分表；

图2是酶解液ⅰ、酶解液ⅱ以及成品蕨菜黄酮的抗氧化活性对比。

具体实施方式：

实施例1

本发明的一种蕨菜中黄酮提取方法，其具体操作方法如下：

a、预处理：将蕨菜洗净，80℃烘干后，粉碎至100目，制成蕨菜粉末待用；

b、除蛋白：将a步骤制得的蕨菜粉末与水混合，水与蕨菜粉末的质量比为1:5，在50℃、ph8.0条件下，加入碱性蛋白酶，碱性蛋白酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:30，恒温搅拌30min后，95℃灭酶5min，得酶解液ⅰ；

c、除纤维：将b步骤制得的酶解液ⅰ，在40℃、ph4.0条件下，加入纤维素酶，纤维素酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:30，恒温搅拌30min后，95℃灭酶5min，得酶解液ⅱ；

d、浸提：将c步骤制得的酶解液ⅱ与乙醇混合，使乙醇的体积分数为60%，将混合液在60℃下、进行500w超声处理20min，取液体得到浸提液；

f、浓缩：将d步骤制得的浸提液在50℃真空旋转蒸发，得到浓缩液；

g、冻干：将f步骤制得的浓缩液于-50℃冷冻干燥12h，即得蕨菜黄酮。

实施例2

本发明的一种蕨菜中黄酮提取方法，其具体操作方法如下：

a、预处理：将蕨菜洗净，85℃烘干后，粉碎至100目，制成蕨菜粉末待用；

b、除蛋白：将a步骤制得的蕨菜粉末与水混合，水与蕨菜粉末的质量比为1:15，在60℃、ph8.5条件下，加入碱性蛋白酶，碱性蛋白酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:50，恒温搅拌60min后，95℃灭酶5min，得酶解液ⅰ；

c、除纤维：将b步骤制得的酶解液ⅰ，在60℃、ph5.5条件下，加入纤维素酶，纤维素酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:50，恒温搅拌60min后，95℃灭酶5min，得酶解液ⅱ；

d、浸提：将c步骤制得的酶解液ⅱ与乙醇混合，使乙醇的体积分数为80%，将混合液在60℃下、进行500w超声处理20min，取液体得到浸提液；

f、浓缩：将d步骤制得的浸提液在50℃真空旋转蒸发，得到浓缩液；

g、冻干：将f步骤制得的浓缩液于-50℃冷冻干燥12h，即得蕨菜黄酮。

实施例3

本发明的一种蕨菜中黄酮提取方法，其具体操作方法如下：

a、预处理：将蕨菜洗净，80℃烘干后，粉碎至100目，制成蕨菜粉末待用；

b、除蛋白：将a步骤制得的蕨菜粉末与水混合，水与蕨菜粉末的质量比为1:7，在55℃、ph8.3条件下，加入碱性蛋白酶，碱性蛋白酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:35，恒温搅拌40min后，95℃灭酶5min，得酶解液ⅰ；

c、除纤维：将b步骤制得的酶解液ⅰ，在50℃、ph5.0条件下，加入纤维素酶，纤维素酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:35，恒温搅拌45min后，95℃灭酶5min，得酶解液ⅱ；

d、浸提：将c步骤制得的酶解液ⅱ与乙酸乙酯混合，使乙酸乙酯的体积分数为65%，将混合液在60℃下、进行500w超声处理20min，取液体得到浸提液；

f、浓缩：将d步骤制得的浸提液在50℃真空旋转蒸发，得到浓缩液；

g、冻干：将f步骤制得的浓缩液于-50℃冷冻干燥12h，即得蕨菜黄酮。

实施例4

本发明的一种蕨菜中黄酮提取方法，其具体操作方法如下：

a、预处理：将蕨菜洗净，82℃烘干后，粉碎至100目，制成蕨菜粉末待用；

b、除蛋白：将a步骤制得的蕨菜粉末与水混合，水与蕨菜粉末的质量比为1:12，在60℃、ph8.0条件下，加入碱性蛋白酶，碱性蛋白酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:45，恒温搅拌50min后，95℃灭酶5min，得酶解液ⅰ；

c、除纤维：将b步骤制得的酶解液ⅰ，在60℃、ph5.5条件下，加入纤维素酶，纤维素酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:45，恒温搅拌50min后，95℃灭酶5min，得酶解液ⅱ；

d、浸提：将c步骤制得的酶解液ⅱ与乙酸乙酯混合，使乙酸乙酯的体积分数为75%，将混合液在60℃下、进行500w超声处理20min，取液体得到浸提液；

f、浓缩：将d步骤制得的浸提液在50℃真空旋转蒸发，得到浓缩液；

g、冻干：将f步骤制得的浓缩液于-50℃冷冻干燥12h，即得蕨菜黄酮。

实施例5

本发明的一种蕨菜中黄酮提取方法，其具体操作方法如下：

a、预处理：将蕨菜洗净，82℃烘干后，粉碎至100目，制成蕨菜粉末待用；

b、除蛋白：将a步骤制得的蕨菜粉末与水混合，水与蕨菜粉末的质量比为1:10，在55℃、ph8.5条件下，加入碱性蛋白酶，碱性蛋白酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:40，恒温搅拌45min后，95℃灭酶5min，得酶解液ⅰ；

c、除纤维：将b步骤制得的酶解液ⅰ，在55℃、ph5.0条件下，加入纤维素酶，纤维素酶与蕨菜粉末混合液的质量比为1:40，恒温搅拌45min后，95℃灭酶5min，得酶解液ⅱ；

d、浸提：将c步骤制得的酶解液ⅱ与乙酸乙酯混合，使乙酸乙酯的体积分数为70%，将混合液在60℃下、进行500w超声处理20min，取液体得到浸提液；

f、浓缩：将d步骤制得的浸提液在50℃真空旋转蒸发，得到浓缩液；

g、冻干：将f步骤制得的浓缩液于-50℃冷冻干燥12h，即得蕨菜黄酮。

如图1所示，每100g使用蕨菜茎叶中的营养成分，因此在确定蕨菜中黄酮提取方案时，首先根据蕨菜中有哪些杂质，对杂质进行去除后，再进行提取，就能够有效的提高黄酮的提取率。由图1可知蕨菜茎叶中的水分含量较大，其次是蛋白质和粗纤维含量较多。因此本方法利用酶解法将蛋白和纤维素依次去除，一方面去除了杂质对于提取的影响，另一方面可以将多余的结构打开，更加利于提高黄酮的提取率。

利用硫代巴比妥酸反应物法，对酶解液ⅰ、酶解液ⅱ以及成品蕨菜黄酮的抗氧化活性进行对比，由图2可知除去蛋白和纤维素能够提高产品的抗氧化活性，同时成品与vc的抗氧化活性差别不大，可用于食品的抗氧化剂。