一种含有喹唑啉酮的联苯脲化合物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于生物医药技术领域，涉及一种抗肿瘤的化合物，特别涉及一种含有喹 唑啉酮的联苯脲化合物及其制备方法和应用。
【背景技术】
[0002] 恶性肿瘤作为全球较大的公共卫生问题之一，极大地危害人类的健康，并将成为 新世纪人类的第一杀手。恶性肿瘤已不再只是发达工业国家的严重疾病，发展中国家面临 着更大的疾病负担。化学药物治疗作为治疗肿瘤的重要手段之一，在近三十年已经有了巨 大的发展和进步，得到了一大批具有不同作用机制的临床抗肿瘤药物。但是抗肿瘤药也存 在许多不良反应，比如脱发，呕吐，产生骨髓抑制，快速产生耐药性等等，这些都导致化学药 物无法达到预期的治疗效果。因此新的抗肿瘤药物的研究与开发是目前药学领域的热点和 难点问题之一。
【发明内容】
[0003] 本发明的目的在于提供一种含有喹唑啉酮的联苯脲化合物及其制备方法和应用， 该化合物在体外体现出很好的抗肿瘤活性，能够应用于抗肿瘤药物的制备。
[0004] 为达到上述目的，本发明采用以下技术方案：
[0005] -种含有喹唑啉酮的联苯脲化合物，其化学结构式如下：
[0007] 其中，Ri、R2为氢、异丙基或卤素基团。
[0008] 所述的卤素基团为氟原子、氯原子、三氟甲基或三氟甲氧基。
[0009] 所述的含有喹唑啉酮的联苯脲化合物的制备方法，包括以下步骤：
[0010] 1)2-氨基-4-溴苯甲酸与甲酰胺通过环合反应制备7-溴喹唑啉-4(3H)_酮；
[0011] 2)单取代或双取代的苯胺与双(三氯甲基)碳酸酯形成异氰酸酯，再与4-氨基苯硼 酸频哪醇酯缩合反应得到脲类化合物;其中脲类化合物中的取代基由苯胺中苯环上的取代 基引入；
[0012] 3)在四（三苯基膦）钯反应催化下，脲类化合物与7-溴喹唑啉-4(3H)_酮通过 Suzuki偶联反应得到含有喹唑啉酮的联苯脲化合物。
[0013] 所述步骤1)的具体操作为:将2-氨基-4-溴苯甲酸溶于甲酰胺中，在氮气保护下进 行微波反应，反应结束后，将反应液加入冰水中，用乙酸乙酯萃取，萃取的有机相经洗涤、干 燥后减压蒸去溶剂，得粗品，再用层析柱分离粗品，得到7-溴喹唑啉-4(3H)_酮。
[0014] 所述步骤2)的具体操作为：在冰浴条件下，用重蒸二氯甲烷将双(三氯甲基）碳酸 酯溶解并搅拌均匀，再滴加单取代或双取代的苯胺的二氯甲烷溶液，滴加完毕后搅拌均匀， 继续滴加三乙胺的二氯甲烷溶液，滴加完毕后继续搅拌均匀，然后滴加4-氨基苯硼酸频哪 醇酯和三乙胺的二氯甲烷溶液，滴加完毕后继续搅拌均匀，将得到的反应液洗涤、干燥后减 压蒸去溶剂，得粗品，再用层析柱分离粗品，得到脲类化合物。
[0015] 所述步骤3)的具体操作为:将脲类化合物，7-溴喹唑啉-4(3H)_酮，无水碳酸钾，四 (三苯基膦)钯溶于1，4_二氧六环和水的混合溶剂中，在氮气保护下反应，反应结束后冷却 至室温，用乙酸乙酯萃取，萃取的有机相经洗涤、干燥后减压蒸去溶剂，得粗品，再用层析柱 分离粗品，得到含有喹唑啉酮的联苯脲化合物。
[0016] 所述的含有喹唑啉酮的联苯脲化合物在制备抑制VEGFR-2激酶活性的药物中的应 用。
[0017] 所述的含有喹唑啉酮的联苯脲化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。
[0018] 所述的抗肿瘤药物是以VEGFR-2激酶为靶点的药物。
[0019] 所述的抗肿瘤药物包括抗肝癌、抗结肠癌、抗乳腺癌、抗肺癌、抗皮肤癌和抗宫颈 癌的药物。
[0020] 与现有技术相比，本发明具有以下有益的技术效果：
[0021] 本发明提供的含有喹唑啉酮的联苯脲化合物，是一种新型的具有抗肿瘤活性的化 合物，其对VEGFR-2激酶有很好的抑制活性，可用于抗肿瘤药物的制备。具体的，本发明提供 的含有喹唑啉酮的联苯脲化合物，能够抑制VEGFR-2激酶的活性。而血管生成与肿瘤的发 生、发展和迀移都有密切关系，抑制新生血管的形成可以有效的抑制肿瘤的生长和迀移，许 多生长因子调控新生血管生成，其中VEGFR-2是已知的最强的正调控因子。因此本发明提供 的含有喹唑啉酮的联苯脲化合物通过抑制VEGFR-2激酶的活性，阻断其诱导的信号通路，抑 制肿瘤细胞的增生和迀移，从而可应用于抗肿瘤药物的制备。
[0022] 本发明提供的含有喹唑啉酮的联苯脲化合物的制备方法，通过带有取代基的苯胺 与双(三氯甲基)碳酸酯形成异氰酸酯，再与4-氨基苯硼酸频哪醇酯缩合反应得到脲类化合 物，将苯胺中的取代基引入到脲类化合物上，然后该脲类化合物与由2-氨基-4-溴苯甲酸与 甲酰胺环合反应制得的7-溴喹唑啉-4(3H)_酮进行Suzuki偶联反应，即得到含有喹唑啉酮 的联苯脲化合物，该方法具有原料易得，反应条件温和，反应过程操作简单，所用试剂便宜 的优点。
[0023] 进一步的，通过实验发现，本发明提供的含有喹唑啉酮的联苯脲化合物，能够对包 括内皮细胞(ECV304)、乳腺癌细胞(ZR-75-30)、乳腺癌细胞(MCF-7)、人结肠癌细胞(L0V0)、 肺癌细胞(A549)、肝癌细胞(SMCC-7721)、肝癌细胞(Hep3B)、肝癌细胞(BEL-7402)、宫颈癌 细胞(HeLa)和人表皮癌细胞(A431)在内的肿瘤细胞抑制其细胞增殖活性，可应用于抗肿瘤 药物的制备，尤其是以VEGFR-2激酶为靶点的抗肿瘤药物，包括抗肝癌、抗结肠癌、抗乳腺 癌、抗肺癌、抗皮肤癌和抗宫颈癌的药物。
【附图说明】
[0024] 图1为本发明提供的具有抗肿瘤活性的含有喹唑啉酮的联苯脲化合物的合成路线 图；
[0025] 其中，化合物1为4-氨基苯硼酸频哪醇酯，化合物2为单取代或双取代的苯胺，化合 物3为苯胺取代的脲类化合物，化合物4为2-氨基-4-溴苯甲酸;化合物为5为7-溴喹唑啉-4 (3H)-酮，化合物6为含有喹唑啉酮基团的联苯脲化合物；
[0026] 图中标注的具体为：&.81'(：3七3叱0〇1，0°(3切竹；13.!10)順2，丽，150°(3，1.4511 ;(3.?(1 (PPh3)4，K2C〇3，H2〇，dioxane，100°C，12h〇
【具体实施方式】
[0027] 下面结合具体的实施例对本发明做进一步的详细说明，所述是对本发明的解释而 不是限定。
[0028] 本发明提供了一种具有抗肿瘤活性的含有喹唑啉酮的联苯脲化合物，该化合物在 体外具有抗肿瘤活性，可应用于抗肿瘤药物的制备，其化学结构式为：
[0030]其中，Ri、R2为氢、异丙基或卤素基团。所述的卤素基团为氟原子，氯原子，三氟甲 基，三氟甲氧基。而且本发明提供的含有喹唑啉酮的联苯脲化合物中的喹唑啉酮基团中含 有杂原子N原子和0原子。
[0031] 下面结合图1中所示的合成路线和具体的合成实施例来详细说明具有本发明的抗 肿瘤候选药物含有喹唑啉酮的联苯脲化合物的制备和活性筛选方法。
[0032] 实施例1
[0033]该含有喹唑啉酮的联苯脲化合物的结构式中，Ri为氢，R2*CF3,通过以下步骤制备 (参见图1):
[0034] 1)4-氨基苯硼酸频哪醇酯（化合物1)与间三氟甲基苯胺(化合物2)制备化合物Ι Ο 三氟甲基) 苯基 )-3-(4-(4,4,5,5_ 四甲基-1，3,2-二氧硼戊环-2-基) 苯基) 脲(化合物 3) [0035] 在冰浴条件下，用20mL重蒸二氯甲烷将0.8(^(2.74111 111〇1)双（三氯甲基）碳酸酯 (BTC)溶解并搅拌5min，再缓慢滴加1.1 g (6.85. mmo 1)间三氟甲基苯胺(化合物2)的二氯甲 烷溶液，滴加完毕搅拌15min，向浑浊液中继续滴加1. lmL(8.22mmo 1)三乙胺的二氯甲烷溶 液10mL，滴加完毕后继续搅拌15min，然后向反应溶液中滴加1.50g(6.85mmol)4-氨基苯硼 酸频哪醇酯(化合物1)和1. lmL(8.22mmo 1)三乙胺的二氯甲烷溶液1 OmL，滴加完毕后继续搅 拌20min，将反应液依次用饱和碳酸氢钠溶液，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，旋干得到 红色残留物，用层析柱分离得到白色固体1_(3三氟甲基)苯基-3-(4-(4,4,5,5-四甲基-1， 3，2-二氧硼戊环-2-基)苯基)脲(化合物3) 1.57g，产率58.4 % ;
[0036] 2)2-氨基-4-溴苯甲酸(化合物4)与甲酰胺通过环合反应制备7-溴喹唑啉-4(3H)_ 酮(化合物5)
[0037] 将2-氨基-4-溴苯甲酸(化合物4)5.0g(23.14mmol)溶于80ml (2. Olmmol)甲酰胺 中，氮气保护下在150°C，功率300W微波条件下反应1.45h，反应结束后，将反应液加入冰水 中，用乙酸乙酯萃取3-4次，萃取的有机相依次用饱和碳酸氢钠溶液，饱和食盐水洗涤，无水 硫酸钠干燥，旋干得到红棕色残留物，用层析柱分离得到红棕色固体7-溴喹唑啉-4(3H)_酮 (化合物5)1.89g，产率36.3%;
[0038] 3)化合物1-(3三氟甲基）苯基)-3-(4-(4,4,5,5_四甲基-1，3,2-二氧硼戊环-2- 基)苯基)脲(化合物3)与7-溴喹唑啉-4(3H)_酮(化合物5)通过Suzuki偶联反应制备1-(4-(4-氧代-3，4-二氢喹唑啉-7-基)苯基)-3-( 3-(三氟甲基)苯基)脲(化合物6)。
[0039] 将1_(3三氟甲基)苯基)-3-(4-(4,4,5,5_四甲基-1，3,2-二氧硼戊环-2-基)苯基） 脲(化合物3) 1.40g(3.45mmo 1)，7-溴喹唑啉-4(3H)-酮(化合物5)0.78g(3.45mmo 1)，碳酸钾 1.43g( 10.35mmol)，四（三苯基勝）钮0 · 39g(0 · 34mmol)溶于90mL 1，4_二氧六环和30ml水 中，在氮气保护下于100°c反应过夜。冷却至室温，用乙酸乙酯萃取3-4次，萃取的有机相依 次用饱和碳酸氢钠溶液，饱和