邻硝基咖啡酸苯乙酯及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明属于化学制药领域，设及一种咖啡酸苯乙醋衍生物及其制备方法和制药用 途。
【背景技术】
[0002] 近年来，屯、血管系统疾病的发病率及死亡率不断攀升，r然已成为当今世界的头 号健康杀手。屯、肌缺血再灌注损伤（ischemia reperfusion in化巧，IRI)是屯、血管研究的 热点问题。屯、肌持续性缺血导致组织损伤和细胞死亡，早期再灌注能够减轻屯、肌缺血的损 伤程度，但再灌注后在改善屯、肌供血的同时又加重了单纯屯、肌缺血所造成的损伤，容易出 现屯、律失常、梗死面积扩大、持久性屯、室收缩功能低下等状况，病理变化可出现屯、肌细胞 水肿、细胞膜和细胞器膜完整性破坏、肌纤维出现破坏性断裂超微结构的改变、微血管损伤 和无再灌注现象等。屯、肌缺血再灌注损伤是影响患者缺血/再灌注后屯、脏结构和功能恢复 的主要因素。因此，开发抗屯、肌缺血再灌注损伤的药物具有现实意义。
[0003] 咖啡酸苯乙醋(CAPE)是提取自蜂胶中的活性成分，为黄酬类化合物，其分子结构 中具有邻二酪径基结构，文献报道具有清除氧自由基、抑制黄嚷岭氧化酶、抗炎、抗肿瘤、抗 屯、肌缺血再灌注损伤等生物活性。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的之一在于提供一种咖啡酸苯乙醋衍生物，具有抗氧化、自由基清除 作用，能够显著改善屯、肌缺血再灌注损伤。
[0005] 为达到上述目的，本发明提供如下技术方案： 结构击血击T所元的邻捕其咖啡酸果六鹏；
[0006] 本发明的目的之二在于提供上述邻硝基咖啡酸苯乙醋的制备方法，合成速度较 快，操作简便。
[0007] 为达到上述目的，本发明提供如下技术方案： 邻硝基咖啡酸苯乙醋的制备方法，先将咖啡酸和二氯亚讽经酷化反应生成咖啡酸酷 氯，再将咖啡酸酷氯与邻硝基苯乙醇在有机溶剂中、催化剂存在下经醋化反应生成邻硝基 咖啡酸苯乙醋。
[0008] 酷化反应中，二氯亚讽既作反应原料也作反应溶剂。醋化反应要求在无水条件下 完成。
[0009] 优选的，所述有机溶剂为=氯甲烧、二氯甲烧、氯仿和丙酬中的任一种或两种W上 混合物;所述催化剂为乙醇钢、下基裡、=乙胺和乙醇胺中的任一种或两种W上混合物。 [0010]更佳的，所述有机溶剂为二氯甲烧;所述催化剂为立乙胺。
[0011] 优选的，所述咖啡酸、邻硝基苯乙醇和S乙胺的用量摩尔比为5.0:4.8:2.2-3.6。
[0012] 更佳的，所述咖啡酸、邻硝基苯乙醇和S乙胺的用量摩尔比为5.0:4.8:2.9。
[0013] 优选的，所述酷化反应的溫度为60-100°C，所述醋化反应的溫度为30-70°C。
[0014] 更佳的，所述酷化反应的溫度为80-100°C，所述醋化反应的溫度为50°C。
[0015] 优选的，所述邻硝基咖啡酸苯乙醋的制备方法是先将咖啡酸和过量二氯亚讽经酷 化反应生成咖啡酸酷氯，减压蒸馈除去剩余二氯亚讽后，加入有机溶剂溶解，再在溫度10-30°C条件下滴加邻硝基苯乙醇的有机溶剂溶液，混合均匀后，滴加催化剂，经醋化反应生成 邻硝基咖啡酸苯乙醋，最后经柱层析分离纯化获得邻硝基咖啡酸苯乙醋纯品。
[0016] 优选的，柱层析采用拌硅胶干法上样，流动相为丙酬和石油酸按体积比1:2.7的混 合溶剂。
[0017] 本发明的目的之=在于提供上述邻硝基咖啡酸苯乙醋在制药方面的应用，从而为 疾病的临床治疗提供更多安全、有效的备选药物，W满足临床治疗的多方面需求。
[0018] 为达到上述目的，本发明提供如下技术方案： 邻硝基咖啡酸苯乙醋在制备改善屯、肌缺血再灌注损伤的药物中的应用。
[0019] 本发明的有益效果在于:本发明提供了一种咖啡酸苯乙醋衍生物一一邻硝基咖啡 酸苯乙醋，与咖啡酸苯乙醋相比，其保护抗氧化酶活力效果更优，清除氧自由基能力更强， 对维持屯、肌细胞的抗氧化能力、保护细胞正常结构、减轻细胞氧化损伤的效果更好，能够显 著减少缺血/再灌注屯、肌细胞调亡，降低屯、肌梗死面积，可用于制备改善屯、肌缺血再灌注损 伤的药物，在屯、血管系统疾病的治疗中发挥重要作用。本发明还提供了邻硝基咖啡酸苯乙 醋的制备方法，具有合成速度较快、操作简便等优点。
【附图说明】
[0020] 图1为大鼠屯、肌缺血再灌注模型制备过程中屯、电图的变化。
[0021] 图2为邻硝基咖啡酸苯乙醋(CA阳-N化)对大鼠缺血再灌注后血清谷脫甘肤过氧化 物酶(G甜-Px)、过氧化氨酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)活力W及一氧化氮(NO)含量 的影响。
【具体实施方式】
[0022] 为了使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将结合附图对本发明作进 一步的详细描述。
[0023] 制备例1.邻硝基咖啡酸苯乙醋的制备(酷化步骤W二氯甲烧为溶剂） 将咖啡酸0.9g巧.Ommol)和二氯亚讽0.4mK5.6mmol)置100mL圆底烧瓶中，加入无水 二氯甲烧20ml使溶解，升溫至100°C回流反应，用薄层色谱法监测反应进程，反应完毕后， 降溫至室溫，滴加邻硝基苯乙醇0.8g(4. Smmol)的二氯甲烧溶液20ml，混合均匀后，再滴加 S乙胺0.2ml (1.4mmol)，升溫至50°C回流反应，用薄层色谱法监测反应进程，反应完毕后， 将反应液减压蒸馈除去溶剂得到黄栋色液体，用适量无水丙酬溶解后，加入80-100目硅胶 揽拌混匀，再减压蒸馈除去丙酬后，用柱层析(硅胶200-300目）分离纯化，干法上样，丙酬- 石油酸(体积比1:2.7)混合溶剂为洗脱剂，收集洗脱液，真空旋蒸干燥，得栋褐色固体，用丙 酬-石油酸混合溶剂重结晶，得浅黄栋色晶体，收率9.6%，烙点148°C-153°C，经核磁共振 (NMR)分析确证为邻硝基咖啡酸苯乙醋。Ih NMR (400 MHz,丙酬）5 3.33(2H，m，C此）， 4.43(2H, t, J=6.48, CH2), 6.23(1H, d, J=15.96, a-H), 7.50(1H, d, J=15.96, (6-H), 6.87(1H，d, J=8.19, 化-H)，7.03(1H，dd, J=8.09, 2.20，化-H)，7.15(1H，dd, J=4.15, 2.09，化-H)，7.52(1H, d, J=1.53,陆-扣，7.61(把，（1，1=7.73，1.53，化-H), 7.68(1H，td, J=7.51, 1.37，曲-H)，7.96(1H，dd, J=8.16, 1.32，曲-H). 13c NMR (100 MHz,丙酬）5 31.7，63.4，114.3，114.4，114.5，115.5，121.7，124.5， 126.7, 128.0, 132.8, 132.9, 133.0, 145.0, 145.4, 147.9, 166.2〇
[0024] 制备例2.邻硝基咖啡酸苯乙醋的制备(酷化步骤W二氯亚讽为溶剂） 将咖啡酸0.9g巧.Ommol)和二氯亚讽20ml置100mL圆底烧瓶中，混匀，升溫至100°C回 流反应，待反应液变为澄清后，减压蒸馈除去剩余的二氯亚讽，得到乳白色固体咖啡酸酷 氯，加入无水二氯甲烧（氨化巧干燥）20ml使溶解，在室溫条件下滴加邻硝基苯乙醇0. Sg (4. Smmol)的二氯甲烧溶液20ml，混合均匀后，再滴加 S乙胺0.3ml(2.2mmol)，升溫至50°C 回流反应，用薄层色谱法监测反应进程，反应完毕后，将反应液减压蒸馈除去溶剂得到黄栋 色粘稠液体，用适量无水丙酬溶解后，加入80-100目硅胶揽拌混匀，再减压蒸馈除去丙酬 后，用柱层析(硅胶200-300目）分离纯化，干法上样，丙酬-石油酸(体积比1:2.7)混合溶剂 为洗脱剂，收集洗脱液，真空旋蒸干燥，得栋褐色固体，用丙酬-石油酸混合溶剂重结晶，得 浅黄栋色晶体，收率17.5%，烙点147°C-153°C，经NMR分析确证为邻硝基咖啡酸苯乙醋(化合 物结构确认数据同制备例1)。
[0025] 制备例3.邻硝基咖啡酸苯乙醋的制备(酷化步骤W二氯亚讽为溶剂，增加催化剂 用量） 将咖啡酸0.9g巧.Ommol)和二氯亚讽20ml置100mL圆底烧瓶中，混匀，升溫至100°C回 流反应，待反应液变为澄清后，减压蒸馈除去剩余的二氯亚讽，得到乳白色固体咖啡酸酷 氯，加入无水二氯甲烧（氨化巧干燥）20ml使溶解，在室溫条件下滴加邻硝基苯乙醇0. Sg (4.