化妆品中杜鹃醇的检测方法
【技术领域】
[0001] 本发明设及化妆品检测领域，具体设及化妆品中杜酷醇的检测方法。
【背景技术】
[000引杜酷醇，化学名为4-(4-哲苯基）-2- 了醇，其分子式是。化402,分子量为166. 2， 纯品为白色粉末，易溶于水，溶于甲醇、己醇和己膳等有机溶剂。现代美白化妆品中有效成 分大多来自天然植物提取物，如熊果巧、中草药提取物和杜酷醇等，其中杜酷醇广泛分布于 白枠和日光械，具有有效抑制黑色素形成的作用。然而，正是由于杜酷醇具有抑制黑色素合 成的作用，从而干扰了皮肤中酪氨酸向黑色素的正常酶转化过程，添加了杜酷醇的美白化 妆品会造成皮肤美白过度而出现白斑等过敏症状。
[0003] 因此有必要建立快速有效检测杜酷醇的方法，W鉴别各类美白化妆品是否含有杜 酷醇。目前国内外文献中对杜酷醇的报道主要集中于其在生物体内赋存状况和其生物合成 方法等方面，具体设及到杜酷醇的检测技术W及化妆品中杜酷醇的检测技术还很少，几乎 处于空白状态。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供化妆品中杜酷醇的检测方法，W便能够快速简便，定性定 量的准确检测出化妆品中的杜酷醇含量。
[0005] 为解决上述技术问题，本发明提供的技术方案如下：
[0006] 一种化妆品中杜酷醇的检测方法，采用高效液相色谱串联质谱（HPLC-MS/M巧法 测定，包括如下步骤：
[0007] (1)样品的前处理：将待测样本利用己醇溶解，混匀，然后超声提取，利用滤膜过 膜后得到样品提取液；
[000引 （2)标准曲线测定：配置杜酷醇标准溶液系列，利用高效液相色谱串联质谱法上 机测定，根据测定结果得到标准溶液含量-结果的标准曲线；
[0009] (3)上机检测：采用高效液相色谱串联质谱法对上述样品提取液上机检测，色谱 条件为；粒径为1. 9微米的C18色谱柱，流动相为甲醇-氨水溶液，梯度洗脱的方式；质谱条 件为；大气压化学离子源负离子检测模式，放电针电流为4.0uA，母离子分子量为165,子 离子分子量（碰撞能量）为93(256￥)、106(206￥)、119(216￥)、121(186￥)，其中106为定量 离子。
[0010] 优选的，所述梯度洗脱程序为；0-lmin采用体积比为30:70的甲醇-氨水， 1. 15-3. 5min采用体积比为45:55的甲醇-氨水，第一斜坡时间为0. 15min，3. 7-4. 5min采 用体积比为30:70的甲醇-氨水，第二斜坡时间为0. 2min。
[0011] 优选的，步骤（1)中，所述超声提取后，离屯、分离，将上清液经滤膜过膜后得到样 品提取浓。
[0012] 优选的，所述离屯、速度为8000转/分，离屯、时间为10分钟。
[0013] 优选的，步骤（1)中，所述超声提取后，取样用体积比为30:70的甲醇-氨水溶液 定容至10倍体积，然后经滤膜过膜后得到样品提取液。
[0014] 优选的，所述氨水的体积百分比浓度为0. 05%。
[0015] 优选的，所述滤膜为0. 22微米水相滤膜。
[0016] 优选的，所述杜酷醇标准溶液系列中包括空白样。
[0017] 优选的，所述高效液相色谱串联质谱法中，高效液相色谱的进样量为10微升。
[001引本发明的优点在于：
[0019] (1)利用HPLC-MS/MS测定化妆品中的杜酷醇，样品前处理步骤快速简单，而且样 品上机洗脱检测时间也短，可W在5min实现对杜酷醇的定量定性分析。
[0020] (2)采用高效液相色谱串联质谱的方法，与仅采用高效液相色谱相比，其检测结果 更加精确，因为液相图谱可能会存在其他物质的干扰，仅根据液相图谱并不能完全确认测 定结果就是样品中的杜酷醇，导致结果在定性方面受到质疑，而W质谱的的检测结果加W 辅助则可W毫无疑问定性为杜酷醇。
[0021] (3)利用该方法检测的灵敏度高，样品的检测限可低至0.Img/kg，测试结果 的准确性和稳定性均十分高，加标回收率达到80. 6 % -110%，相对标准偏差巧SD)为 3. 08% -10. 5%，回收率和精密度良好。
[0022] 本发明还提供了一种化妆品中杜酷醇的快速检测方法，采用超高效液相色谱 扣HX)法测定，包括如下步骤：
[002引 （1)样品前处理；将待测样品利用己醇溶解，混匀，然后超声提取，利用滤膜过膜 后得到样品提取液；
[0024] 似标准溶液配置；配置杜酷醇标准溶液系列，利用超高效液相色谱法上机测定， 根据测定结果得到标准溶液含量-结果的标准曲线；
[0025] (3)上机检测：W己膳与水溶液为流动相，二极管阵列检测器检测，采用超高效液 相色谱法对上述样品提取液上机检测，所述超高效液相色谱法的色谱条件为；色谱柱为粒 径为1. 7微米的C18色谱柱，检测波长为280纳米，流动相为体积比为75:25的水-己膳溶 液，洗脱采用等度洗脱，进样量为1微升。
[0026] 与现有技术相比，本发明的优点在于，利用UPLC检测化妆品中的杜酷醇，实现了 样品的快速检测。首先，样品前处理过程快速简便，而且与高效液相色谱（册LC)相比，UPLC 的色谱柱粒径更小，样品分离速度更快，因此样品的检测速度很快，利用该法检测杜酷醇， 每个样品的上机时间仅为2. 5min。同时，杜酷醇的测试结果的准确性和稳定性也十分高， 加标回收率达到92. 9% -97. 1%，相对标准偏差巧SD)仅为0. 4% -1. 5%，回收率和精密度 良好。该方法测定杜酷醇的样品检出限为200mg/kg，而美白化妆品中杜酷醇含量需要达到 1.8% (18000mg/kg)W上才会起到美白作用，因此本方案完全能够满足化妆品中杜酷醇的 检测要求。
【附图说明】
[0027] 图1是本发明利用【具体实施方式】中所述高效液相色谱串联质谱法测定杜酷醇的 色谱图；
[002引图2是本发明利用【具体实施方式】中所述高效液相色谱串联质谱法测定杜酷醇的 质谱图；
[0029] 图3是杜酷醇分子的质谱碎裂方式示意图；
[0030] 图4是本发明利用【具体实施方式】中所述超高效液相色谱法测定杜酷醇标准溶液 的吸收光谱图；
[0031] 图5是本发明利用【具体实施方式】中所述超高效液相色谱法测定空白化妆品的色 谱图；
[0032] 图6是本发明利用【具体实施方式】中所述超高效液相色谱法测定空白化妆品添加 杜酷醇标准溶液的色谱图。
【具体实施方式】
[0033]W下结合附图和具体实施例对本发明提出的化妆品中杜酷醇的检测方法作进一 步详细说明。根据下面说明和权利要求书，本发明的优点和特征将更清楚。需说明的是，附 图均采用非常简化的形式，仅用W方便、明晰地辅助说明本发明实施例的目的。
[0034] 实施例1 ;高效液相色谱串联质谱法她LC-MS/M巧测定化妆品中杜酷醇的条件选 择
[0035] 1. 1样品前处理；采用己醇做溶剂，溶解杜酷醇。与甲醇等溶剂相比，己醇无毒性， 更为安全。
[0036] 1. 2流动相及洗脱条件：
[0037] 采用甲醇-氨水作为流动化梯度洗脱的方式。与己膳-水、甲醇-水、己膳-氨 水等流动体系相比，采用甲醇-氨水流动相，可W在短时间内巧min)实现对杜酷醇的分离 检测，而且灵敏度最好。
[003引1.3质谱条件的选择：
[0039] 在APCI负离子监测模式下，杜酷醇主要生成[M-田-准分子离子，离子的质荷比 (m/z)为165,其保留时间为2. 21min，如图1所示，选择性对[M-田-进行产物离子扫描分 析，结果如图2所示，其母离子和碎片离子W及质谱条件见表1，杜酷醇生成的主要碎片离 子m/z是106,将其作为定量离子，杜酷醇的碎片离子的碎裂规律如图3所示，碎片离子93 是由分子离子165丢失CH2CH2CHOCH3,碎片离子106是由分子离子165丢失CH2CHOHCH3形成 的，碎片离子119,121是由分子离子165丢失CHOHCH3形成的。
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