032]与现有技术相比，上述技术方案中的一个技术方案具有如下优点：
[0033] a)本文针对烟草中常施用的五种杀菌剂霜霉威、多菌灵、稻瘟灵、三唑醇和三唑酮 中的任意一种或多种，利用超高效液相色谱-串联质谱仪(UPLC-MS/MS)，建立UPLC-MS/MS同 时快速分析烟蒂滤嘴、烟蒂中残留烟丝(烟蒂烟丝）中所述杀菌剂截留量的方法，可以应用 此方法研究所述五种杀菌剂在标准卷烟添加农药标准品（标烟加标样品）和挑选高杀菌剂 高烟叶利用小型卷烟机卷制的卷烟样品（自制卷烟样品）中的滤嘴转移率，为滤嘴风险评价 提供数据支撑。
[0034] b)发明人在实施本发明的过程中，尝试了多种提取溶剂对滤嘴中杀菌剂截留量的 提取方式，最终选择甲醇作为提取溶剂，既保留了较好的提取效果，又不会将滤嘴中聚丙烯 纤维或醋酸纤维溶解，从而降低了从提取溶剂中提取所述杀菌剂的难度。
[0035] c)发明人在实施本发明的过程中，尝试了多种UPLC色谱柱，包括UPLC HSS T3， UPLC BEH Shield RP18和Atlantis dC18等，最终选择了UPLC HSS T3柱，配合本发明的流 动相体系，能够获得更好的分离度与峰形。
[0036] d)发明人尝试了多种不同的流动相体系，最终确定了0.1%甲酸水和0.1%甲酸甲 醇体系与UPLC HSS T3柱配合，能够获得更好的分离度与峰形。
[0037] e)发明人选用了适当的梯度洗脱程序使得所述五种杀菌剂完全分离，整个梯度洗 脱时间为12min。
[0038] f)发明人采用针栗注射(5iiL/min)对目标物单独进样，将五种农药及内标(0.5iig/ mL)的标准溶液进行全扫，得到最大响应值的准分子离子[M+H]+为母离子，通过优化喷雾电 压、锥孔电压、碰撞能等参数使得母离子强度最大。
【附图说明】
[0039] 图1是本发明加标样品的选择离子流色谱图。
【具体实施方式】
[0040] 下面结合一个具体实施例进行说明。
[0041] 为使本发明实施方式的目的、技术方案和优点更加清楚，本实施例同时还对捕集 过烟气总粒相物的滤片、烟蒂(包括滤嘴和烟蒂烟丝）、烟灰和主流烟气气相物中的杀菌剂 残留进行同时分析，对本发明实施方式中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述 的实施方式是本发明一部分实施方式，而不是全部的实施方式。基于本发明中的实施方式， 本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施方式，都属于本 发明保护的范围。
[0042]本实施例对烟草中常施用的五种杀菌剂，利用超高效液相色谱-串联质谱仪 (UPLC-MS/MS)，同时快速分析主流烟气总粒相物、气相物、滤嘴、烟蒂中残留烟丝（烟蒂烟 丝)和烟灰中霜霉威、多菌灵、稻瘟灵、三唑醇和三唑酮五种农药截留量。应用此方法研究五 种杀菌剂在标准卷烟添加农药标准品（标烟加标样品）和挑选尚杀菌剂尚残留烟叶利用小 型卷烟机卷制的卷烟样品（自制卷烟样品）中的烟气及滤嘴转移率，为烟气及烟气的风险评 价提供数据支撑。需要指出的是，利用本实施例的方法，可以仅对霜霉威、多菌灵、稻瘟灵、 三唑醇和三唑酮中的任意一种杀菌剂进行测定，也可以对所述杀菌剂中的多种进行同步测 定。本实施例是对所述五种杀菌剂进行同步测定。
[0043] 霜霉威、多菌灵、稻瘟灵、三唑醇和三唑酮标准品来自于Labor Dr. Ehrenstorfer-Schafers(化学纯度：2 98 ? 5 %，Augsburg，德国），内标磷酸三苯酯（TPP)来自于Labor Dr ? Ehrenstorfer-Schafers(化学纯度：2 98 ? 5%，Augsburg，德国），甲酸（HPLC级，德国 Sigma公司）；甲醇，乙腈（色谱纯，美国Thermo-Fisher公司）；试剂包（内含lg梓檬酸钠和 〇.5g柠檬酸二氢钠，4g无水硫酸镁和lg氯化钠)和N-丙基乙二胺(PSA)购自安捷伦公司（美 国），水为超纯水。标准卷烟由国家烟草标准化中心提供，63个烟叶样品选自国内外农残普 查分析样品。
[0044] 超高效液相色谱-串联质谱仪(Xevo TQ，美国Waters公司），配备电喷雾电离源 (ESI);涡旋振荡器(VtexMixer 230VeU，美国Labnet公司）；斯茹林直线型吸烟机(SM450，英 国斯節林公司），离心机(Sigma 3K15,德国Sigma公司）。
[0045] 1、标准溶液配制
[0046]分别准确称取10mg的杀菌剂标准品，精确至O.OOOlg，用乙腈溶解定容至10mL，制 得1.0mg/mL的单一标准储备液。用乙腈准确配制混合标准储备液，其中，霜霉威：0.20mg/ mL;多菌灵和稻瘟灵:0.04mg/mL;三唑醇和三唑酮:0.10mg/mL，所述混合标准储备液储存于 棕色玻璃瓶中，-20°C保存。稀释所述混合标准储备液得到混合标准工作液，浓度分别为霜 霉威：0 ? 020mg/mL;多菌灵和稻瘟灵：0 ? 004mg/mL;三唑醇和三唑酮：0 ? 010mg/mL，所述混合 标准工作液储存于棕色玻璃瓶中，-20 °C保存。
[0047] 准确配置0.99mg/mLTPP内标标准储备液，储存于棕色玻璃瓶中，-20°C保存。取一 定量的所述内标储备液，用乙腈稀释定容，制得l〇yg/mL内标工作液。所有的储备液和工作 液于冰箱-20°C保存，使用前将其恢复到室温。
[0048] 2、样品的提取和净化
[0049]按照GB/T 16447-2004平衡烟支，ISO标准抽吸模式（ISO 3308:2000/GB/T 19609-2004)来捕集转移到主流烟气中的农药，每个滤片抽吸5支烟。捕集烟气后的捕集过烟气总 粒相物的滤片放入50mL具盖离心管中，并用空白滤片擦干净捕集器上的烟气总粒相物，一 并加入具盖离心管;分别收集每个孔道的滤嘴、烟蒂中残留烟丝(烟蒂烟丝）、烟灰于不同的 5〇mL具盖离心管;在每个捕集器后接100mL吸收瓶，吸收瓶预先加入20mL乙腈和100此内标， 用于捕集烟气气相物中的杀菌剂。
[0050] 烟蒂中烟丝的处理方法按照以下步骤顺序进行：将烟蒂中的烟丝剥离，合并放入 50mL第一旋盖离心管中，加入10mL超纯水震荡直至烟丝充分浸润，静置lOmin，向第一旋盖 离心管中加入l〇ml乙腈和200yL内标，第一涡旋震荡lmin，速率2000r/min。，随后放入-20°C 冰箱中冷冻保存。
[0051] 捕集过烟气总粒相物的滤片和烟灰的处理方法与烟丝的处理方法相同。
[0052] 样品经乙腈提取，基质分散固相萃取，过滤后用LC-MS/MS分析测定。
[0053]滤嘴的处理方法按照以下步骤顺序进行：取剔除烟丝滤嘴，每个滤嘴用剪刀剪成 四瓣，加入50mL第二旋盖离心管。每个所述第二旋盖离心管中放入5个滤嘴。向所述第二离 心管中加入20mL甲醇，振荡到样品被甲醇充分浸润，静置lOmin。随后向所述第二离心管中 加入200yL、10yg/mL内标，第二涡漩振荡5min，2000r/m，振荡完成后放入-20°C冰箱中冷冻 保存。
[0054]向经过涡漩振荡冷冻后的所述第一旋盖离心管和所述第二旋盖离心管中分别然 后依次加入4g无水硫酸镁、lg氯化钠、lg柠檬酸钠和0.5g柠檬酸二氢钠，第三涡漩振荡 5min，2000r/m〇
[0055]在第一旋盖离心管中移取其上清液于容积为1.8mL的第三旋盖离心管中，在第二 旋盖离心管中移取其上清液于容积为1.8mL的第四旋盖离心管中。分别向第三旋盖离心管 和第四旋盖离心管中加入150mg无水硫酸镁及25mgPSA吸附剂，所述第三旋盖离心管和所述 第四旋盖离心管经过第四漩涡振荡混合2min，2000r/m，然后6000r/m高速离心2min;吸取上 清液经有机