MRSP)生长和生物膜形成的抑制作用
[0110]伪中间葡萄球菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或Η)ΤΑ或氯化锌)及含有所有化合物(氯化钠+EDTA+氯化锌)的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37°C下孵育24小时。使用Labsystems MultiskanAscent酶标仪基于600nm下的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测:弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33%乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，包含柠檬酸钠、EDTA和氯化锌的组合物显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图2)。
[0111]实施例3:柠檬酸钠、EDTA和氯化锌单独及其组合对绿脓假单胞菌生长和生物膜形成的抑制作用
[0112]绿脓假单胞菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或Η)ΤΑ或氯化锌)及含有所有化合物(氯化钠+EDTA+氯化锌)的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37°C下孵育24小时。使用Labsystems MultiskanAscent酶标仪基于600nm下的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测:弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33%乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，包含柠檬酸钠、EDTA和氯化锌的组合物显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图3)。
[0113]实施例4:柠檬酸钠、EDTA和氯化锌单独及其组合对单核细胞增生利斯特氏菌生长和生物膜形成的抑制作用
[0114]单核细胞增生利斯特氏菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或Η)ΤΑ或氯化锌)及含有所有化合物(氯化钠+EDTA+氯化锌)的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37°C下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm下的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测:弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33%乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，包含柠檬酸钠、EDTA和氯化锌的组合物显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图4)。
[0115]实施例5:单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl2,以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCly和EDTA+ZnCl￡组合对甲氧西林耐药性金黄色葡萄球菌(MRSA)生长和生物膜形成的抑制作ffl
[0116]金黄色葡萄球菌(MRSA)的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2，和EDTA+ZnCl#l合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37°C下孵育24小时。使用Labsystems Multiskan Ascent酶标仪基于600nm下的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测:弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33%乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或Η)ΤΑ或氯化锌相比，柠檬酸钠+EDTA和柠檬酸钠+ZnCl2的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图5)。
[0117]实施例6:单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl2,以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCly和EDTA+ZnCl]组合对甲氧西林耐药性伪中间葡萄球菌(MRSP)牛长和牛物膜形成的作用
[0118]MRSP的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或Η)ΤΑ或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnClgl合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37°C下孵育24小时。使用Labsystems MultiskanAscent酶标仪基于600nm下的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测:弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33%乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCljP EDTA+ZnCl 2的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图6)。
[0119]实施例7:单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl2,以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCly和EDTA+ZnCl]组合对绿脓假单胞菌牛长和牛物膜形成的抑制作用
[0120]绿脓假单胞菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或Η)ΤΑ或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnClgl合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37°C下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm下的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测:弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33%乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，柠檬酸钠+EDTA和EDTA+ZnCl2的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图7)。
[0121]实施例8:单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl2,以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl”和EDTA+ZnCl:组合对猪霍乱沙门氏菌ATCC 10708的抑制作用
[0122]猪霍乱沙门氏菌ATCC 10708的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或EDTA或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnClgl合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37°C下孵育24小时。使用Labsystems Multiskan Ascent酶标仪基于600nm下的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测:弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33%乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA相比，柠檬酸钠+EDTA的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图8)。
[0123]实施例9:单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl2,以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCly和EDTA+ZnCl:组合对大肠杆菌0157:H7的抑制作用
[0124]大肠杆菌0157:H7的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或Η)ΤΑ或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2，和EDTA+ZnClgl合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37°C下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm下的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测:弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33%乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCljP EDTA+ZnCl 2的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图9)。
[0125]实施例10:单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl2,及其组合对大肠杆菌0157:H7的抑制舰
[0126]大肠杆菌0157:H7的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或Η)ΤΑ或氯化锌)及含有所有化合物(氯化钠+EDTA+氯化锌)的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37°C下孵育24小时。使用Labsystems MultiskanAscent酶标仪基于600nm下的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测:弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33%乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或EDTA或氯化锌相比，包含柠檬酸钠、EDTA和ZnCl2的组合物显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图10)。
[0127]实施例11:单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl2,以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合对表皮葡萄球菌的抑制作用
[0128]表皮葡萄球菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或Η)ΤΑ或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnClgl合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37°C下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm下的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测:弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33%乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或Η)ΤΑ相比，柠檬酸钠+EDTA的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图11)。
[0129]实施例12:单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl2,以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2，和EDTA+ZnCl#3.合对凝固酶阴件葡萄球菌(CoNS_42)的抑制作用
[0130]CoNS-42的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或Η)ΤΑ或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2，和EDTA+ZnClgl合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37°C下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm下的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测:弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用33%乙酸溶解染料，并且使用微量滴定板酶标仪来测定630nm处的吸光度。与单独的柠檬酸钠或Η)ΤΑ相比，柠檬酸钠+EDTA的组合显示出对生物膜形成的强化抑制作用(图12)。
[0131]实施例13:单独的柠檬酸钠、EDTA和ZnCl2,以及柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnCl2组合对无乳链球菌ATCC 12386的抑制作用
[0132]无乳链球菌的过夜肉汤培养基在TSB中生长并用作接种体。在不含以及单独含有各化合物(柠檬酸钠或Η)ΤΑ或氯化锌)及含有柠檬酸钠+EDTA、柠檬酸钠+ZnCl2、和EDTA+ZnClgl合的含TSB的96-孔微孔板中接种并在37°C下孵育24小时。使用LabsystemsMultiskan Ascent酶标仪基于600nm下的吸光度测定浮游细胞的生长。生物膜通过如下方式检测:弃去孔中的培养基，用水对孔清洗3次，并用结晶紫对结合的细胞进行染色。然后用3