D图案。在再另外的实施方案中，所述晶型具有包含在 衍射角（2 0 )8. 0±0. 2、10. 1±0. 2、11. 5±0. 2 及 22. 5±0. 2 的峰的PXRD图案。在另外的 实施方案中，所述晶型具有包含在与图1中所示实质上相同的衍射角（2 0 )的峰的PXRD图 案。
[0057] 在一些实施方案中，化合物1的结晶游离碱（A型）具有包含以下共振（ppm)值的 13C固态NMR光谱：12. 5ppm±0. 2ppm。在其它实施方案中，所述晶型具有包含以下共振（ppm) 值的13C固态NMR光谱：12. 5ppm及112. 4ppm±0. 2ppm。在另外的实施方案中，所述晶型具 有包含以下共振（ppm)值的13C固态NMR光谱：或12. 5ppm、112. 4ppm及143. 2ppm±0. 2ppm。
[0058] 在本申请中所述的一些实施方案中，化合物1的结晶游离碱通过粒径分析来辨 另IJ。在一些这样的实施方案中，所述游离碱具有约5微米至约150微米，优选约10微米至 约100微米，及更优选约15微米至约80微米的原生粒径。
[0059] 在其它这样的实施方案中，所述游离碱具有特征如下所示的原生粒径分布：（i) 约5微米至约10微米的D10值；（ii)约10微米至约45微米的D50值；或（iii)约30微 米至约125微米的D90值；或（i)、（ii)及（iii)的组合。在另外的实施方案中，所述游离 碱具有（D90-D10)/D50为约2至约3的原生粒径分布比。在另外的实施方案中，所述游离 碱具有约15微米至约125微米的体积平均直径（D[4, 3])。
[0060] 一方面，本发明提供一种具有大于约5微米的原生粒径的6-乙酰基-8-环戊 基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的结 晶游离碱。在一些实施方案中，所述游离碱具有大于约7. 5微米的原生粒径。在其它实施 方案中，所述游离碱具有大于约10微米的原生粒径。在其它这样的实施方案中，所述游离 碱具有大于约12. 5微米的原生粒径。在其它这样的实施方案中，所述游离碱具有大于约15 微米的原生粒径。
[0061] 在其它方面，本发明提供一种具有约5微米至约200微米的原生粒径的6-乙酰 基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧 啶-7-酮的结晶游离碱。在一些实施方案中，所述游离碱具有以下原生粒径：约5微米至约 175微米；约5微米至约150微米；约5微米至约125微米；约5微米至约100微米；约5微 米至约75微米；约10微米至约200微米；约10微米至约175微米；约10微米至约150微 米；约10微米至约125微米；约10微米至约100微米；约10微米至约75微米；约15微米 至约200微米；约15微米至约175微米；约15微米至约150微米；约15微米至约125微 米；约15微米至约100微米；或约15微米至约75微米。
[0062] 在其它方面，本发明提供一种具有原生粒径分布的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲 基-2- (5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的结晶游离碱， 所述原生粒径分布具有如下至少一种：
[0063] (a)约5微米至约10微米的D10值；
[0064] (b)约10微米至约45微米的D50值；以及
[0065] (c)约30微米至约125微米的D90值。
[0066] 在一些这样的实施方案中，所述游离碱具有约5微米至约10微米的D10值。在其 它这样的实施方案中，所述游离碱具有约30微米至约125微米的D90值。在其它这样的实 施方案中，所述游离碱具有约10微米至约45微米的D50值。在一些这样的实施方案中，所 述游离碱具有约5微米至约10微米的D10值及约30微米至约125微米的D90值。在另外 的实施方案中，所述游离碱具有约5微米至约10微米的D10值、约30微米至约125微米的 D90值，及约10微米至约45微米的D50值。
[0067] 在其它方面，本发明提供一种具有原生粒径分布的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲 基-2- (5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的结晶游离碱， 所述原生粒径分布具有如下至少一种：
[0068] (d)约5微米至约10微米的D10值；
[0069] (e)约10微米至约25微米的D50值；以及
[0070] (f)约30微米至约75微米的D90值。
[0071] 在一些这样的实施方案中，所述游离碱具有约5微米至约10微米的D10值。在其 它这样的实施方案中，所述游离碱具有约30微米至约75微米的D90值。在其它这样的实 施方案中，所述游离碱具有约10微米至约25微米的D50值。在一些这样的实施方案中，所 述游离碱具有约5微米至约10微米的D10值及约30微米至约75微米的D90值。在另外 的实施方案中，所述游离碱具有约5微米至约10微米的D10值、约30微米至约755微米的 D90值，及约10微米至约25微米的D50值。
[0072] 在其它实施方案中，所述游离碱具有原生粒径分布，该原生粒径分布具有以下D10 值：约5微米至约7. 5微米；约5微米至约10微米；约5微米至约12. 5微米；或约5微米 至约15微米。
[0073] 在其它实施方案中，所述游离碱具有原生粒径分布，该原生粒径分布具有以下D50 值：约10微米至约50微米；约10微米至约45微米；约10微米至约40微米；约10微米至 约35微米；约10微米至约30微米；约10微米至约25微米；或约10微米至约20微米。 [0074] 在再其它实施方案中，所述游离碱具有原生粒径分布，该原生粒径分布具有以下 D90值：约30微米至约175微米；约30微米至约160微米；约30微米至约150微米；约30 微米至约140微米；约30微米至约130微米；约30微米至约125微米；约30微米至约120 微米；约30微米至约115微米；约30微米至约110微米；约30微米至约100微米；约30 微米至约75微米；约30微米至约70微米；约30微米至约65微米；约30微米至约60微 米；约30微米至约55微米；约30微米至约50微米；或约30微米至约45微米。
[0075] 关于D10的实施方案的上述值各自可与任何不与其抵触的D50和/或D90值组 合。关于D50的实施方案的上述值各自可与任何不与其抵触的D10和/或D90值组合。关 于D90的实施方案的上述值各自可与任何不与其抵触的D10和/或D50值组合。
[0076] 在其它方面，本发明提供一种具有约2至约3的（D90-D10)/D50的原生粒径分布 比的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并 [2, 3-d]嘧啶-7-酮的结晶游离碱。在一些这样的实施方案中，所述游离碱具有约5微米至 约150微米的原生粒径。
[0077] 在此方面的一些实施方案中，所述游离碱具有以下的（D90_D10)/D50原生粒径分 布比：约2至约2. 75 ;约2至约2. 5 ;约2至约2. 25。在其它实施方案中，所述比为约2. 0、 约 2. 1、约 2. 2、约 2. 3、约 2. 4、约 2. 5、约 2. 6、约 2. 7、约 2. 8、约 2. 9、或约 3. 0。
[0078] 在再另一方面，本发明提供具有约15微米至约125微米的体积平均直径（D[4, 3]) 的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2- (5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d] 嘧啶-7-酮的结晶游离碱。在一些实施方案中，所述游离碱具有约50微米至约100微米的 D[4, 3]。在其它实施方案中，所述游离碱具有约15微米至约30微米的D[4, 3]。
[0079] 在再其它实施方案中，所述游离碱具有以下的D[4, 3]:约15微米至约100微米； 约15微米至约90微米；约15微米至约80微米；约15微米至约70微米；约15微米至约 60微米；约15微米至约50微米；约15微米至约40微米；约25微米至约120微米；约25 微米至约100微米；约25微米至约90微米；约25微米至约80微米；约25微米至约70微 米；约25微米至约60微米；约25微米至约50微米；约25微米至约40微米；约25微米； 约30微米；约35微米；约40微米；约45微米；约50微米；约55微米；约60微米；约65微 米；约70微米；约75微米；至约80微米；约90微米；约100微米；约105微米；约110微 米；约115微米；或约120微米。
[0080] 在另一方面，本发明提供包含本发明游离碱及药学上可接受的载体、稀释剂或赋 形剂的药物组合物。本发明另外提供包含本发明的所述药物组合物的胶囊。
[0081] 在一些实施方案中，所述胶囊包含0. 1至200毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲 基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的A型多晶型。 在其它实施方案中，所述胶囊包含25至150毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2- (5-哌 嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的A型多晶型。在其它实施方 案中，所述胶囊包含50至150毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2- (5-哌嗪-1-基-吡 啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的A型多晶型。在其它实施方案中，所述胶 囊包含50至100毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2- (5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨 基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的A型多晶型。在其它实施方案中，所述胶囊包含75至 150毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡 啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的A型多晶型。
[0082] 在另一方面，本发明提供一种治疗哺乳动物（包括人类）的癌症的方法，其包括对 所述哺乳动物给予治疗有效量的本发明药物组合物。在一些这样的实施方案中，所述药物 组合物以胶囊形式给予。所述胶囊可包含0. 1至200毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲 基-2- (5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮游离碱的A型多 晶型。在其它实施方案中，所述胶囊可包含25至150毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲 基-2- (5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮游离碱的A型多 晶型。在另外的实施方案中，所述胶囊可包含50至150毫克的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲 基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮游离碱的A型 多晶型。
[0083]用于表征根据本发明的化合物1的结晶游离碱的技术包括但不局限于粉末X射线 衍射测定法（PXRD)、固态NMR(SSNMR)、差示扫描量热法（DSC)、振动光谱法（例如IR及拉曼 光谱法）、偏振光显微术（PLM)、扫描电子显微术（SEM)、热载台光学显微术、电子晶体学、单 晶X射线衍射法、定量分析、粒径分析（PSA)(例如，粒径、粒径分布（PSD)及粒子形状）、比 表面积（SSA)分析、表面能分析（例如反相气相色谱法或IGC)、通过溶解度研究及溶出度研 究、或这些技术的组合。
[0084] 在其它方面，本发明提供用于制备如本申请中所述的具有大原生粒径的化合物1 游离碱的方法。一种方法涉及将小粒径的化合物1游离碱溶解于第一溶剂与第二溶剂的混 合物中并加热以获得溶解，冷却至适当温度，提供化合物1游离碱（A型）的晶种，接着结晶 以提供大粒径的化合物1游离碱。该方法中所使用的小粒径游离碱可从传统盐断裂程序， 例如通过中间体乙烯基醚的酸水解分离，以提供酸加成盐，接着碱化，如实施例5中所述。
[0085] 在一个实施方案中，本发明提供一种制备大粒径6-乙酰基-8-环戊基-5-甲 基-2- (5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的游离碱（A型） 的方法，其包括：（a)将6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基 氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮游离碱悬浮于第一溶剂与第二溶剂的混合物中， 并加热以获得溶解；(b)冷却至适当温度并提供6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌 嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮游离碱（A型）的晶种；（c)将 该混合物逐渐冷却以获得结晶；以及（d)分离该具有大粒径的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲 基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的游离碱（A 型）。
[0086] 在另一个实施方案中，本发明提供一种制备大粒径6-乙酰基-8-环戊基-5-甲 基-2- (5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的游离碱（A型） 的方法，其包括：（a)将6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基 氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮游离碱悬浮于正丁醇及茴香醚的混合物中，并加 热至约95至100°C以获得溶解；(b)冷却至约80°C并提供6-乙酰基-8-环戊基-5-甲 基-2- (5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮游离碱（A型） 的晶种；(c)将该混合物在约80°C维持约3小时，然后逐渐冷却至约10°C以获得结晶；以 及⑷过滤以分离该具有大粒径的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡 啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的游离碱（A型）。
[0087]另一种方法涉及中间体乙烯基醚于水与第一溶剂的混合物中的酸水解，其可能需 要加热以获得溶解，添加第二溶剂及碱化以提供包含在原位产生的游离碱的第二混合物， 视需要加热以获得溶解及馏出水，冷却至适当温度，提供化合物1游离碱（A型）的晶种，然 后结晶以提供具有大原生粒径的化合物1游离碱。
[0088] 在一个实施方案中，本发明提供一种制备大粒径6-乙酰基-8-环戊基-5-甲 基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的游离碱（A 型）的方法，其包括：（a)将4-{6-[6-(1_ 丁氧基-乙烯基）-8_环戊基-5-甲基-7-氧 代-7, 8-二氢吡啶并[2, 3-d]嘧啶-2-基氨基]-吡啶-3-基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯悬浮 于水及第一溶剂的混合物中，并加热以获得溶解；(b)添加酸及反应以在原位产生6-乙酰 基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧 啶-7-酮的酸加成盐；(c)添加第二溶剂及碱水溶液至pH值大于或等于10 ; (d)将有机层 分离并加热以馏出水；（e)冷却至适当温度并提供6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌 嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮游离碱（A型）的晶种；（f)将 该混合物逐渐冷却以获得结晶；以及（g)分离该具有大粒径的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲 基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的游离碱（A 型）。
[0089] 在另一个实施方案中，本发明提供一种制备大粒径6-乙酰基-8-环戊基-5-甲 基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的游离碱（A 型）的方法，其包括：（a)将4-{6-[6-(1_ 丁氧基-乙烯基）-8_环戊基-5-甲基-7-氧 代-7, 8-二氢吡啶并[2, 3-d]嘧啶-2-基氨基]-吡啶-3-基}哌嗪-1-甲酸叔丁酯悬浮 于水及正丁醇的混合物中，并加热至约70°C以获得溶解；(b)添加浓HC1并在约70°C加热 4至6小时；（c)添加茴香醚及NaOH水溶液以获得pH为>10的双相混合物；（d)分离层并 加热有机层至约120°C以馏出水；（e)冷却至约80°C并提供6-乙酰基-8-环戊基-5-甲 基-2- (5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮游离碱（A型） 的晶种；(g)将该混合物在约80°C维持约3小时，然后逐渐冷却至约10°C以获得结晶；以 及（g)过滤以分离该具有大粒径的6-乙酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡 啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的游离碱（A型）。
[0090] 在上述各方法的一些实施方案中，所述方法提供具有< 2平方米/克的比表面积 的化合物1游离碱。在上述各方法的其它实施方案中，所述方法提供具有< 1平方米/克 的比表面积的化合物1游离碱。在上述各方法的其它实施方案中，所述方法提供具有约5 微米至约150微米，优选约10微米至约100微米，及更优选约15微米至约80微米的原生 粒径的化合物1游离碱。在上述各方法的其它实施方案中，所述方法提供具有特征如下所 示的原生粒径分布的化合物1游离碱：（i)约5微米至约10微米的D10值；（ii)约30微米 至约125微米的D90值；或（iii)约10微米至约45微米的D50值；或⑴、（ii)及（iii) 的组合。在上述各方法的另外的实施方案中，所述方法提供具有约2至约3的（D90-D10)/ D50原生粒径分布比的化合物1游离碱。在上述各方法的另外的实施方案中，所述方法提供 具有约15微米至约125微米的体积平均直径（D[4, 3])的化合物1游离碱。
[0091] 在另一方面，本发明提供如本申请中所述根据这些方法之一制备的化合物1游 离碱。在一些实施方案中，本发明提供根据本申请中所述方法中的任一方法制备的6-乙 酰基-8-环戊基-5-甲基-2-(5-哌嗪-1-基-吡啶-2-基氨基）-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧 啶-7-酮的结晶游离碱（A型）。在一些这样的实施方案中，由本申请中所述方法制备的游离 碱可以其SSA、PSA或表面能、或这些方法的组合，单独或另外与PXRD或ssNMR组合来表征。 在一些这样的实施方案中，所述结晶游离碱具有介于0. 05至0. 25重量百分比（wt % )之间 的茴香醚和/或