次，然后加压50psi氢气。将该混合物加热 至42至47°C且允许搅拌直到氢气吸取停止为止（至少8小时）。
[0205] 过滤该产物混合物并以乙酸乙酯清洗（2X 1. 5mL)。在减压下将合并的滤液浓缩 至体积为6mL(2vol)。于该溶液中添加正庚烷（54mL，4. 5vol)，并在减压下蒸馏该混合物 至体积为6mL(2vol)。于该溶液添加正庚烷（54mL，4.5vol)。将所得的浓稠淤浆冷却至20 至25°C并允许搅拌2小时。过滤该淤浆并以正庚烷（36mL，3vol)清洗该滤饼。使该固体 在50至55°C的真空烘箱中干燥过夜。分离4- (6-氨基-吡啶-3-基）-哌嗪-1-甲酸叔丁 酯，为浅橘色固体（收集 10. 4g ;收率~96% )。4 NMR(500MHz, DMS0-d6) : S 7. 62(dd, J = 2. 99, 0. 60Hz, 1H), 7. 17 (dd, J = 8. 85, 2. 99Hz, 1H), 6. 40 (dd, J = 8. 85, 0. 60Hz, 1H), 5. 45 ( bs, 2H),3. 43(m, 2H),2. 85(m, 2H), l-41(s, 9H) ；13C NMR(125MHz, DMS〇-d6) ： 8 154. 8, 153. 8, 138. 7, 136. 8, 125. 9, 108. 3, 78. 9, 50. 5, 43. 8, 43. 0, 28. 0 ;HRMS:C14H23N402(M+H) +的计算值： 279. 18155,发现值：279. 18173。
[0206] 实施例2. 6-溴-2-氯-8-环戊基-5-甲基-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的 制备
[0207]
[0208] 步骤A. 5-溴-2-氯-6-环戊基氨基-嘧啶的制备
[0209] 于容器中添加纯乙醇（3000mL，3. Ovol)，然后添加5-溴-2, 4-二氯嘧啶（分子量 227. 87 ;1000g，1. 0当量）。添加三乙胺（612mL，1. 0当量），然后在2小时期间缓慢添加环 戊胺（分子量85. 15 ;520mL，1.2当量）以控制温和放热。在完成环戊胺添加之后，视需要， 以5-溴-2-氯-6-环戊基氨基-啼啶（5g，0. 5wt % )对反应加晶种来引发结晶。该反应于 25°C下搅拌2小时。
[0210] 在20至25°C下以30mL/分钟的速率将水（2500mL，2. 5vol)添加至该容器中。以 2°C /分钟将该混合物冷却至8至12°C。将该淤浆维持在8至12°C为时1小时，然后在 #2Whatman?滤纸上过滤。以正庚烷（2000mL)清洗该滤饼。以正庚烷（2000mL)在过滤干 燥器上将该滤饼再浆化。该物质在真空烘箱中于50至55°C下干燥过夜以产生呈白色固体 形式的5-溴-2-氯-6-环戊基-氨基嘧啶（1020g ;84% )。
[0211] 步骤B. 2-氯-8-环戊基-5-甲基-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的制备
[0212] 在周围温度下于容器中添加5-溴-2-氯-6-环戊基氨基-嘧啶（10. 0g，1.0当量） 以及N-甲基吡咯烷酮（NMP) (50mL，5. Ovol)。于该反应混合物中添加巴豆酸（4. 7g，1. 5当 量）及三乙胺（20. 2mL，4. 0当量）。将该容器脱气并使用氮气冲洗三次。于该经脱气的反 应混合物中添加Pd(0Ac)2(0. 25g，0. 03当量）。使用与步骤3相同方法将该容器脱气并以 氮气冲洗三次。将该混合物加热至65°C，并允许搅拌直到原料消耗为止（至少6小时）。
[0213] 将乙酐（6. 8mL，2. 0当量）添加至该反应混合物。使该反应在65°C下反应，直到原 料消耗为止（通常为1至2小时）。
[0214] 将该反应混合物冷却至20°C并添加H20(100mL，lOvol)以溶解三乙胺? HBr盐，并 沉淀出2-氯-8-环戊基-5-甲基-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮。该物质在20°C下粒 化1小时。将该固体过滤并以H20(20mL，2. Ovol)以及4:1的异丙醇/H20混合物（50mL， 5. Ovol)清洗。该粗制产物在真空下于55至70°C干燥以产生呈黄褐色至灰色固体形式的 2-氯-8-环戊基-5-甲基-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮（7. 8g ;81 % )。
[0215] 步骤C. 6-溴-2-氯-8-环戊基-5-甲基-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮的制备
[0216] 于衬有玻璃的容器中添加2-氯-8-环戊基-5-甲基-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧 啶-7-酮（9. 35g，1. 0当量）以及乙腈（65mL，7. Ovol)。添加N-溴琥珀酰亚胺（9. 67g，1. 5 当量）及草酸（〇. 65g，0. 2当量）。然后将该反应混合物加热至60±5°C。该反应在60°C 下搅拌直到原料消耗为止（至少6小时）。将该淤浆冷却至20°C且添加H 20(9mL，lvol)。 于该淤浆中添加于H20(38mL，4vol)中的亚硫酸氢钠溶液（3.88g，1.0当量）。使该淤浆粒 化1小时，然后在#2Whatman滤纸上直接过滤。以水（19mL，2vol)，然后以7:3的甲醇/乙 腈混合物（28mL，3v 〇l)清洗该反应容器，然后将该清洗液转移至该滤饼上。该产物在真空 烘箱中于50至55°C下干燥。分离出呈浅黄色固体形式的6-溴-2-氯-8-环戊基-5-甲 基-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮（10. 52g ;87% )。
[0217] 通过从甲苯及正庚烷再结晶进一步纯化该产物。将甲苯（60mL，6vol)及 6_溴-2-氯-8-环戊基-5-甲基-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮（10. 00g，1当量）添加 至反应容器并加热至80°C。将该温热反应混合物通过适当筒过滤以确保除去不可溶的Pd 及其它不可溶的污染物。该过滤器筒以80°C甲苯（5mL，0. 5vol)清洗。以1°C /分钟将该 淤浆冷却至25°C。以lmL/分钟将正庚烷（70mL，7vol)添加至该反应淤浆。以1°C /分钟 将该淤浆进一步冷却至〇°C。该淤浆于0°C粒化至少1小时。
[0218] 将该齡衆直接在#2Whatman滤纸上过滤。将正庚烧（30mL，3vol)装入该反应容器， 并将清洗液转移至该滤饼上，且在真空烘箱中于50至55°C下干燥该产物。分离出呈乳化 色固体形式的6-溴-2-氯-8-环戊基-5-甲基-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮（8. 73g， 87 % )。4 NMR(500MHz，DMS0-d6) : S 9. 20 (s，1H)，5. 82 (m，1H)，2. 65 (s，3H)，2. 11 (m，2H)， 2. 04(m, 2H), L 86(m, 2H), L 64(m, 2H) ；13C NMR(125MHz, DMS〇-d6) ： 8 158. 2, 158. 2, 157. 6, 154. 1, 144. 0, 120. 9, 113. 0, 54. 4, 28. 3, 25. 7, 18. 3 ^RMSzCuHMNABriCMM+Hr的计算值： 342. 00033,发现值：342. 00037。
[0219] 实施例3. 4- {6- [6-溴-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7, 8-二氢吡啶并[2, 3-d] 嘧啶-2-基氨基]吡啶-3-基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
[0220]
[0221] 以四氢呋喃（900mL，15mL/g)装填干燥、经氮气冲洗的反应器。批料温度设于 20°(：，且开始以2501?^搅动。以4-(6-氨基-吡啶-3-基）-哌嗪-1-甲酸叔丁酯（63.4 8， 0. 2278摩尔，1. 3当量）装填该反应器，并使该混合物保持在20°C下30分钟以使该原料溶 解。通过栗在30分钟期间以氯化异丙基镁（93. 9g，0. 193摩尔，第1次装填1. 1当量）（于 THF中2. 0M，1. 1当量）装填反应器。该批料维持在20°C下40分钟。以6-溴-2-氯-8-环 戊基-5-甲基-8H-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-7-酮（60. lg，0. 1755摩尔，1当量）一次装填该 反应器，并以THF冲洗（50mL冲洗）。通过栗在30分钟期间添加氯化异丙基镁的额外装填 (93. 9g，0. 193摩尔，1. 1当量，第2次装填（于THF中2. 0M，1. 1当量）。该批料保持在20°C 下90分钟，然后从20°C加热至60°C。
[0222] 反应之后，THF(2. 86vol)及H0Ac(l当量）的混合物用于淬灭反应。然后以0. 5wt/ wt %的4- {6- [6-溴-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7, 8-二氢-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-2-基氨 基]-吡啶-3-基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯对该批料加晶种并装填THF (1. 14vol)与HOAc (0. 4 当量）的混合物来完成沉淀。冷却至20°C之后，过滤该批料，以丙酮（4vol)、水（6vol)及 丙酮（4vol)清洗。
[0223] 该湿滤饼在真空下于65°C干燥至恒定重量以产生4-{6-[6-溴-8-环戊基-5-甲 基-7-氧代_7, 8-二氢-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-2-基氨基]-吡啶-3-基}-哌嗪-1-甲 酸叔丁酯，收率为 93 %。4 NMR (600MHz, THF-ds) : S 9. 36 (s, 1H)，8. 87 (s, 1H)，8. 22 (d, J = 8. 8Hz，1H)，8. 04 (d，J = 2. 9Hz，1H)，7. 39 (dd，J = 8. 8, 2. 9Hz，1H)，6. 10 (m，1H)，3. 55 (宽， 4H)，3. 09(宽，4H)，2. 60(s，3H)，2. 30(m，2H)，2. 09(m，2H)，1. 85(m，2H)，1. 66(m，2H)，1. 46 (s，9H) ;13C 匪R(150MHz，THF-ds) : S 159. 5, 158. 9, 157. 7, 156. 0, 155. 0, 147. 2, 144. 62, 1 44. 56, 138. 0, 126. 7, 117. 6, 114. 2, 108. 4, 79. 9, 55. 5, 50. 6, 44. 7, 29. 0, 28. 7, 26. 9, 18. 1 ； HRMSzC^iy^^BrdM+Hr的计算值：584. 19797,发现值：584. 19811。
[0224] 实施例4. 4-{6-[6-(1-丁氧基-乙烯基）-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7, 8-二 氢吡啶并[2, 3-d]嘧啶-2-基氨基]-吡啶-3-基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
[0225]
[0226] 以1- 丁醇（60mL，6mL/g)装填干燥、经氮气冲洗的反应器且添加 4-{6-[6_溴-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7, 8-二氢-吡啶并[2, 3-d]嘧啶-2-基氨 基]-吡啶-3-基}_哌嗪-1-甲酸叔丁酯（10g，0.017摩尔）及丁基乙烯基醚（5. lg，0.051 摩尔，3.0当量）。添加二异丙基乙胺（5. 3g，0.041摩尔，2. 4当量）且使氮气通过充气管为 时30分钟来使该混合物充气。添加乙酸钯（0. 16g，0. 00068摩尔，0. 0400当量）及双（2-二 苯基膦基苯基）醚（0. 45g，0. 00082摩尔，0. 04800当量）。在30分钟期间将该混合物加热 至95°C，且在95°C下搅拌该批料2小时。将该混合物冷却至80°C，并取样以监测反应完成。 于完成之后，添加水（15mL，1. 5mL/g)及 1- 丁醇（30mL，3mL/g)。
[0227] 该溶液经由0. 45微米的过滤器过滤以除去沉淀的钯。添加水（35mL，3. 5mL/g)，然 后添加1，2-二氨基丙烷（6. 3g，0. 085摩尔，5. 0当量）。该混合物在70°C下搅拌至少30分 钟。停止搅动，并使该混合物沉降15分钟。分离出底部水相，并在30分钟期间使该混合物 冷却至60°C。以4- {6-[6- (1- 丁氧基-乙烯基）-8-环戊基-5-甲基-7-氧代-7, 8-二氢吡 啶并[2, 3-d]嘧啶-2-基氨基]吡啶-3-基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯（C型）（50mg，0? 005g/ g)对该混合物加晶种并保持于60°C为时90分钟。
[0228]-旦观察到结晶，在1小时期间将该混合物冷却至50 °C，并在50 °C保持3小 时。在3小时期间将该混合物冷却至30°C，并在30°C保持2小时，然后在4小时期间冷 却至20°C，并在20°C保持4小时。过滤该淤浆并以1-丁醇（10mL，lmL/g)清洗。排出 该滤饼，并装填1-丁醇（10mL，lmL/g)，且在20°C下搅拌该淤浆1小时。排出该滤饼。用 甲基叔丁基醚（20mL，2mL/g)清洗该混合物，并使用延长吹过时间（2小时或更长）使该 滤饼完全脱液。在70°C下干燥该滤饼。收率为75至80%。4 NMR(600MHz，DMS0-d6): 8 10. 0 (s, 1H), 8. 87 (s, 1H), 8. 07 (d, J = 2. 9Hz, 1H), 7. 91 (d, J = 9. 0Hz, 1H), 7. 48 (dd, J = 9. 0, 2. 9Hz, 1H), 5. 83 (m, 1H), 4. 47 (d, J = 1. 6Hz, 1H), 4. 05 (d, J = 1. 6Hz, 1H), 3. 77 (t, J =6. 4Hz，2H), 3.48 (宽，4H), 3.11 (宽，4H), 2.37 (s，3H), 2.22 (m，2H), 1.89 (m，2H), 1.75 (m, 2H), 1. 61 (m, 2H), 1. 58 (m, 2H), 1. 43 (s, 9H), 1. 38 (m, 2H), 0. 90 (t, J = 7. 39Hz, 3H) ；13C NMR(150MHz, DMS〇-d6) ： 8 160. 9, 158. 2, 157. 3, 155. 2, 154. 6, 153. 7, 145. 0, 143. 0, 142. 6, 1 36. 0, 125. 8, 125. 5, 114. 6, 106. 6, 87. 8, 78. 9, 66. 8, 52. 8, 48. 5, 43. 4, 42. 5, 30. 3, 28. 0, 27. 4, 25. 1, 18. 8, 14. 4, 13. 6 ;HRMS:C33H46N704(M+H) +的计算值：604. 36058,发现值：604. 36049。
[0229] 所述中间体丁氧基-乙烯基醚可被分离成数种多晶型之一。A型在不加晶种的情 况下作为动力学产物分离，而B型在少数情况下分离但极少观察到。通过以C型晶体对反 应混合物加晶种获得丁氧基-乙烯基醚的最稳定晶型，即C型。这些多晶型中的任一种可 用于制备化合物1游离碱，但因为容易过滤，丁氧基-乙烯基醚的C型为优选。
[0230] 所述中间体丁氧基-乙烯基醚的A、B及C型多晶型的PXRD数据分别列表于表7、 8及9 〇
[0231] 表7.中间体丁氧基-乙烯基醚的A型多晶型的PXRD数据
[0232]
[0233] 表8.中间体丁氧基-乙烯基醚的B型多晶型的PXRD数据
[0234]
[0235] 表9.中间体丁氧基i乙烯基醚的d型多晶型的PX^D数据
[0236]
[0237]
[0238] 实施例5.通过盐断裂法制备小粒径化合物1游离碱
[0239]
[0240] 于反应器中添加4-{6-[6-(1_ 丁氧基-乙烯基）_8_环戊基-5-甲基-7-氧 代-7, 8-二氢吡啶并[2, 3-d]嘧啶-2-基氨基]-吡啶-3-基}-哌嗪-1-甲酸叔丁酯 (2. 70kg，4. 47 摩尔，1. 0 当量），然后添加水（27. OOL，lOL/kg)及丙酮（13. 50L，5L/kg)的混 合物。将该黄色淤浆加温至介于50°C与55°C之间。在大约10分钟期间，将以水（5. 40L， 2L/kg的原料）及丙酮（5. 40L，2L/kg的原料）稀释的甲磺酸溶液（2. 15kg，22. 36摩尔，5. 0 当量）添加至该反应器。使反应混合物保持在45°C与55°C之间至少12小时。在该反应期 间获致透明黄色溶液。
[0241] 将该反应混合物冷却至35°C，并将5wt %的氢氧化钠溶液的混合物分数部分添加 至该反应器以使该反应混合物升高至pH>9。将该反应器冷却至介于20°C与25°C之间，粒化 及过滤。以水然后以丙酮清洗该滤饼，并在真空下干燥。
[0242] 该方法产生小原生粒径化合物1游离碱，其与从W0 2005/005426的实施例4中使 用NaOH水溶液处理化合物1盐酸盐所制备的物质等效。
[0243] 除了上文提供的代表性程序（对应于表10中实验S)以外，还筛选了一定范围的 酸及水性溶剂系统以测定对该反应及随后淬灭及分离化合物1游离碱的影响。进行了实验 室规模筛选实验以鉴别用于将中间体乙烯基醚转化成游离碱化合物1的反应条件。这些反 应筛选实验的结果汇总于表10中，其表明所述方法的一般性。
[0244] 表10 :得自反应筛选实验的结果汇总
[0245]
[0246] 实施例6.化合物1的小粒径游离碱成为大粒径游离碱的转化
[0247]
[0248] 于反应器中添加根据实施例5制备的化合物1游离碱（20g，44. 69毫摩尔，1. 0当 量），然后添加1- 丁醇（320mL，16ml/g)与茴香醚（480mL，24ml/g)。将该黄色淤浆加温至 介于95°C与100°C之间以获得溶解。将该反应器冷却至80°C。于该反应器中的溶液中，装 填含有悬浮液于1- 丁醇（5mL，0. 25mL/g的原料）中的化合物1游离碱（A型）晶种（0. lg， 0.2毫摩尔，0.005当量）的晶种淤浆以引发结晶。将所得到的淤浆于80°C下搅拌3小时。 将该淤浆以0. 2°C /分钟在350分钟期间冷却至10°C、粒化及过滤。以茴香醚然后以庚烷 清洗该滤饼，并在真空下干燥它。
[0249] 此方法产生了化合物1游离碱的大原生粒径晶体，其与使用下文实施例7中所述 的一锅法所制备的游离碱等效。